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Wnt信號通路與血管再狹窄關系研究進展及藥物干預前景

2013-01-22 13:50:39華軍益何煜舟
浙江醫(yī)學 2013年15期
關鍵詞:中膜膠原纖維細胞

華軍益 何煜舟

Wnt信號通路與血管再狹窄關系研究進展及藥物干預前景

華軍益 何煜舟

冠脈支架術后再狹窄(restenosis,RS)一直是限制其遠期療效的最大難題,藥物涂層支架的問世將RS率降至10%左右[1],但并沒有從根本意義上消除RS。深入研究血管損傷后RS的基因調(diào)控機制可能是最終解決這個難題的關鍵。

經(jīng)皮冠狀動脈成形術(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)后RS的發(fā)生機制目前尚不十分清楚,如何預防RS仍然是當前心血管病學研究領域所面臨的主要課題之一。目前認為RS形成過程為:球囊擴張對血管壁的直接損傷、血管壁的彈性回縮及血小板的黏附、聚集等始動因素,激發(fā)了血管壁炎癥反應,導致多種炎癥因子、細胞生長因子的釋放,促進原癌基因的異常表達和調(diào)節(jié)細胞周期的蛋白質(zhì)合成,其結果促進血栓形成、細胞增殖和基質(zhì)堆積導致RS。大多數(shù)學者認為中膜平滑肌細胞(smooth muscle cell,SMC)增生、遷移并分泌大量細胞外基質(zhì)形成增厚的新生內(nèi)膜是造成RS的直接原因[1-3]。在這個過程中,SMC通過自分泌、內(nèi)皮和外膜及血液成分通過旁分泌等形式共同參與了SMC的增殖、遷移和轉(zhuǎn)型。實驗研究中,利用抑制SMC增殖的某些藥物可減輕血管成形術后RS的程度。需要指出的是:血管平滑肌細胞(vascular SMC,VSMC)和成纖維細胞的增殖和分泌細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix, ECM)是造成血管內(nèi)膜增厚的最重要原因,另外還包括了內(nèi)皮細胞、血小板和血細胞,成纖維細胞等多種細胞復雜的共同作用促成了血管RS。

Wnt是一組分泌型糖蛋白家族,哺乳動物有19個Wnt蛋白、10個Fzd受體、2個Lrp輔助受體。Wnt信號通路是一條在生物進化過程中極為保守的通路,在正常生長發(fā)育中起關鍵作用。Wnt作用機制有兩種:經(jīng)典通路和非經(jīng)典通路。近年有研究[4]認為每個Wnt蛋白既可激活經(jīng)典通路也可激活非經(jīng)典通路,取決于細胞表面的Wnt-Fzd結合物的特異性。經(jīng)典Wnt通路即Wnt/βcatenin信號通路,常見且研究較為透徹。在沒有Wnt信號刺激的情況下,結直腸腺瘤性息肉(adenomatous polyposis coli,APC)基因產(chǎn)物、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、軸蛋白和轉(zhuǎn)導蛋白(anxin or conductin)構成降解復合體將β連環(huán)蛋白磷酸化,進而與泛素蛋白(ubiquition,Ub)結合被泛素化降解,胞質(zhì)內(nèi)β-catenin維持低水平從而維持細胞的穩(wěn)態(tài)。當細胞分泌的Wnt蛋白與細胞跨膜受體特異受體卷曲蛋白(frizzle,Frz)及輔助受體低密度脂蛋白受體相關蛋白5/6(LRP5/6)結合后,活化細胞內(nèi)DVL-1蛋白,抑制胞質(zhì)內(nèi)β-catenin與Axin-APC-GSK-3β等形成降解復合物,導致β-catenin在細胞質(zhì)內(nèi)積累并轉(zhuǎn)移至核內(nèi),與核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子T細胞因子(TCF)/淋巴樣增強因子(LEF)相結合,啟動靶基因c-myc、cyclin D1等轉(zhuǎn)錄,從而調(diào)控細胞生長。已經(jīng)有很多研究表明Wnt信號通路參與了某些實體腫瘤和血液系統(tǒng)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。近年來有研究提示W(wǎng)nt信號通路參與調(diào)節(jié)VSMC的發(fā)育以及損傷后的增殖;也有研究[5]發(fā)現(xiàn)大鼠頸動脈受損后Wnt通路的某些信號分子高表達,這些提示W(wǎng)nt信號通路可能在球囊損傷后血管RS中起作用,尤其可能參與調(diào)控了中膜SMC增殖、遷移和內(nèi)膜新生過程;Wnt信號通路有可能成為抗血管RS新治療的靶點。

