殷 欣，孫軼華

(哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江哈爾濱150081)

鈣離子(Ca2+)是細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中重要的第二信使，在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息并調(diào)控一系列生命過(guò)程。當(dāng)細(xì)胞受到相應(yīng)刺激時(shí)，細(xì)胞會(huì)通過(guò)各種途徑升高細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，胞漿內(nèi)Ca2+濃度的升高主要來(lái)源于2個(gè)方面:外鈣內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi)鈣庫(kù)釋放。外鈣內(nèi)流的途徑主要分成3大類:電壓門控的鈣通道(voltage depentent calcium chnnel，VOC)、受體門控的鈣通道(receptor operated calcium chnnel，ROC)和庫(kù)操縱性鈣通道(storeoperated calcium channels，SOC)。VOC 和 ROC 的特性是在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的鈣內(nèi)流，SOC則產(chǎn)生較小的、持續(xù)的鈣內(nèi)流。細(xì)胞膜上持續(xù)的鈣內(nèi)流保證了信號(hào)的正常傳播。目前認(rèn)為，瞬時(shí)受體電位C(TRPC)通道家族成員是構(gòu)成細(xì)胞膜上SOC和ROC的分子基礎(chǔ)。

一、TRP通道

瞬時(shí)受體電位通道(TRP)基因首次發(fā)現(xiàn)于黑腹果蠅的視覺(jué)傳導(dǎo)系統(tǒng)中，突變體果蠅對(duì)持續(xù)的光刺激只產(chǎn)生瞬時(shí)而非持續(xù)的鋒電位，因而得名。迄今已在果蠅、蠕蟲以及哺乳動(dòng)物等生物體先后發(fā)現(xiàn)了多種TRP通道。依據(jù)氨基酸序列的同源性，將TRP通道分為7個(gè)亞族［1］，分別為 TRPC、TRPV、TRPM、TRPA、TRPP、TRPML、TRPN。TRP通道與電壓依賴性陽(yáng)離子通道類似，具有6次跨膜(S1-S6)結(jié)構(gòu)域，以及位于胞內(nèi)的N末端和C末端。TRP通道的S5與S6之間的片段內(nèi)嵌構(gòu)成離子通過(guò)孔道，因S4片段缺乏通常電壓依賴性陽(yáng)離子通道S4片段所具有的正電荷氨基酸殘基，所以TRP通道屬于非電壓依賴性的離子通道，主要通過(guò)的離子為Ca2+與鈉離子(Na+)，幾乎所有的功能性TRP通道都對(duì)Ca2+具有通透性。

TRP作為細(xì)胞重要的感受器，傳遞細(xì)胞內(nèi)、外的信息，對(duì)來(lái)自細(xì)胞內(nèi)、外環(huán)境的物理和化學(xué)等多種刺激信號(hào)產(chǎn)生反應(yīng)，以維持細(xì)胞的生存和參與細(xì)胞的眾多基本生理活動(dòng)，同時(shí)也受來(lái)自細(xì)胞內(nèi)、外的信使分子、化合物以及溫度、滲透壓等變化的調(diào)節(jié)。TRP參與的功能主要包括溫度和疼痛感覺(jué)(TRPVI、TRPV2、TRPV3、TRPV4、TRPM8 和TRPAI亞家族)、機(jī)械感覺(jué)(TRPV2、TRPV4、TRPM3、TRPA1、TRPP1、TRPP2、TRPML3 和 TRPC1 亞家族)、味覺(jué)(TRPM5、TRPP2亞家族)、維持細(xì)胞離子穩(wěn)態(tài)(TRPV5、TRPV6、TRPM6和 TRPM7亞家族)、參與細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)控(TRPM亞家族)以及介導(dǎo)磷脂酶C(PLC)依賴的鈣內(nèi)流(TRPC亞家族)。

二、TRPC通道

1.TRPC通道的結(jié)構(gòu)和分型 TRPC即傳統(tǒng)型TRP通道，該亞家族與果蠅的TRP通道同源性最高，故得名。TRPC是瞬時(shí)受體電位通道家族中最早發(fā)現(xiàn)的成員，具有TRP通道普遍的結(jié)構(gòu)特征，屬于非電壓依賴性的離子通道。TRPC亞家族包括TRPC1～7共7個(gè)亞型，其中TRPC2在人類是偽基因，只表達(dá)于大鼠和小鼠。根據(jù)氨基酸序列同源性及功能相似性，TRPC通道分為4類:TRPC1、TRPC2、TRPC3/6/7和 TRPC4/5。大量研究結(jié)果提示，功能性TRPC通道是由相同或不同亞型組成的四聚體組成。TRPC四聚體孔道區(qū)具有高度保守性，該區(qū)域的定向誘變可導(dǎo)致通道活性喪失［2］。

