杜會博 姜 華 陳彥靜 馬建偉 焦 宏 (河北北方學(xué)院，河北 張家口 075000)

桂枝湯對高脂血癥大鼠心肌缺血后的血液流變性的影響

杜會博 姜 華 陳彥靜1馬建偉 焦 宏 (河北北方學(xué)院，河北 張家口 075000)

目的 觀察桂枝湯對高脂血癥大鼠心肌缺血后血液流變性的影響。方法 采用高脂飼料、丙硫氧嘧啶及大劑量VD3多因素聯(lián)合誘導(dǎo)方法，建立大鼠高脂血癥模型。大劑量腹腔注射垂體后葉素，造成心肌缺血。檢測各組大鼠全血黏度、血漿黏度、紅細胞聚集指數(shù)、紅細胞電泳等血液流變學(xué)指標。結(jié)果 桂枝湯可以顯著降低高脂血癥大鼠心肌缺血后的全血黏度、全血還原黏度與相對黏度、血漿黏度，改善紅細胞流變性。結(jié)論 桂枝湯對高脂血癥大鼠心肌缺血后的血液流變性異常具有明顯的改善作用。

心肌缺血;桂枝湯;高脂血癥;血液流變學(xué)

冠心病是指由于冠狀動脈粥樣硬化導(dǎo)致心肌缺血、缺氧而引起的心臟病，是動脈粥樣硬化導(dǎo)致器官病變的最常見類型，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。中醫(yī)藥治療冠心病(胸痹)多從“氣血陰陽失調(diào)，臟腑虛損”或從“絡(luò)病”論治，發(fā)病機制集中于寒、痰、瘀、虛〔1～3〕，改善血液流變學(xué)指標有利于冠心病患者的康復(fù)〔4〕。本研究根據(jù)冠心病的致病因素及發(fā)病特點，建立高脂血癥、維生素D3-垂體后葉素心肌缺血大鼠模型，觀察桂枝湯改善血液流變性的作用，探討調(diào)和營衛(wèi)治療冠心病的機制，為豐富“損其心者，調(diào)其營衛(wèi)”的理論內(nèi)涵奠定實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

健康雄性SD大鼠60只，體重250～270 g，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實驗動物科學(xué)部提供。高脂飼料配制：由10%豬油、2%膽固醇、0.5%膽酸鈉、0.2%丙基硫氧嘧啶、0.1%鈣片和87.2%普通飼料配制成。桂枝湯制備：桂枝、白芍、甘草、生姜、大棗，所有藥材均購自北京同仁堂藥店。按原方比例10∶10∶7∶10∶10 配齊藥物(生姜切片，大棗剖開)混合，水浴濃縮成10 g/L、20 g/L 濃度。

1.2 動物模型建立

普通喂養(yǎng)動物1 w，使其適應(yīng)環(huán)境。1 w后眶內(nèi)采血檢測血脂，在正常范圍者則用于下一步實驗，否則棄去。高脂血癥模型：高脂飼料喂養(yǎng)12 w，每天15 g，期間按70萬IU/kg的總劑量肌肉注射給予VD3，于第1、4、8周初分次給完，于實驗第12周末大鼠禁食12 h斷尾取血，檢查各組大鼠血清總膽固醇含量，根據(jù)前期實驗結(jié)果證實高脂血癥模型是成功的〔5〕。心肌缺血：末次給藥前72 h，除對照組外，于灌胃給藥30 min后，各組動物腹腔注射垂體后葉素30 U/kg，對照組給予等容量的生理鹽水，連續(xù)3次，每間隔24 h，誘發(fā)冠狀動脈痙攣，造成心肌缺血，根據(jù)前期血脂、心電圖缺血改變以及主動脈和心肌組織病理形態(tài)學(xué)的變化，證實心肌缺血復(fù)制成功〔5〕。