1 Wnt信號通路和血管內(nèi)皮在RS中的作用

內(nèi)皮細胞是一層連續(xù)覆蓋于整個血管腔表面的扁平細胞,是血管基底膜的重要組成部分,是血液與血管壁和組織之間的物理屏障,能夠合成和分泌NO、PDGF、ET-1、FGF等多種活性因子。內(nèi)皮損傷是引起RS的始動因素,內(nèi)皮細胞受損后NO和PGI的分泌減少,炎癥細胞浸潤,抗血小板聚集和抗增殖作用減弱,VSMC在內(nèi)皮缺失的部位移行和過度增殖[6]。球囊損傷后內(nèi)皮功能障礙與血管重塑關系密切。

在內(nèi)皮細胞培養(yǎng)中,Wnt1和Wnt3a可以刺激內(nèi)皮細胞的增殖,同時誘導了下游β-catenin/LEF/TCF的表達增多[7-8]。在體實驗也觀察到心肌梗死后梗死區(qū)的血管發(fā)生中,β-catenin的定位從內(nèi)皮細胞的胞膜轉(zhuǎn)移到胞質(zhì)中同時伴DVL-1表達增加[9],表明Wnt-frizzled信號通路參與了血管內(nèi)皮細胞的增殖調(diào)控。在血管損傷后愈合過程中,內(nèi)皮細胞的Wnt信號通路被激活,一方面可能通過自分泌方式促進損傷血管內(nèi)皮化,對創(chuàng)傷起到積極的修復作用。另一方面,也可能通過旁分泌方式(分泌Wnt蛋白)作用于中膜SMC,影響其增殖、移行。

2 Wnt信號通路和VSMC在血管重構中作用

血管中膜SMC增殖、遷移并分泌大量細胞外基質(zhì)是動脈粥樣硬化和損傷后RS形成的核心病理過程,最終使新生內(nèi)膜形成、血管壁增厚。相對于主動脈來說,冠狀動脈和頸動脈屬于中動脈,中動脈的中膜主要由SMC組成,推測這可能是PTCA術后冠狀動脈和頸動脈容易發(fā)生RS的解剖特點。深入研究VSMC增殖、移行的調(diào)控機制是最終解決RS難題的必經(jīng)之路。

在血管RS過程中,SMC通過自分泌、內(nèi)皮和外膜及血液成分通過旁分泌等形式共同參與了SMC的增生遷移和轉(zhuǎn)型。因此,RS過程是多種細胞和血液成分通過眾多細胞因子、炎癥因子以及信號通路間復雜的交互網(wǎng)絡共同作用而形成。

PTCA術后血管內(nèi)膜被撕脫,內(nèi)皮下基質(zhì)和膠原暴露,內(nèi)皮細胞產(chǎn)生ET-1、VEGF、黏附因子和血管緊張素轉(zhuǎn)化酶等多種血管活性分子,中膜SMC在多種生長因子和血管活性物質(zhì)的刺激下被激活并不斷增殖[6],局部激活因子表達增強并活化金屬基質(zhì)蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs),降解成份復雜結構致密的ECM,使中膜SMC得以遷移到內(nèi)膜層[6,10]。已有文獻報道[11],血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)可以通過TGF-β/ Smad信號途徑促進SMC的增殖和膠原合成。在粥樣硬化斑塊和血管RS的部位,TGF-β和Smad基因表達及活性明顯增高并延續(xù)至ECM形成的全過程[12-13]。