2.TRPC通道的分布和功能 TRPC亞家族不同成員分布不同，通道激活后發(fā)揮的功能亦不同。TRPC1分布很廣，在腦、心臟、腎臟、肺、骨骼肌、前列腺、皮膚、睪丸和卵巢都存在高水平表達(dá)。作為最早被發(fā)現(xiàn)的哺乳動(dòng)物TRP通道，TRPC1主要的功能為參與受體介導(dǎo)的、鈣依賴的分泌和收縮過(guò)程;TRPC2在人類是偽基因，在小鼠可能作為信息素感受體以及參與精子頂體反應(yīng);TRPC3主要分布于腦、胎盤、心臟、骨骼肌和平滑肌，參與腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(BDNF)介導(dǎo)的神經(jīng)分化、血管收縮和抗原刺激引起的淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)。曾有報(bào)道［3］TRPC3和另一種重要的鈣調(diào)節(jié)器，鈉鈣交換體(NCX)偶聯(lián)，Na+通過(guò)TRPC3通道進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，激活NCX的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，從而使細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加;TRPC4主要分布于腦、睪丸、胎盤、腎上腺和內(nèi)皮細(xì)胞，參與血管收縮、微血管滲透以及外側(cè)膝狀體γ-氨基丁酸(GABA)能神經(jīng)的輸入。TRPC4基因被敲除的小鼠呈現(xiàn)出主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的鈣內(nèi)流消失，一氧化氮(NO)合成受損，以及血管舒張功能減退。在肺血管內(nèi)皮細(xì)胞中，表現(xiàn)為鈣內(nèi)流減弱，微血管通透性降低。TRPC5主要分布于腦、肺、睪丸和胎盤，可能與生長(zhǎng)錐的形成和腦的發(fā)育有關(guān)。TRPC6分布于肺、心臟、腦和肌肉，可能參與血管收縮和血小板聚集。TRPC7主要分布于心臟、肺、眼、腦、脾臟和睪丸，現(xiàn)在對(duì)其參與的功能還尚未明確。

3.TRPC通道激活機(jī)制 TRPC通道的激活受多種因素的調(diào)節(jié)，包括滲透壓、pH值、機(jī)械力及一些內(nèi)、外源性配體和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子。盡管目前TRPC通道的激活機(jī)制還存在某些爭(zhēng)議，但能被磷脂酶C(PLC)偶聯(lián)的膜受體激活已被證實(shí)。TRPC通道主要激活機(jī)制可歸納為以下:內(nèi)、外源性配體和細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子分別作用于G蛋白偶聯(lián)受體和受體酪氨酸激酶偶聯(lián)受體，激活PLC β和γ，PLC激活后水解4，5二磷酸磷脂肌醇(PIP2)，生成肌醇三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)，細(xì)胞內(nèi)IP3水平的升高使IP3敏感的鈣庫(kù)釋放Ca2+。當(dāng)鈣庫(kù)耗竭，促使細(xì)胞膜 TRPC通道激活，繼而引發(fā)Ca2+流入細(xì)胞內(nèi)填充鈣庫(kù)。此外，保留在細(xì)胞膜上的DAG也可直接激活TRPC通道。根據(jù)激活機(jī)制的不同，TRPC通道大致可分為兩類:(1)TRPC 1/4/5:具有SOC特性，在細(xì)胞內(nèi)鈣池耗竭時(shí)被激活;(2)TRPC 3/6/7:表現(xiàn)出受體操縱性鈣通道特性，可由DAG及其代謝產(chǎn)物直接激活。另外，TRPC 3/6具有庫(kù)操縱性鈣通道和受體操縱性鈣通道雙重特性，在不同條件下表現(xiàn)出不同的特性［4］。