1.3 實驗分組

待實驗組動物出現(xiàn)高脂血癥后，根據(jù)體重排序，隨機均分為5組：即對照組、模型組、辛伐他汀組、桂枝湯10 g治療組(桂枝湯低劑量組)、桂枝湯20 g治療組(桂枝湯高劑量組)。于第13周起開始灌胃給藥，每日一次，連續(xù)6 w;辛伐他汀組：辛伐他汀5.0 mg·kg－1·d－1，為成人劑量的20倍，10 ml/kg灌胃給藥;桂枝湯治療組：桂枝湯大、小劑量組給藥劑量分別為20、10 g·kg－1.d－1(含生藥量)，10 ml/kg 灌胃給藥;對照組和模型組以相應(yīng)量的生理鹽水灌胃。

1.4 血液流變學(xué)指標的測定

各組動物分別于實驗18 w，20%烏拉坦腹腔麻醉，腹主動脈取血，經(jīng)肝素抗凝后，取2 ml應(yīng)用3-9D型血流變、微循環(huán)、紅細胞變形、參數(shù)分析四用儀(成都麥賽)應(yīng)用綜合傳感法檢測全血黏度、血漿黏度指標〔6〕;將制備好的電泳液和電極液(配制方法見參考文獻〔7〕)用吸管和加樣器加入電泳板的電泳槽和電極槽中，將血沉檢測中的紅細胞加到電泳板上，測量紅細胞單位時間內(nèi)移動的最大距離和最小距離，記錄數(shù)據(jù)，計算紅細胞遷移率、紅細胞聚集指數(shù)等指標。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血黏度指標的變化

中、低切變率下的全血黏度、全血相對黏度、全血還原黏度以及血漿黏度均顯著高于對照組(P＜0.01);陽性對照辛伐他汀組的各指標均顯著低于模型組(P＜0.05或P＜0.01)，除低切全血黏度高于對照組外，其他各指標均于對照組無顯著差異;桂枝湯組除低濃度組在低切下的全血黏度高于對照組、與模型組無顯著差異的外，其他各組、各指標均顯著低于模型組(P＜0.05或P＜0.01)。

2.2 各組大鼠紅細胞流變學(xué)指標的變化

模型組的紅細胞聚集指數(shù)高于、紅細胞電泳時間長于、遷移率低于對照組(P＜0.01或P＜0.05);辛伐他汀組和桂枝湯低、高濃度組與模型組比較紅細胞電泳時間、電泳長度遷移率差異顯著(P＜0.01或P ＜0.05)，見表2。

由表1可見，模型組在高、

表1 各組大鼠血黏度的變化 s，n=12)

表1 各組大鼠血黏度的變化 s，n=12)

與對照組比較：1)P ＜0.01;與模型組比較：2)P ＜0.05，3)P ＜0.01，下表同

7±0.03 0.88±0.09模型組 3.95±0.101) 4.57±0.201) 13.36±0.941) 4.33±0.181) 0.23±0.011) 2.19±0.151)辛伐他汀組 3.22±0.303) 3.60±0.252) 10.82±0.851)2) 2.87±0.243) 0.16±0.023) 1.20±0.113)桂枝湯組低劑量組 3.40±0.232) 3.64±0.412) 11.30±0.851) 3.06±0.353) 0.18±0.022) 1.27±0.093)桂枝湯組高劑量組 2.42±0.323) 2.82±0.423) 8.25±1.143) 2.34±0.323) 0.15±0.023) 1.04±0.153)血漿黏度對照組 2.71±0.13 3.30±0.31 6.41±0.63 2.96±0.32 0.1組別 全血黏度(mPS)3 001/s 1 151/s 1 001/s 相對黏度 還原黏度

表2 18 w各組大鼠血液紅細胞血液流變學(xué)的變化 s，n=12)

表2 18 w各組大鼠血液紅細胞血液流變學(xué)的變化 s，n=12)

