方 茜 郝崗平

(泰山醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，山東 泰安 271000)

惡性腫瘤是目前導(dǎo)致人類死亡的主要病因，據(jù)統(tǒng)計(jì)每年有數(shù)以萬計(jì)的人死于癌癥。臨床上盡管可以通過早發(fā)現(xiàn)、早診斷、改進(jìn)治療方法及加強(qiáng)護(hù)理等傳統(tǒng)手段提高腫瘤患者的生存率，降低死亡率，但目前缺乏敏感而特異的早期診斷標(biāo)志物，雖然病理檢查的準(zhǔn)確率很高，但該法屬有創(chuàng)檢查不適用于普查和篩查。傳統(tǒng)治療手段創(chuàng)傷大，副作用明顯，導(dǎo)致患者預(yù)后較差。況且人們對(duì)腫瘤的發(fā)病機(jī)制仍然不明確，所以進(jìn)一步了解腫瘤發(fā)病的分子生物學(xué)特性或許可以找到診斷和治療腫瘤更好的方法和途徑。

微小核糖核酸(microRNA，miRNA)近年來因其與腫瘤密切相關(guān)成為研究熱點(diǎn),它是一種由18～25個(gè)核苷酸構(gòu)成的內(nèi)源性非編碼小分子單鏈RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)[1]。在哺乳動(dòng)物體內(nèi)人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了超過500種基因編碼miRNA，miRNA雖然僅占真核基因總基因數(shù)的1%，但調(diào)節(jié)體內(nèi)靶基因數(shù)可達(dá)30%左右。miRNA特異性的通過堿基配對(duì)的方式部分或完全結(jié)合目標(biāo)mRNA的3＇非翻譯區(qū)(3＇UTR)抑制mRNA翻譯或降解靶mRNA[2]。miRNA靶基因多樣性證實(shí)miRNA調(diào)節(jié)腫瘤過程的多樣和廣泛性，miRNA在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中可能通過調(diào)控細(xì)胞代謝發(fā)揮作用，如細(xì)胞增殖、遷移、分化、周期、凋亡和血管生成等[3-4]。本文就現(xiàn)今公認(rèn)的乏氧誘導(dǎo)型microRNA-210在惡性腫瘤中的表達(dá)、診斷、預(yù)后、治療及其與腫瘤發(fā)生機(jī)制的相關(guān)性綜述如下。

1 腫瘤細(xì)胞乏氧與miRNA-210的關(guān)系

乏氧或低氧是眾多實(shí)性腫瘤細(xì)胞微環(huán)境的一個(gè)特性，乏氧誘導(dǎo)細(xì)胞生物學(xué)功能(如能量代謝、增殖、凋亡及血管生成等)是通過乏氧誘導(dǎo)因子(hypoxia-inducible factors,HIFs)加以調(diào)控[5]。HIFs是低氧條件下調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的核心轉(zhuǎn)錄因子，是由α亞基(HIF-1α或HIF-2α)和β亞基(HIF-1β)構(gòu)成的異源二聚體。在常氧條件下，HIF-α亞單位在三種同源2-酮戊二酸依賴雙加氧酶的催化下經(jīng)過脯氨酰羥基化，通過VHL蛋白介導(dǎo)的HIF泛素化而降解。HIF-α對(duì)氧氣調(diào)節(jié)的控制還受乏氧誘導(dǎo)因子抑制因子-1(factor inhibitor HIF-1,FIH-1)的調(diào)節(jié)，其催化HIF-α上形成羥天冬氨酰殘基，其能抑制HIF-α與轉(zhuǎn)錄輔激活物p300結(jié)合而發(fā)揮活性[6]。大量研究發(fā)現(xiàn)乏氧可以誘導(dǎo)不同種類的miRNA表達(dá)，其中miRNA-210最受人們的關(guān)注，研究報(bào)道m(xù)iRNA-210是缺氧誘導(dǎo)型miRNA，它的啟動(dòng)子攜帶乏氧應(yīng)答元件(HRE)，由乏氧誘導(dǎo)因子識(shí)別[7]。在缺氧條件下，miRNA-210在內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)上調(diào)，并能促進(jìn)毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)形成及遷移[8]。miRNA-210也參與調(diào)控乏氧細(xì)胞生物學(xué)功能，其在不同種類的腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞中均以依賴HIF-1的方式表達(dá)上調(diào)，如：乳腺癌、胰腺癌、腎細(xì)胞癌等。在許多實(shí)性瘤里，每一類miRNA可以調(diào)控成百上千個(gè)與腫瘤發(fā)生和發(fā)展相關(guān)的基因。研究證實(shí)，在不同腫瘤中miRNA具有癌基因和抑癌基因的雙重作用。miRNA可通過上調(diào)癌基因或下調(diào)抑癌基因的方式激發(fā)腫瘤信號(hào)通路促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[9]。