4.TRPC通道與鈣庫(kù)操縱性鈣通道 1986年，Putney［5］首先描述了一種依賴鈣庫(kù)耗竭激活Ca2+內(nèi)流的現(xiàn)象:當(dāng)細(xì)胞外刺激物活化細(xì)胞膜G蛋白耦聯(lián)受體或酪氨酸激酶受體后，細(xì)胞內(nèi)PLC信號(hào)途徑被激活導(dǎo)致鈣庫(kù)釋放Ca2+，鈣庫(kù)耗竭;此時(shí)細(xì)胞膜上的鈣通道被激活并產(chǎn)生持續(xù)性Ca2+內(nèi)流，并將其稱為庫(kù)容性鈣內(nèi)流(capacitative calcium entry，CCE)，被激活的細(xì)胞膜鈣通道則被稱為SOC。這種Ca2+內(nèi)流方式被稱為庫(kù)操縱性鈣內(nèi)流(store-operated calcium entry，SOCE)。由上述受體蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑所致的細(xì)胞內(nèi)Ca2+呈雙相性升高，先是快速短暫升高，這是Ca2+從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中釋放所致;在達(dá)到峰值后又逐漸下降，并持續(xù)維持在較高的水平，形成平臺(tái)期，這是由SOCE所致。幾乎所有的TRPC亞型通道都可通過(guò)PLC信號(hào)途徑被激活。因此，可以認(rèn)為TRPC通道此時(shí)起著SOC的作用。

5.TRPC通道參與細(xì)胞Ca2+的調(diào)節(jié) 相關(guān)研究表明［6］，TRPC1和 TRPC4參與或部分參與SOCE的形成。基因敲除模型的研究為 TRPC1參與SOCE提供了依據(jù)［7］。在 TRPC1/4陽(yáng)性細(xì)胞系中，PLC介導(dǎo)或通過(guò)藥物(如毒胡蘿卜素)作用后引起細(xì)胞內(nèi)鈣池中Ca2+外流，Ca2+損耗后可以增加SOCE;但通過(guò)SiRNA或藥物阻斷劑沉默、阻斷 TRPC1/4后，SOCE的形成明顯減少。另有研究顯示［8］，基因敲除內(nèi)皮細(xì)胞的 TRPC1或 TRPC4后并不影響SOCE。來(lái)自TRPC4基因敲除小鼠模型的數(shù)據(jù)顯示:TRPC4-/-小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞及新生小鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞中，SOCE較野生小鼠明顯減少，這表明TRPC4是SOC的重要組成部分。然而，TRPC4參與 SOCE也同樣受到質(zhì)疑，有學(xué)者認(rèn)為［9］，TRPC4的激活并不依賴鈣池的損耗而產(chǎn)生 SOCE，對(duì)于TRPC1/4與SOCE的關(guān)系或許由于細(xì)胞類型的不同而存在不同的該內(nèi)流調(diào)節(jié)機(jī)制，因此，這些分歧還有待進(jìn)一步的研究。人類細(xì)胞中TRPC2是含有6個(gè)突變位點(diǎn)的假基因，而在嚙齒動(dòng)物中，關(guān)于TRPC2與SOCE的關(guān)系則有不同的觀點(diǎn)。有報(bào)道顯示非變異TRPC2在中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢及睪丸精原細(xì)胞中參與SOCE的形成［10］。TRPC3在腦組織中表達(dá)豐富，有觀點(diǎn)［11］認(rèn)為TRPC3是由受體依賴PLC活化后的信號(hào)(如 DAG)直接激活，即 ROC;Kiselyov等［12］的觀點(diǎn)則與之相反，他們認(rèn)為 TRPC3的活化開(kāi)放依賴于鈣庫(kù)操縱，即SOC。而來(lái)自Vazqucz等［13］的研究發(fā)現(xiàn)，TRPC3參與SOCE或ROCE取決于其表達(dá)水平，在低表達(dá)水平時(shí)，TRPC3具有SOC的功能;反之則具有ROC的功能。TRPC5主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá)，大多數(shù)證據(jù)表明TRPC5是由受體活化PLC-DAG傳導(dǎo)通路激活開(kāi)放，并非由鈣池調(diào)節(jié)。但是在單個(gè)細(xì)胞水平的研究［14］中，TRPC5也會(huì)以鈣池操縱性鈣內(nèi)流的方式參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，這可能與TRPC5表達(dá)水平對(duì)鈣池的敏感性有關(guān)。有研究［11］顯示，TRPC6是以受體偶聯(lián)PLC-DAG方式激活參與ROCE，并非 SOCE。但是在肺動(dòng)脈高壓的研究中，肺動(dòng)脈平滑肌(PASMCs)中TRPC6參與SOCE引起［Ca2+］增加，PASMCs收縮力增強(qiáng)。同時(shí)TRPC6引起的鈣內(nèi)流也參與細(xì)胞除極，細(xì)胞內(nèi)壓升高也會(huì)引起血管收縮作用。在肝癌細(xì)胞系(Huh-7、HepG-2)的研究［11］中發(fā)現(xiàn)肝癌細(xì)胞僅表達(dá)TRPC1和TRPC6，SOCE的增加與TRPC6呈正相關(guān)，而與TRPC1無(wú)相關(guān)性。在HEK293細(xì)胞的研究［11］發(fā)現(xiàn)，TRPC7的激活方式與蛋白表達(dá)水平相關(guān)，這一點(diǎn)與TRPC3相似。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)表明TRPC7激活方式依賴于受體偶聯(lián)PLC-DAG傳導(dǎo)通路;而當(dāng)其表達(dá)水平穩(wěn)定時(shí)則出現(xiàn)鈣庫(kù)操縱的激活方式。

