張秀麗

（繁峙縣第一人民醫(yī)院，山西 繁峙 034300）

標(biāo)本溶血是由各種因素如真空采血時負(fù)壓過大、水浴箱中溫度偏高、離心分離血清時轉(zhuǎn)速過高等造成紅細(xì)胞破裂，而使血紅蛋白逸出紅細(xì)胞的一種現(xiàn)象［1］。檢測血樣溶血現(xiàn)象是臨床生化檢測中最常見的干擾因素之一。標(biāo)本溶血可分為體外溶血與體內(nèi)溶血，其中，體外溶血多由物理因素（如抽血時負(fù)壓過大、水浴溫度過高、冰凍、振蕩等機(jī)械性破壞），化學(xué)因素（血樣接觸表面活性劑）以及代謝因素（如遺傳病引起紅細(xì)胞脆性增加）導(dǎo)致；體內(nèi)溶血則主要由物理因素（如人工心臟瓣膜或大血管手術(shù)后）、化學(xué)因素（如惡性瘧疾）以及藥物毒性反應(yīng)等因素引起。隨著真空管采血越來越多地應(yīng)用于臨床生化檢驗，標(biāo)本溶血現(xiàn)象日趨頻繁。由標(biāo)本溶血導(dǎo)致白細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞等血細(xì)胞破壞所釋放的某些胞內(nèi)成分已對臨床生化指標(biāo)造成嚴(yán)重干擾。本文通過研究標(biāo)本溶血現(xiàn)象對臨床生化指標(biāo)測定結(jié)果的影響，探討溶血標(biāo)本的防治措施，以提高臨床生化檢驗的準(zhǔn)確性?，F(xiàn)總結(jié)報告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

選取2010年2月—2011年2月我院30例健康體檢者的血液標(biāo)本，所有體檢者均行早晨空腹血4mL，分別注入兩支干燥試管各2mL，其中一試管置低溫冰箱凍結(jié)20min后，取出融化，以4000r／min離心5min，分離溶血血清；另一試管在取血1h后以相同條件離心，分離不溶血血清，管內(nèi)血清無肉眼可見的黃疸與脂濁。

1.2 標(biāo)本制備

選取經(jīng)過血細(xì)胞學(xué)分析紅細(xì)胞比容（HCT）40%±2%，分離血清備用；剩余壓積紅細(xì)胞置20℃環(huán)境1h后，取出化凍、震蕩混勻并進(jìn)行離心，取上層溶血液2，4，6，8，10，12，14，16，18，20μL，分別加入600μL血清中，制備成不同程度的溶血標(biāo)本。

1.3 檢驗方法

取上述溶血血清及非溶血血清，分別測定其DBIL、AST、TP、GLu、TBIL、ALT、ALP、UA、TBA、GGT、Crea、LDH、Cr、TCH、α－HBD、TG、CK等常規(guī)生化項目。

1.4 統(tǒng)計方法

所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS11.3統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，結(jié)果采用t檢驗。

2 結(jié)果

與正常標(biāo)本的生化項目檢驗結(jié)果比較，受溶血影響的生化項目較實際數(shù)值偏高，且因溶血程度的不同及生化檢測項目的不同所產(chǎn)生的檢驗干擾也有所不同。

其中，標(biāo)本輕微溶血（H＝1，Hb＝0.94±0.27g／L）時產(chǎn)生干擾的干擾項目有LDH、AST、CK、AFU、K＋、CK－MB、Na＋、IP、C1－以及Ca2＋；標(biāo)本嚴(yán)重溶血時（H≥10，Hb＝8.27±0.56g／L）對絕大多生化項目均會產(chǎn)生不同程度干擾，最高干擾程度達(dá)1521%（CK－MB）。