筆者在離體和在體兩個水平證實了Wnt信號通路參與調(diào)控了VSMC增殖和膠原合成。用AngⅡ刺激VSMC增殖,檢測到Wnt4/DVL-1/β-catenin高表達,以SiRNA技術阻斷Wnt通路可以抑制AngⅡ?qū)SMC的促增殖作用。與Tsaousi等[14]最新研究結果相一致;同時在球囊損傷的大鼠頸動脈檢測到Wnt4/DVL-1/βcatenin信號分子表達增加,而Wang等[5]研究顯示大鼠頸動脈受損傷后β-catenin/TCF信號激活,兩個結果結合起來,說明Wnt經(jīng)典通路參與血管RS病理過程調(diào)控。Chen等[15]研究指出DVL-1可能對心肌梗死后成纖維細胞和血管內(nèi)皮細胞增殖、移行有影響,對心肌梗死損傷后修復起重要作用。筆者在離體細胞和在體動物實驗中也發(fā)現(xiàn)增殖狀態(tài)下的VSMC和血管損傷后重構的內(nèi)中外膜均存在dvl-1 mRNA和蛋白水平高表達,推測DVL-1可能對血管損傷后重構過程中包括SMC、成纖維細胞在內(nèi)的多種細胞激活、增殖和分泌ECM都有作用。

3 Wnt信號通路在血管重構中ECM形成和降解中的作用

AngⅡ可以通過TGF-β/Smad信號途徑促進SMC的增殖和膠原合成[12-13]。Rodrigues等[16]認為AngⅡ可以不依賴TGF-β直接激活VSMC的Smad通路,促進血管內(nèi)膜膠原合成。筆者的研究發(fā)現(xiàn)AngⅡ可以通過Wnt經(jīng)典信號途徑促進SMC的增殖和膠原合成,Wnt信號通路和TGF-β/Smad信號途徑有何交互聯(lián)系,AngⅡ可以直接激活以上兩個信號通路還是先激活其中一個信號途徑,進一步通過信號途徑間的交互聯(lián)系使另外一個途徑激活,值得進一步研究。

Wu等[17]離體研究發(fā)現(xiàn)Wnt/β-catenin/TCF/LEF通路可以直接作用MMPs的啟動子,使MMP表達增加降解ECM,便于T細胞通過基底膜移行,首次揭示了Wnt通路對MMP家族有直接作用。這個結果使筆者聯(lián)想到在血管損傷RS過程中Wnt信號激活,使MMPs表達增加,可能有助于中膜VSMC通過被降解的ECM移行至內(nèi)膜。筆者的實驗表明,Wnt信號通路的激活在AngⅡ刺激VSMC合成膠原過程中起作用。這與Wu的研究看似矛盾,其實不然,Wnt經(jīng)典通路的激活一方面促進中膜SMC周圍的ECM降解利于其移行,另一方面促進已經(jīng)移行至內(nèi)膜的SMC增殖和合成膠原。這是否意味著Wnt經(jīng)典通路對血管重構過程中ECM的降解、合成具有雙向調(diào)控作用?如果這種雙向調(diào)控作用確實存在,就可以解釋為什么動脈RS僅僅是內(nèi)膜增厚而中膜變化不明顯,即Wnt信號在中膜主要與ECM降解和SMC移行有關,當VSMC移行至內(nèi)膜后,Wnt信號主要參與了其大量增殖和分泌ECM,ECM在內(nèi)膜的合成遠大于降解導致內(nèi)膜增厚。