組別 紅細胞聚集指數(shù)紅細胞電泳時間(s)細胞遷移率(%)7.65±1.05 24.45±4.39 10.91±1.35模型組 9.33±1.461) 45.25±6.902) 5.52±0.641)辛伐他汀組 8.73±0.88 33.19±4.202) 7.05±0.982)桂枝湯組低劑量組 8.48±0.88 29.29±2.453) 8.11±0.952)桂枝湯組高劑量組 8.02±1.152) 27.68±11.323) 8.62±1.013)對照組

3 討論

本實驗從冠心病的易患因素高脂血癥著手，依據(jù)冠心病的發(fā)病機制，采用高脂飼料、丙硫氧嘧啶及大劑量VD3多因素聯(lián)合誘導(dǎo)高脂血癥和動脈粥樣硬化早期改變，建立大鼠高脂血癥模型;在此基礎(chǔ)上，應(yīng)用大劑量腹腔注射垂體后葉素的方法，造成心肌缺血(胸痹)模型。此方法復(fù)合造模，更符合冠心病發(fā)病特點〔8，9〕。結(jié)合前期血脂、心電圖心肌缺血改變，說明本實驗性大鼠模型符合冠心病發(fā)生、發(fā)展的高脂血癥、動脈粥樣硬化及冠狀動脈痙攣，心肌缺血缺氧等的病理改變，結(jié)果證實實驗性大鼠心肌缺血損傷(胸痹)模型是成功的。在此基礎(chǔ)上，進一步觀察桂枝湯對該模型大鼠血液流變學(xué)指標的影響。

本實驗發(fā)現(xiàn)，提示血液黏度的異常參與了心肌缺血后冠心病的發(fā)生與發(fā)展;桂枝湯組不同切變率下的全血黏度、血漿黏度、全血相對黏度及全血還原黏度等指標均顯著低于模型組，其作用機制可能與桂枝湯降低血脂的作用有關(guān)。由于血液黏度與氧供有直接的關(guān)系〔10〕，氧供又進一步與血管內(nèi)皮細胞、紅細胞的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，是影響細胞膜泵功能與氧化應(yīng)激的重要因素〔11，12〕。因此，本研究提示，桂枝湯改善大鼠心肌損傷的機制與改善血液黏度有關(guān)。

研究表明，成熟紅細胞是血液循環(huán)中數(shù)量最多的細胞，除了參與呼吸、免疫功能外，它還具有參加能量代謝的遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，紅細胞的功能狀態(tài)對多種病理生理過程的發(fā)生與轉(zhuǎn)歸有重要影響〔13〕。同樣，紅細胞流變特性的變化也參與了冠心病以及血液流變性異常的發(fā)生〔14〕。本文的研究結(jié)果顯示，模型組反映紅細胞流變特性的指標均出現(xiàn)了異常，表現(xiàn)在紅細胞電泳能力降低、紅細胞聚集性增高，說明紅細胞流變性異常是引起血液黏度異常的因素，也是加重心肌缺血的原因;而桂枝湯對紅細胞流變性異常具有明顯的校正作用，這可能是桂枝湯改善高脂血癥大鼠心肌缺血的機制之一。

總體來看，高、低濃度的桂枝湯對高脂血癥大鼠心肌缺血后的血液流變性異常具有不同程度的干預(yù)作用，研究結(jié)果為桂枝湯冠心病的臨床防治提供了實驗依據(jù)。

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R256.22

〕 A

1005-9202(2012)22-4947-03;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.22.043

河北省中醫(yī)藥管理局項目(2008103)

1 中國中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所

陳彥靜(1966-)，女，教授，博士后，碩士生導(dǎo)師，主要從事心血管病理生理學(xué)研究。

杜會博(1982-)，男，助理實驗師，碩士，主要從事心血管病理生理學(xué)研究。

〔2011-09-23收稿 2011-12-12修回〕

(編輯 曹夢園)