3 討論

溶血是臨床生化檢驗中最常見的干擾因素之一，標(biāo)本溶血產(chǎn)生的白細(xì)胞、紅細(xì)胞以及血小板等血細(xì)胞破裂所釋放的某些胞內(nèi)成分均會對臨床生化指標(biāo)的測定結(jié)果造成不同程度的干擾，從而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。通常情況下，標(biāo)本血細(xì)胞高濃度組分逸出使得血漿分析物濃度增加，如血細(xì)胞中某一分析物濃度高出血漿濃度過多，相對應(yīng)的，血漿中該成分的濃度也會隨之增高，進(jìn)而導(dǎo)致項目檢驗結(jié)果高于實際數(shù)值。

紅細(xì)胞內(nèi)外液的濃度差是標(biāo)本溶血產(chǎn)生干擾的主要原因。一般而言，紅細(xì)胞內(nèi)濃度較血漿中濃度明顯高的物質(zhì)如下：CK（68倍）、K＋（25倍）、AST（11倍）、ALT（8倍）等［2］；其次，紅細(xì)胞外血紅蛋白達(dá)到一定程度會對比色檢測產(chǎn)生一定影響；此外，樣本溶血引起細(xì)胞內(nèi)外液之間的各種反應(yīng)也是影響項目檢測結(jié)果的重要原因。

大量臨床實踐表明，生化檢驗結(jié)果能否真實反應(yīng)患者血清實際狀況具有十分重要的臨床意義。傳統(tǒng)生化檢測項目中通常采用干化學(xué)法在其干片涂層中附著特殊膠膜，以有選擇性地過濾、吸附過程中的干擾物［3］。但本文實驗結(jié)果表明，標(biāo)本溶血幾乎會對所有生化項目的檢驗結(jié)果產(chǎn)生干擾，尤其是對CK、K＋、ALT、ALT、GLu等項目的干擾更為嚴(yán)重，導(dǎo)致其檢驗數(shù)值極大地偏高。以血清葡萄糖（GLu）的下降原因為例，有學(xué)者經(jīng)過試驗證明：可排除血紅蛋白（HB）對葡萄糖氧化酶的直接抑制作用，引起血清葡萄糖（GLu）及以上生化項目檢驗值降低的原因可大致歸為以下方面影響機(jī)制所致：①隨著溶血進(jìn)入血清，紅細(xì)胞中濃度極低的物質(zhì)與紅細(xì)胞內(nèi)液體引起了血清體積增加，對血清產(chǎn)生了一定的稀釋作用［4］，造成標(biāo)本血清中原有成分濃度降低；②紅細(xì)胞中的部分成分溶解到血清中干擾結(jié)果反應(yīng)，如對葡萄糖氧化酶的活性抑制及檢驗中試劑的化學(xué)反應(yīng)等。

標(biāo)本溶血會導(dǎo)致臨床常用生化項目指標(biāo)偏差，因此，為減少檢驗失誤及誤差，提高檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，一旦發(fā)現(xiàn)有溶血標(biāo)本，應(yīng)立即采取相應(yīng)解決措施，如對輕度溶血標(biāo)本檢驗結(jié)果進(jìn)行較正，甚至重新抽取血標(biāo)本；也可從方法學(xué)方面減少甚至克服溶血干擾，比如血紅蛋白（HB）對吸光度的干擾可通過設(shè)置樣品空白或改用雙波長比色來解決。

綜上，隨著近年全自動生化分析儀的快速普及，血清標(biāo)本是否溶血的檢驗已成為臨床生化項目過程中進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控的重要環(huán)節(jié)。

［1］莊俊華.臨床生化檢驗技術(shù)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.

［2］季國忠.臨床檢驗診斷解析［M］.南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2011.

［3］孔祥明.臨床檢驗正常參考值手冊［M］.北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2002.

［4］張秀明.臨床檢驗標(biāo)本采集手冊［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2011.

［5］張秀明，楊志釗，楊有業(yè).臨床基礎(chǔ)檢驗——質(zhì)量管理與標(biāo)準(zhǔn)操作程序［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2010.

［6］李世榮，孫明強(qiáng)，趙超.血液學(xué)檢驗分冊［M］.北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2007.

［7］本社.紅細(xì)胞沉降率測定參考方法［M］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2011.