Wnt信號通路可以調(diào)控成纖維細胞增殖以及心臟重構過程中內(nèi)皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化[18-19],Chen等[15]研究指出DVL-1可能對心肌梗死后成纖維細胞增殖、移行有影響,對梗死后心臟重構起重要作用。筆者在離體細胞和動物在體實驗中也發(fā)現(xiàn)增殖狀態(tài)下的VSMC和血管損傷后重構的內(nèi)中外膜均存在dvl-1 mRNA和蛋白水平高表達,推測DVL-1可能對血管損傷后重構過程中成纖維細胞增殖、分泌ECM有作用。血管外膜以大量成纖維細胞為主,當血管受損傷時,成纖維細胞具有修復外膜的能力。目前認為外膜成纖維細胞涉及血管損傷后RS過程,事實上對血管損傷反應活躍的這種非肌性細胞僅少量存在于中膜,絕大部分分布在外膜,且具有增殖、遷移、黏附、表達n-SM actin及合成細胞外基質(zhì)蛋白的能力。也就是說,在某些刺激因子作用下,成纖維細胞的表型可以轉(zhuǎn)變?yōu)榧〕衫w維細胞,表達α-肌動蛋白,并從外膜遷移至內(nèi)膜。當血管外膜受損,即便血管內(nèi)皮正常,同樣會出現(xiàn)動脈粥樣硬化病變,均提示血管壁外膜參與了血管RS過程[20]。深入研究Wnt信號通路對外膜成纖維細胞的調(diào)控作用對揭示血管RS機制和尋求有效干預措施非常重要。

4 藥物預防血管RS

血管重構一旦形成,目前還沒有使其逆轉(zhuǎn)的有效方法,所以血管RS仍是以預防為主。目前研究已發(fā)現(xiàn)某些西藥和中藥對預防RS可能有效。

4.1 他汀類 目前認為是最有效的預防PCI術后血管RS的藥物之一。他汀預防血管RS與其調(diào)脂外作用關系密切。包括抗炎、抗氧化應激、抗增殖、保護內(nèi)皮、抑制泡沫細胞形成等。但其預防血管RS的分子機制尚未完全研究透徹。阿托伐他汀可以通過抑制AngⅡ誘導的人腸系膜動脈VSMC NADPH氧化酶-活性氧通路,從而抑制SMC的增殖[21]。Chan等[22]研究指出辛伐他汀可以通過抑制細胞周期依賴的激酶抑制劑(CDKI)和p53途徑,抑制對葡萄糖刺激的主動脈SMC的增殖。也有研究指出,阿托伐他汀抑制高血壓誘導的血管重構與其抗氧化特性直接相關[23]。筆者在實驗中發(fā)現(xiàn)阿托伐他汀可以通過下調(diào)Wnt經(jīng)典通路抑制VSMC的增殖和ECM合成,但很可能不是唯一途徑。

4.2 細胞有絲分裂抑制劑 如雷帕霉素、紫杉醇等,已經(jīng)被廣泛應用于藥物洗脫支架并大大降低了PCI術后RS率。這類藥物可以在支架局部抑制SMC增殖從而減輕內(nèi)膜反應性增厚,但這類藥物同樣也抑制了血管損傷處內(nèi)皮的生長導致支架內(nèi)皮化延遲,有增加支架內(nèi)血栓形成的風險。

4.3 中藥 中藥預防PTCA術后RS的研究雖起步較晚,但實驗研究表明其可作用于RS的多個病理環(huán)節(jié),臨床觀察亦證明有一定效果,值得深入研究和開發(fā)。許多具有活血化瘀功效的中藥如川芎嗪、丹參、三七總皂甙等被證實有抑制VSMC增殖的作用[24-25]。川芎嗪可以下調(diào)RS部位VSMC的成纖維細胞生長因子mRNA、原癌基因c-myc mRNA表達,上調(diào)抑癌基因p53 mRNA、內(nèi)皮衍化舒張因子mRNA表達,說明川芎嗪抑制內(nèi)膜增殖可能與調(diào)節(jié)VSMC增殖相關基因表達有關系[26]。也有研究顯示川芎嗪、葛根素等可以抑制VSMC合成膠原[27-28]。某些具有抗炎作用的中藥,如大黃素、穿心蓮成分API0134等對RS的預防亦顯示出一定的作用[29-30]。發(fā)現(xiàn)大黃素可抑制正常動脈、硬化動脈及球囊損傷動脈壁的SMC增殖,主要機制為抑制細胞由G0期向S期轉(zhuǎn)化。筆者研究顯示大黃素對正常生長的VSMC抑制作用不明顯,對增殖狀態(tài)的VSMC有明顯抑制作用,其機制與下調(diào)Wnt信號有關,其抗炎作用和下調(diào)Wnt通路之間可能存在的關聯(lián)尚不清楚。某些具有抗血小板、抗凝作用的中藥如水蛭素、去纖酶也被證實能夠抑制內(nèi)膜增殖[31]。