6.TRPC通道與基質(zhì)交感分子蛋白1(STIM1)、鈣釋放激活鈣調(diào)節(jié)蛋白1(CRACM1，即Orai1) 在STIM1和Orai1被發(fā)現(xiàn)之前，TRPC通道被認(rèn)為是SOC的單一分子基礎(chǔ)。1992年，Hoth和Penner［15］用膜片鉗技術(shù)成功地將SOCE以電流的形式在肥大細(xì)胞(mast cell)上檢測(cè)到并將其命名為鈣釋放激活鈣離子通道(Ca2+release-activatedcd charmel，CRAC)。CRAC 是一種典型的SOC通道，其結(jié)構(gòu)和激活與Orai1、STIM1密切相關(guān)。SOC主要是由TRPC蛋白形成的同源或異源四聚體與STIM1、Orai1共同組成。STIM1是一種存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的鈣結(jié)合蛋白，可將內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子負(fù)載信息傳遞給鈣庫(kù)操縱性鈣通道，對(duì)TRPC通道具有調(diào)控作用。STIM1由685個(gè)氨基酸構(gòu)成，N端位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，含有1個(gè)EF-hand結(jié)構(gòu)和1個(gè)SAM結(jié)構(gòu)域。C端位于細(xì)胞質(zhì)中，包括卷曲螺旋區(qū)，絲氨酸、脯氨酸富集區(qū)和賴氨酸富集區(qū)。EF-hand結(jié)構(gòu)是 STIMl結(jié)合 Ca2+的部位，也是STIM1作為感受器的區(qū)域［16］，能感受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)Ca2+濃度下降;其他的結(jié)構(gòu)域，如SAM結(jié)構(gòu)域、C端的卷曲螺旋區(qū)、脯氨酸和賴氨酸富集區(qū)在STIM1顆粒的轉(zhuǎn)位及激活胞膜上的TRPC通道過(guò)程中起著重要的作用［16］。研究［17］表明，STIM1能調(diào)節(jié)除TRPC7外其余TRPC亞族的活性，從而影響SOC的功能。STIM1可直接調(diào)節(jié)TRPC1/4/5的功能，使其表現(xiàn)出SOC的作用，TRPC3/6與TRPC1/4結(jié)合組成TRPC通道異源四聚體后，可間接受STIM1調(diào)節(jié)，表現(xiàn)出SOC的功能。Orai1是一種位于細(xì)胞膜的高選擇性鈣離子通道蛋白，是構(gòu)成CRAC通道的亞基。Orai1是在采用基因連鎖分析檢測(cè)嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)患者基因突變時(shí)首次被發(fā)現(xiàn)的。Orai1包括4個(gè)跨膜片段，其N端和C端都位于細(xì)胞內(nèi)，第1個(gè)和第3個(gè)跨膜片段上存在Ca2+結(jié)合位點(diǎn)，所以具有Ca2+選擇性，其他離子很難從該通道進(jìn)入細(xì)胞。Orai1與TRPC同樣位于細(xì)胞膜，共同形成CRAC的“門戶”，而位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的STIM1分子是開(kāi)啟這扇門的“鑰匙”［18］，STIM1和Orai1之間的相互作用對(duì)于CRAC通道的開(kāi)啟和關(guān)閉有重要意義。研究［19］表明，Orai1可以同TRPC形成同源/異源復(fù)合體介導(dǎo)或者調(diào)節(jié)SOCE。除TRPC2外，TRPC家族其他成員間均可相互結(jié)合或與Orai蛋白結(jié)合組成SOC。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鈣庫(kù)中Ca2+減少到一定程度時(shí)，STIM1感受到此變化，聚合后向質(zhì)膜移動(dòng)，并與細(xì)胞膜上的TRPC通道、Orai1蛋白相互作用，引起胞外Ca2+內(nèi)流，從而補(bǔ)充胞漿和鈣庫(kù)中的Ca2+，維持細(xì)胞的興奮性。

