帕提古麗·托乎提
(新疆巴州動(dòng)物疾病控制與診斷中心,新疆庫(kù)爾勒 841000)
瘦肉精既不是獸藥,也不是飼料添加劑,而是腎上腺類(lèi)神經(jīng)興奮劑,是一種平喘藥。由于本品化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,加熱到172℃時(shí)才能分解,因此一般的加熱方法不能將其破壞。這種藥物胃腸道吸收快,人或動(dòng)物服后15~20分鐘即起作用,作為獸藥或禽畜飼料添加劑,則屬于違禁品。
美國(guó)一家公司意外發(fā)現(xiàn),飼料中添加適量鹽酸克倫特羅后,可使豬的瘦肉率提高10%以上。生豬使用瘦肉精后皮毛光亮,呼吸急促,個(gè)別會(huì)出現(xiàn)腿抽搐,站不穩(wěn),爬坡困難;宰后豬的肌肉特別鮮紅,后臀肌肉飽滿,肥肉特別薄。受經(jīng)濟(jì)利益驅(qū)使,在我國(guó)部分地區(qū)的飼料加工企業(yè)和養(yǎng)豬專(zhuān)業(yè)戶(hù)中,這種飼料添加劑已經(jīng)成為其獲利的“秘密武器”。鹽酸克倫特羅添加到飼料中,增加瘦肉率,但作為飼料添加劑,使用劑量是人用藥劑量的10倍以上,才能達(dá)到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的時(shí)間長(zhǎng)、代謝慢,所以在屠宰前到上市,在豬體內(nèi)的殘留量都很大 。通過(guò)食物進(jìn)入人體,使人體漸漸地中毒,積蓄中毒。如果一次攝入量過(guò)大,就會(huì)產(chǎn)生異常生理反應(yīng)的中毒現(xiàn)象,主要危害肝臟和腎臟,心肌收縮加強(qiáng),心率加快;血壓升高,頭疼頭暈;嘔吐和腹瀉;反復(fù)使用會(huì)產(chǎn)生耐受性。
克倫特羅(尿液)膠體金法檢測(cè)卡是一種不需要任何儀器設(shè)備的尿液檢測(cè)法,應(yīng)用單可隆抗體技術(shù)從而特異性地定性檢測(cè)尿液中的克倫特羅。膠體金法特點(diǎn)是快速簡(jiǎn)便,全部檢測(cè)過(guò)程僅需要5-20分鐘,操作也極其簡(jiǎn)單,可隨時(shí)隨地進(jìn)行,穩(wěn)定性好。
測(cè)定原理是:運(yùn)用抗原抗體的特異反應(yīng)以及側(cè)向?qū)游龊湍z體金技術(shù)進(jìn)行尿液中克倫特羅分子的快速定性檢測(cè)。用BSA(牛血清蛋白)偶聯(lián)的克倫特羅分子與膠體金顆粒結(jié)合后,包被在醋酸纖維素膜上。在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA,通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性。
當(dāng)尿液樣本加到加樣孔后,樣本中的克倫特羅分子與克倫特羅-BSA-膠體金偶聯(lián)物一起層析泳動(dòng)到檢測(cè)區(qū)競(jìng)爭(zhēng)與克倫特羅抗體結(jié)合,剩余的克倫特羅-BSA-膠體金繼續(xù)泳動(dòng)到質(zhì)控區(qū)與抗體結(jié)合。因此,當(dāng)尿樣樣本中的克倫特羅濃度超過(guò)一定量后,膠體金偶聯(lián)物就不能與克倫特羅抗體結(jié)合,此時(shí)檢測(cè)區(qū)不出現(xiàn)紫紅色線條;當(dāng)樣本中克倫特羅濃度低于一定值或樣本中沒(méi)有克倫特羅時(shí),膠體金偶聯(lián)物就與克倫特羅抗體結(jié)合,從而在檢測(cè)區(qū)顯示出一條紫紅色線條;而無(wú)論樣本中是否含有克倫特羅分子,質(zhì)控區(qū)都會(huì)出現(xiàn)紫紅色線條,以示檢測(cè)有效。
克倫特羅膠體金法檢測(cè)卡,一次性塑料吸管,塑料一次性手套。
計(jì)時(shí)器,一次性潔凈塑料尿杯或玻璃容器。
豬尿、牛尿、羊尿。
尿液標(biāo)本收集在潔凈、干燥不含有任何防腐劑的塑料尿杯或玻璃容器內(nèi)。若不能及時(shí)送檢,尿樣標(biāo)本在2-8℃冷藏可保存48h。長(zhǎng)期保存需冷凍于-20℃,不能反復(fù)凍融。
2.6.1 檢測(cè)前準(zhǔn)備 從原包裝鋁箔袋中取出檢測(cè)卡,在進(jìn)行測(cè)試前必須完整閱讀使用說(shuō)明書(shū)。檢測(cè)卡和尿樣標(biāo)本恢復(fù)至室溫。
2.6.2 檢測(cè)步驟 將試劑盒置于干凈平坦的臺(tái)面上,用塑料吸管垂直滴加2滴無(wú)空氣泡的尿樣于加樣孔(S)內(nèi)。等待紫紅色條帶的出現(xiàn),測(cè)試結(jié)果應(yīng)在5min時(shí)讀取。陽(yáng)性(+):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色條帶,在測(cè)試區(qū)(T)內(nèi)無(wú)紫紅色條帶出現(xiàn)。陽(yáng)性結(jié)果表明:克倫特羅含量在閾值(3ng∕mL)以上。陰性(-):兩條紫紅色條帶出現(xiàn)。一條位于測(cè)試區(qū)(T)內(nèi),另一條位于質(zhì)控區(qū)(C)內(nèi)。陰性結(jié)果表明:克倫特羅含量在閾值(3ng∕mL)以下。無(wú)效:質(zhì)控區(qū)(C)未出現(xiàn)紫紅色條帶,表明不正確的操作過(guò)程或檢測(cè)卡已變質(zhì)損害。
我們對(duì)巴州轄區(qū)內(nèi)規(guī)?;涝讏?chǎng)共抽520份豬、牛、羊尿樣,對(duì)鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇采用膠體金法進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果全部為陰性。
4.1 對(duì)巴州轄區(qū)內(nèi)規(guī)?;涝讏?chǎng)的豬、牛、羊尿樣共520份進(jìn)行的“瘦肉精”代表性的抽樣檢測(cè),520份樣品結(jié)果全部為陰性。說(shuō)明這次巴州轄區(qū)內(nèi)被檢測(cè)的規(guī)?;涝讏?chǎng)生產(chǎn)的豬、牛、羊肉未檢測(cè)出“瘦肉精”。
4.2 采用克倫特羅免疫膠體金快速檢測(cè)卡檢測(cè)動(dòng)物尿樣中的“瘦肉精”,費(fèi)用低、方便、穩(wěn)定性好、靈敏度高,適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè);缺點(diǎn)是只適合定性和半定量。
[1]石福霞.甘肅省靖遠(yuǎn)縣生豬定點(diǎn)屠宰場(chǎng) “瘦肉精”檢驗(yàn)報(bào)告[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫,2013,30(4):50-51.
[2]楊更善.我縣養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中三種“瘦肉精”的監(jiān)測(cè)調(diào)查[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫, 2012,29(12):41-42.