[1]Costa MA,SimonDL.MolecularBasisof Restenosisand Drug-E-luting Stents[J].Circulation,2005,111(17):2257-2273.

[2]PatelS D,WalthamM,Wadoodi A,et al.The role of endothelial cells and their progenitors in intimal hyperplasia[J].Ther Adv Cardiovasc Dis,2010,4(2):129-141.

[3]Dzau V J,Braun-Dullaeus R C,Sedding D G.Vascular proliferation and atherosclerosis:new perspective and therapeutic strategies [J].Nat Med,2002,8(11):1249-1256.

[4]Katoh M,Katoh M.WNT signaling pathway and stem cell signaling network[J].Clin Cancer Res,2007,13(14):4042-4045.

[5] Wang X,Xiao Y,Mou Y,et al.A role for the beta-catenin/T-cell factor signaling cascade in vascular remodeling[J].Circ Res, 2002,90(3):340-347.

[6] Godin D,Ivan E,Johnson C,et al.Remodeling of Carotid artery Is Associated with Increased Expression of Matrix MetalloProteinases in Mouse Blood Flow Cessation Model[J].Circulation,2000,102 (23):2861-2866.

[7]陳麗君,左伋,劉曉宇,等.Wnt信號通路對血管內(nèi)皮細胞血管生成能力的調(diào)控[J].中國循環(huán)研究雜志,2006,(1):23-26.

[8] Gherghe C M,Duan J,Gong J,et al.Wnt1 is a proangiogenic molecule,enhances human endothelial progenitor function,and increases blood flow to ischemic limbs in a HGF-dependent manner[J].FASEB J,2011,25(6):1836-1843.

[9] Blankesteijn W M,van Gijn M E,Essers-Janssen Y P,et al.Beta catenin,an inducer of uncontrolled cell proliferation and migration in maligancies,is localized in the cytoplasm of vascular endothelium during neovascularization after myocardial infarction[J].Am J Pathol,2000,157(3):877-883.

[10]Galis Z S,Johnson C,Godin D,et al.Targeted disruption of the matrix metalloproteinase-9 gene impairs smooth muscle cell migration and geometrical arterial remodeling[J].Circ Res,2002,91 (9):852-859.

[11]Kuma S,Oki E,Onohara T,et al.Angiotensin II-induced growth of vascular smooth muscle cells is associated with modulation of cell surface area and platelet-derived growth factor receptor expression[J].Clin Exp Pharmacol Physiol,2007,34(3):153-160.

[12]Ruiz-Ortega M,Rodriguez-Vita J,Sanchez-Lopez E,et al.TGF-beta signaling in vascular fibrosis[J].Cardiovasc Res, 2007,74(2):196-206.

[13]Kalinina N,Agrotis A,Amropova Y,et al.Smad expression in human atherosclerotic lesions:evidence for impaired TGF-beta/Smad signaling in smooth muscle cells of fibrofatty lesions[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2004,24(8):1391-1396.

[14]Tsaousi A,Williams H,Lyon C A,et al.Wnt4/β-Catenin Signaling Induces VSMC Proliferation and Is Associated With Intimal Thickening[J].Circ Res,2011,108(4):427-436.