三、TRPC通道與疾病

作為鈣庫(kù)操縱性鈣通道和受體操縱性鈣通道的分子基礎(chǔ)，功能性TRPC通道可介導(dǎo)鈣庫(kù)控制的Ca2+內(nèi)流，進(jìn)而參與多種疾病的病理生理過(guò)程。有研究［20-21］發(fā)現(xiàn)，TRPC家族參與調(diào)控腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程，與某些中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生和發(fā)展相關(guān)［22］，且在原發(fā)性高血壓和心肌細(xì)胞凋亡中也有一定的作用［23］。據(jù)報(bào)道［24-25］，TRPC6 的功能異?？蓪?dǎo)致局灶性節(jié)段性腎小球硬化，并產(chǎn)生蛋白尿，最終進(jìn)展至慢性腎功能衰竭;也可引起PASMCs增殖活性增強(qiáng)參與特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓(IPAH)的形成，并且與心肌肥大有關(guān)。

四、TRPC通道的檢測(cè)方法與研究前景

TRPC通道通過(guò)調(diào)控Ca2+內(nèi)流影響機(jī)體的生理機(jī)能。在靜息生理狀態(tài)下，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度總是保持在極低的水平，其濃度的變化會(huì)影響機(jī)體的多種功能。因此，通過(guò)檢測(cè)TRPC蛋白的變化來(lái)協(xié)助診斷治療與此相關(guān)的疾病還是有一定意義的。更進(jìn)一步的研究就是尋找TRPC的選擇性抑制劑，從而開(kāi)發(fā)一類新型的鈣通道阻滯劑。目前電生理檢測(cè)和分子生物學(xué)基因敲除等仍然是研究TRPC蛋白最有效的方法，逆轉(zhuǎn)錄PCR與蛋白免疫印跡法也同樣廣泛運(yùn)用在TRPC的檢測(cè)中。由于該領(lǐng)域的研究還剛展開(kāi)不久，目前尚缺乏快速檢測(cè)TRPC蛋白變化的手段，此類方法雖然還有待發(fā)展，但已具有廣闊的應(yīng)用價(jià)值。近年來(lái)Ca2+熒光探針的出現(xiàn)，可直接測(cè)定細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度［26］。

五、結(jié)語(yǔ)和展望

目前與TRPC通道相關(guān)的研究主要是圍繞基因缺陷性動(dòng)物模型或抑制其在細(xì)胞中的表達(dá)來(lái)進(jìn)行。大多數(shù)研究結(jié)果表明，抑制TRPC通道表達(dá)或使用阻滯劑可使細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度降低，TRPC通道通過(guò)調(diào)控SOCE影響機(jī)體的生理機(jī)能。因此，TRPC通道阻滯劑有望成為一類新型的鈣通道阻滯劑。這為預(yù)防和治療相關(guān)疾病提供新的思路。隨著研究的深入，TRPC通道的更多功能也將會(huì)被人們逐漸認(rèn)識(shí)。

［1］Christensen AP，Corey DP.TRP channels in mechanosensation:direct or indirect activation［J］.Nat Rev Neurosci，2007，8(7):510-521.

［2］Hofmann T，Schaefer M，Schultz G，et al.Subunit composition of mammalian transient receptor potential channels in living cells［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2002，99(11):7461-7466.

［3］Rosker C，Graziani A，Lukas M，et al.Ca(2+)signaling by TRPC3 involves Na(+)entry and local coupling to the Na(+)/Ca(2+)exchanger［J］.J Bio Chem，2004，279(14):13696-13704.

