袁永剛 張偉 馬歌

[摘要] 目的 探討非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者血清血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（sVEGF）表達(dá)水平的臨床意義。 方法 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）檢測(cè)71例NSCLC患者的sVEGF水平。 結(jié)果 NSCLC患者sVEGF水平與腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性。sVEGF在鱗癌與腺癌患者的表達(dá)水平分別是（163.4±22.4） pg/mL、（152.4±20.6） pg/mL（P < 0.05）。sVEGF在有或無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者表達(dá)水平分別是（182.1±22.1） pg/mL、（137.2±19.1） pg/mL（P < 0.05）。 結(jié)論 sVEGF在NSCLC中表達(dá)與腫瘤病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，是NSCLC增生和轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)。

[關(guān)鍵詞] 非小細(xì)胞肺癌；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；相關(guān)性

[中圖分類號(hào)] R446[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A[文章編號(hào)] 1674-4721（2012）07（c）-0130-02

Research on correlation between sVEGF and NSCLC

YUAN Yonggang ZHANG Wei MA Ge

Yidu Central Hospital Affiliated to Weifang Medical College, Qingzhou 262500, China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of the appearance of serum vascular endothelial growth factor(sVEGF) in non-small cell lung cancer (NSCLC) patients. Methods Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to detect the sVEGF level of 71 patients from Octoberm 2009 to Feburay 2012. Results There was no significant correlation between sVEGF in NSCLC patients and the tumor size. The sVEGF level of squamous carcinoma and adenocarcinoma were (163.4±22.4) pg/mL and (152.4±20.6) pg/mL respectively (P < 0.05). While the number in patients with or without lymph node metastasis were (182.1±22.1) pg/mL and (137.2±19.1) pg/mL respectively (P < 0.05). Conclusion The presence of sVEGF in NSCLC has relation wiht the tumor pathological type and lymph node metastasis. So it can be used as a significant index to reflect the tumor proliferation and metastasis.

[Key words] Non-small cell lung cancer; Vascular endothelial growth factor; Enzyme-linked immunosorbent assay; Correlation

肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，及時(shí)準(zhǔn)確地判定其轉(zhuǎn)移具有重要意義。本文通過檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的血清血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（sVEGF）水平，探討其與NSCLC患者的腫瘤大小、組織學(xué)分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系和臨床意義，以期為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009年10月～2012年2月間在本院胸外科接受治療、資料完整、術(shù)前未接受任何相關(guān)放化療治療，并經(jīng)術(shù)后病理確診為鱗癌或腺癌的71例NSCLC患者資料， 其中，男性49例，女性22例，年齡36～78歲，中位年齡62歲。TNM分期采用2003AJCC非小細(xì)胞肺癌分期系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)，ⅡA期4例，ⅡB期5例，ⅢA期14例，ⅢB期21例，Ⅳ期27例。

1.2 試劑及方法

采取外周靜脈血3 mL，置于促凝管中，于4℃ 3 000 r/min離心10 min，分離血清，置-70℃凍存?zhèn)錅y(cè)。血清VEGF檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）。方法與步驟：（1）包被抗體；（2）洗滌，移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液洗3次，每次5 min；（3）每凹孔加入0.2 mL用稀釋緩沖液稀釋的含抗原的被檢標(biāo)本，37℃作用1～2 h；（4）洗滌，重復(fù)步驟（2）；（5）加入0.2 mL用稀釋緩沖液稀釋的酶標(biāo)記特異性抗體溶液，37℃作用1～2 h或由預(yù)試實(shí)驗(yàn)確定作用時(shí)間；（6）洗滌，重復(fù)步驟（2）；（7）加入0.2 mL底物溶液于每個(gè)凹孔，室溫作用30 min（另作一空白對(duì)照，0.4 mL底物加0.1 mL終止劑）；（8）加終止劑；（9）觀察記錄結(jié)果：用酶標(biāo)比色計(jì)測(cè)定OD值；（10）各孔OD值減去空白對(duì)照孔OD值為實(shí)際OD值；（11）以標(biāo)準(zhǔn)品濃度50、25、10、5、2.5、1 ng/mL之OD值為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線；（12）根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；（13）敏感度為0.01 ng/mL；（14）正常值<1.5 ng/mL。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，以x±s表示sVEGF的水平，兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