[15]Chen L,Wu Q,Guo F,et al.Expression of dishevelled-1 in wound healing after acute myocardial infarction:possible involvement in myofibroblast proliferation and migration[J].J Cell Mol Med, 2004,8(2):257-264.

[16]Rodrigues Díez R,Lavoz C,Rayego-Mateos S,et al.Statins inhibit angiotensin II/Smad pathway and related vascular fibrosis, by a TGF-β-independent process[J].PLoS One,2010,5(11): e14145.

[17]Wu B,Crampton S P,Hughes C C.Wnt signaling induces MMP expression and regulates T cell transmigration[J].Immunity, 2007,26(2):227-239.

[18]Aisagbonhi O,Rai M,Ryzhov S,et al.Experimental myocardial infarction triggers canonicalWntsignaling and endothelial-to-mesenchymal transition[J].Dis Model Mech,2011,4(4): 469-483.

[19]陳麗君,左伋,吳青鋒,等.Wnt信號通路對成纖維細胞Rat-1生長及表型的調(diào)控[J].生理學報,2005,57(4):505-510.

[20]Tsutsui M,Onoue H,Iida Y,et al.Adventitia-dependent relaxations of canine basilar arteries transduced with recombinant eNOS gene[J].Am JPhysiol,1999,276(6 Pt 2):H1846-1852.

[21]羅廷福,李家富,何濤,等.阿托伐他汀對血管緊張素Ⅱ誘導的人腸系膜動脈平滑肌細胞增殖和細胞內(nèi)NADPH氧化酶一活性氧通路的影響[J].中國心血管雜志,2010,15(3):233-235.

[22]Chan K C,Wang C J,Ho H H,et al.Simvastatin inhibits cell cycle progression in glucose-stimulated proliferation of aortic vascular smooth muscle cells by up-regulating cyclin dependent kinase inhibitorsand p53[J].PharmacolRes,2008,58(3-4):247-256.

[23]Briones A M,Rodríguez-Criado N,Hernanz R,et al.Atorvastatin Prevents Angiotensin II-Induced Vascular Remodeling and Oxidative Stress[J].Hypertension,2009,54(1):142-149.

[24]周小明,陸再英,汪道文.丹參防治實驗性動脈再狹窄及其機制的初步研究[J].中國中西醫(yī)結合雜志,1996,16(8):480-482.

[25]夏豪,李庚山,許家莉,等.三七總皂甙對兔頸動脈內(nèi)皮剝脫術后c-myc基因表達及血管平滑肌增殖的影響[J].中國介入心臟病學雜志,1997, 5(1):45-47.

[26]史載樣,杜金行.血瘀證綜合研究國際會議暨第四屆全國活血化瘀研究學術會議紀要[J].中國中西醫(yī)結合雜志,1995,15(12):755-757.

[27]唐利龍,汪麗惠,張均華,等.川芎嗪對原代培養(yǎng)血管平滑肌細胞膠原基因表達的影響[J].中國中西醫(yī)結合雜志,1995,15(11):666-668.

[28]嚴儀昭,陳祥銀,吳康健,等.川芎嗪和764-3對成纖維細胞Ⅰ、Ⅲ型前膠原mRNA表達的影響[J].中國醫(yī)學科學院學報,1996,18(2):126-128.

[29]熊一力,趙華月.穿心蓮成分API0134對豬主動脈平滑肌細胞增殖的抑制作用[J].中華心血管病雜志,1995,23(3):214-216.

[30]郭丹杰.大黃素對血管平滑肌細胞增殖影響的實驗研究[J].中華內(nèi)科雜志,1996,35(3):157-159.

[31]周小明.水蛭素對培養(yǎng)的兔動脈平滑肌增殖的抑制作用[J].中國循環(huán)雜志,1996,11(2):103-105.

2013-02-27)

(本文編輯:馬雯娜)

浙江省衛(wèi)生廳科研基金(2010KYA155);浙江省中醫(yī)藥科學研究基金(2011ZA027)

310006 杭州,浙江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院心血管科

華軍益,E-mail:huajunyi1973@163.com

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