王偉杰 浙江省仙居縣人民醫(yī)院兒科 仙居 317300
阮仙利 浙江省立同德醫(yī)院兒科
傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)是由于EB病毒感染后引起的單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)急性增生性疾病,全年都可發(fā)病,小兒時(shí)期容易感染,抗感染治療無效,并且有發(fā)生惡性組織細(xì)胞增生癥和急性淋巴細(xì)胞性白血病的風(fēng)險(xiǎn),也與多種兒童惡性腫瘤發(fā)生有關(guān)[1-2]。對(duì)此,我們對(duì)2006年6月—2009年6月的57例急性感染期傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)患兒和50名健康兒童,應(yīng)用免疫放射比濁法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血清中Ig和T淋巴細(xì)胞亞群,觀察IM患兒的免疫功能的變化狀況,以探討其臨床意義,報(bào)道如下。
1.1 對(duì) 象 IM患兒57例,男35例,女22例;年齡0.9~11歲,平均5.3歲;診斷均符合第6版《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)照組為健康體檢者,共50名,男31名,女19名;年齡0.8~13歲,平均5.6歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 血液標(biāo)本的采集 均清晨空腹靜脈采血1mL,置于含EDTA的抗凝管中;再各抽取靜脈血3mL,置于干燥試管,1天內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
1.2.2 病毒檢測(cè) 應(yīng)用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))方法檢測(cè)。
1.2.3 流式細(xì)胞術(shù) 吸取含10%EDTAK2的血液標(biāo)本100μL,加入FITC CD4+、CD8+及PE CD19+鼠抗人熒光單克隆抗體(由美國(guó)BD公司提供)各10μL,室溫避光孵育20min,加入紅細(xì)胞裂解液1mL,室溫放置10min,用PBS洗滌2次,加PBS400μL上機(jī),采用FASACalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+、CD8+、CD19+的表達(dá)率。
1.2.4 血清Ig測(cè)定 應(yīng)用免疫放射比濁法(試劑盒由BECKMAN公司提供)。
1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件,數(shù)據(jù)以(±s)表示,使用t檢驗(yàn)。
IM組IgA、IgG、CD3+、CD4+和CD4+/CD8+及CD19+比值明顯低于對(duì)照組(P<0.01)。而IM組CD3+、CD8+明顯高于對(duì)照組(P<0.01),IgM與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1~2。
表1 兩組血清Ig變化(±s) g/L
表1 兩組血清Ig變化(±s) g/L
注:與對(duì)照組比較,*P<0.01
n/例50 57 IgG 10.61±3.45 8.33±2.75*IgA 1.24±0.56 0.89±0.69*IgM 1.78±0.51 1.83±0.45組 別對(duì)照組IM組
表2 兩組淋巴細(xì)胞表達(dá)率比較(±s) %
表2 兩組淋巴細(xì)胞表達(dá)率比較(±s) %
注:與對(duì)照組比較,*P<0.01
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IM是一種主要由EB病毒(EBV)感染引起的單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)急性增生性疾病。EB病毒又稱人類皰疹病毒,僅能在B淋巴細(xì)胞中增殖,可使其轉(zhuǎn)化,能長(zhǎng)期傳代,EB病毒在人群中廣泛感染,我國(guó)3~5歲兒童EB病毒vca-lgG抗體陽(yáng)性率達(dá)90%以上。患者感染EBV后多數(shù)表現(xiàn)為IM,是小兒較多見的病毒性傳染病,發(fā)病率在近幾年有所上升。IM臨床表現(xiàn)多樣,主要癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱、咽痛、淺表淋巴結(jié)腫大。臨床上易診斷為化膿性扁桃體炎、淋巴結(jié)炎。在病毒感染時(shí),CD4+/CD8+的比值下降,然后感染B淋巴細(xì)胞,這些細(xì)胞大量進(jìn)入血液循環(huán)而造成全身性感染。可引起免疫調(diào)節(jié)功能紊亂,出現(xiàn)獲得性免疫功能低下或缺陷[3]。本研究表明,IM急性期CD4+T細(xì)胞顯著減少,與文獻(xiàn)[4]報(bào)道一致。在CD4+缺失的外周血單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)中,抗原特異性CD8+T細(xì)胞增殖減少,外源性補(bǔ)充γIL-2可使CD8+T細(xì)胞恢復(fù)擴(kuò)增,顯示CD4+T細(xì)胞對(duì)CD8+T細(xì)胞增殖起一定作用。另有研究[5]表明,CD4+T細(xì)胞在清除病毒感染B細(xì)胞過程中被損耗。但EBV抗原特異性CD4+T細(xì)胞能否有效控制EBV誘導(dǎo)淋巴組織增生尚未明確。有研究表明,T細(xì)胞免疫功能低下或缺陷,使表面帶有IgA的B淋巴細(xì)胞不能分化為SIgA的漿細(xì)胞。由于分泌性IgA減少,導(dǎo)致呼吸道黏膜抗感染的能力下降[6]。本研究證實(shí),IM患兒細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能低下或缺陷,IgA、CD4+/CD8+比值降低,調(diào)節(jié)功能紊亂,抗EB病毒的能力下降。因此,臨床上提高IM患兒細(xì)胞和體液免疫功能具有非常重要的臨床意義。
[1]Yamashita N,KimuraH,Morishima T.Virobogical aspects ofEPstein-Bbarr virus infeetions[J].ActaMed Okayama,2005,59(6):239-246.
[2]曾兵,肖燕.兒童EB病毒感染的免疫功能狀況[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2006,21(22):1550.
[3]王明圣,徐學(xué)富,吳愛麗,等.輪狀病毒腸炎患兒免疫球蛋白和細(xì)胞亞群的動(dòng)態(tài)變化及其臨床意義[J].中華微生物和免疫學(xué)雜志,1998,18(1):21-23.
[4]曾賓,肖燕,金潤(rùn)銘,等.兒童EB病毒感染的免疫功能狀況[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2006,21(22):1549-1550.
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[6]王明圣,李玉萍,蔣安民.轉(zhuǎn)移因子加丙種球蛋白治療反復(fù)呼吸感染患兒臨床及免疫學(xué)研究[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳學(xué)雜志,1996,6:99.