［4］Yuan JP，Kim MS，Zeng W，et al.TRPC channels as STIM1-regulated SOCs［J］.Channels(Austin)，2009，3(4):221-225.

［5］Putney JW Jr.A model for receptor-regulated calcium entry［J］.Cell Calcium，1986，7(1):1-12.

［6］Freichel M，Vennekens R，Olausson J，et al.Functional role of TRPC proteins in native systems:implications from knockout and knock-down studies［J］.J Physiol，2005，567(Pt1):59-66.

［7］Beech DJ，Xu SZ，McHugh D，et al.TRPC1 storeoperated cationic channel subunit［J］.Cell Calcium，2003，33(5-6):433-440.

［8］Abdullaev IF，Bisaillon JM，Potier M，et al.Stim1 and Orai1 mediate CRAC currents and store-operated calcium entry important for endothelial cell proliferation［J］.Circ Res，2008，103(11):1289-1299.

［9］Obukhov AG，Nowycky MC.TRPC4 can be activated by G-protein-coupled receptors and provides sufficient Ca(2+)to trigger exocytosis in neuroendocrine cells［J］.J Biol Chem，2002，277(18):16172-16178.

［10］Yildirim E，Birnbaumer L.TRPC2:molecular biology and functional importance［J］. Handb Exp Pharmacol，2007，179:53-75.

［11］Trebak M，Vazquez G，Bird GS，et al.The TRPC3/6/7 subfamily of cation channels［J］.Cell Calcium，2003，33(5-6):451-461.

［12］Kiselyov K，Mignery GA，Zhu MX，et al.The N-terminal domain of the IP3 receptor gates storeoperated hTrp3 channels［J］.Mol Cell，1999，4(3):423-429.

［13］Vazquez G，Lievremont JP，St J Bird G，et al.Human Trp3 forms both inositoltrisphosphate receptordependent and receptor-independent store-operated cation channels in DT40 avian B lymphocytes［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2001，98(20):11777-11782.

［14］Zeng F，Xu SZ，Jackson PK，et al.Human TRPC5 channel activated by a multiplicity of signals in a single cell［J］.J Physiol，2004，559(Pt 3):739-750.

［15］Putney JW Jr，Broad LM，Braun FJ，et al.Mechanisms of capacitative calcium entry ［J］.J Cell SCi，2001，114(Pt 12):2223-2229.

［16］Zhou Y，Mancarella S，Wang Y，et al.The short N-terminal domain of STIM1 and STIM2 control the activation kinetics of Orai1 channels［J］.J Biol Chem，2009，284(37):19164-19168.

［17］Zeng W，Yuan JP，Kim MS，et al.STIM1 gates TRPC channels，but not Orai1，by electrostatic interaction［J］.Mol Cell，2008，32(3):439-448.

［18］Yuan JP，Zeng W，Huang GN，et al.STIMl heteromultimerizes TRPC channels to determine their function as store-operated channels［J］.Nat Cell Biol，2007，9(6):636-645.

［19］Lewis RS.The molecular choreography of a storeoperated calcium channel［J］.Nature，2007，446(7133):284-287.

［20］El Boustany C，Bidaux G，Enfissi A，et al.Capacitative calcium entry and transient receptor potential canonical 6 expression control human hepatoma cell proliferation ［J］.Hepatology，2008，47(6):2068-2077.

［21］Song MY，Yuan JX.Introduction to TRP channels:structure，function，and regulation［J］.Adv Exp Med Biol，2010，661:99-108.

［22］Greka A，Navarro B，Oancea E，et al.TRPC5 is a regulator of hippocampal neurite length and growth cone morphology［J］.Nat Neurosci，2003，6(8):837-845.

［23］Lepage PK，Boulay G.Molecular determinants of TRP channel assembly［J］.Biochem Soc Trans，2007，35(Pt 1):81-83.

［24］Tamareille S，Mignen O，Capiod T，et al.High glucose-induced apoptosis through store-operated calcium entry and calcineurin in human umbilical vein endothelial cells［J］.Cell Calcium，2006，39(1):47-55.

［25］Nilius B，Owsianik G，Voets T，et al.Transient receptor potential cation channels in disease［J］.Physiol Rev，2007，87(1):165-217.

［26］石玉玲，習(xí) 松.Fluo-3熒光微量法測(cè)定人紅細(xì)胞胞漿內(nèi)游離鈣離子濃度［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2005，20(3):290-291.