NSCLC患者sVEGF水平與腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性，與腫瘤病理類型及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性。見表1、2、3。

3 討論

3.1 VEGF與NSCLC

已有研究[1]表明腫瘤是血管生成依賴性疾病，幾乎所有實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移均依賴于腫瘤血管的生成。目前研究表明，VEGF是作用最強(qiáng)、特異性最高的血管生成調(diào)控因子[2-3]。在約60%的肺癌患者中VEGF會(huì)特異性的表達(dá)增高，可由腫瘤細(xì)胞自分泌產(chǎn)生，或由腫瘤細(xì)胞異常增生使其處于缺氧條件下誘導(dǎo)產(chǎn)生，以旁分泌方式特異地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的兩種酪氨酸激酶受體，通過細(xì)胞黏附修飾蛋白，增加蛋白水解酶分泌，刺激新生血管的生成、增殖、遷移，并可顯著地增加微血管的通透性[4]。

3.2 NSCLC患者sVEGF水平與各臨床病理特征的關(guān)系

3.2.1 sVEGF的表達(dá)與NSCLC組織病理學(xué)類型關(guān)系本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)71例非小細(xì)胞肺癌組織中，鱗癌和腺癌的血清VEGF平均表達(dá)水平分別是（163.4±22.4） pg/mL和（152.4±20.6） pg/mL，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。國(guó)外在這方面也有類似研究，如Buttery等應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)分析研究sVEGF在47例非小細(xì)胞肺癌與18例小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)，結(jié)果提示sVEGF在鱗癌中呈高表達(dá)（42/47），在腺癌中呈低表達(dá)（5/18）。

3.2.2 sVEGF的表達(dá)與NSCLC腫瘤大小的關(guān)系在本實(shí)驗(yàn)中，腫瘤≥5 cm患者平均sVEGF水平為(162.5±21.8) pg/mL，腫瘤<5 cm患者的平均sVEGF水平為（154.5±26.5） pg/mL，兩組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），提示NSCLC患者sVEGF水平與腫瘤大小無(wú)明顯相關(guān)性。

3.2.3 NSCLC患者sVEGF表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系淋巴管轉(zhuǎn)移是非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的重要途徑，是其預(yù)后不良的重要危險(xiǎn)因素之一。將本組71例NSCLC標(biāo)本按照有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分組發(fā)現(xiàn)，sVEGF表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)：sVEGF在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，而且淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組sVEGF的強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)遠(yuǎn)高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。呂志強(qiáng)等[5]、Kajiat T等[6]、郭沁香[7]亦有相似發(fā)現(xiàn)。由此推論，sVEGF可能參與NSCLC遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。關(guān)于VEGF促進(jìn)腫瘤的淋巴管生長(zhǎng)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的作用途徑，多數(shù)研究認(rèn)為VEGF與其受體結(jié)合后，引起內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，調(diào)控血管及淋巴管的生成從而在腫瘤的進(jìn)展中發(fā)揮重要作用[8]。

[參考文獻(xiàn)]

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[3]張帥，胡立寬，許曼，等. 血清VEGF水平在非小細(xì)胞肺癌綜合評(píng)價(jià)中的作用[J]. 山東大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2008，46（12）：1177-1180.

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[5]呂志強(qiáng)，李海剛，謝德榮,等. 非小細(xì)胞肺癌組織中VEGF-C和VEGFR-3的表達(dá)及其臨床意義[J]. 癌癥，2005，24（9）：1132-1135.

[6]Kajiat T，Ohta Y，Kimura K，et al. The experssion of vascular endohetlial growth factor C and its receptors in non-small cell lung cancer[J]. Br J Cancer，2001，85（2）：255-260.

[7]郭沁香. VEGF、bFGF及抗血管生成療法在肺癌診斷、治療中的應(yīng)用研究[D]. 山西醫(yī)科大學(xué)，2008.

[8]Christoph W，Michael D. Pathways targeting tumor lymphangiogenesis[J]. Clin Cancer Res，2006，12（23）：6865-6868.

（收稿日期：2012-06-14本文編輯：陳?。?/p>