2 miRNA-210在惡性腫瘤中的作用機(jī)制

2.1miRNA-210調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞惡性表型

miRNA-210是細(xì)胞乏氧應(yīng)答的關(guān)鍵分子，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞存活和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)介導(dǎo)的細(xì)胞遷移[10]。miRNA-210高表達(dá)可以調(diào)節(jié)乏氧微環(huán)境下腫瘤細(xì)胞線粒體呼吸功能，使乏氧腫瘤細(xì)胞具有生長優(yōu)勢。miRNA-210通過靶向定位纖維母細(xì)胞生長因子受體-1(FGFRL1)調(diào)節(jié)癌細(xì)胞增殖[11]。Yang等發(fā)現(xiàn)在肝癌細(xì)胞乏氧條件下，miRNA-210水平下調(diào)能明顯降低腫瘤細(xì)胞活性，誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯于G0/G1階段，加速細(xì)胞凋亡和提高腫瘤細(xì)胞的放療敏感性[12]。另外，還有研究證實(shí)肝癌細(xì)胞中miRNA-210表達(dá)升高可能通過靶向定位乙型肝炎病毒關(guān)鍵基因來調(diào)節(jié)乙型肝炎病毒復(fù)制并在持續(xù)性感染過程中保持病毒粒子生長的適當(dāng)水平[13]。

2.2miRNA-210調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞相關(guān)信號(hào)通路

2008年Mignon L.Loh等研究人員以白血病JMML為研究對(duì)象通過流式細(xì)胞儀在單細(xì)胞水平上發(fā)現(xiàn)了JAK-STAT5信號(hào)通路才是癌細(xì)胞形成和生長的關(guān)鍵信號(hào)，這項(xiàng)研究為探尋癌癥形成的分子機(jī)制帶來了新思路。目前人們已經(jīng)了解的腫瘤信號(hào)通路有：JAK-STAT信號(hào)通路、P53信號(hào)通路、TGF-β信號(hào)通路、Ras-PI(3)K信號(hào)通路及WNT信號(hào)通路等。miRNA-210在正常生理和病理?xiàng)l件下能調(diào)控乏氧相關(guān)腫瘤信號(hào)通路的很多方向。常氧條件下，miRNA-210過表達(dá)會(huì)使線粒體功能異常進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)有毒活性氧(ROS)含量增加[14]。另外，有研究發(fā)現(xiàn)處在乏氧條件下的胰腺癌細(xì)胞通過HIF-1α依賴通路誘導(dǎo)miRNA-210的表達(dá)[15]。HIF通路是細(xì)胞在低氧環(huán)境下存活所必需的，并在維持腫瘤細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用[16]。Mutharasan等證實(shí)缺氧心肌細(xì)胞通過Akt和P53依賴信號(hào)通路上調(diào)miRNA-210表達(dá)并具有保護(hù)心肌細(xì)胞的作用[17]。將miRNA-210抑制劑轉(zhuǎn)染細(xì)胞能夠明顯減少Tcf7l2的轉(zhuǎn)錄水平，它能夠靶向結(jié)合WNT信號(hào)途徑的下游相關(guān)基因位點(diǎn)，進(jìn)而發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。miRNA-210是成骨細(xì)胞分化正性調(diào)控因子，它可以通過抑制AcvR1b基因表達(dá)來抑制TGF-β/Activin信號(hào)通路從而促進(jìn)成骨細(xì)胞分化[18]。利用體外人工基底膜實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞-12(HUVEC-12)內(nèi)miRNA-210高表達(dá)可加強(qiáng)VEGF和VEGFR2表達(dá)和促進(jìn)血管生成[8]。

3miRNA-210在惡性腫瘤中的臨床應(yīng)用價(jià)值

3.1miRNA-210在惡性腫瘤中的表達(dá)及診斷價(jià)值

miRNA-210在大量實(shí)性瘤中的表達(dá)通常是升高的，例如乳腺癌、非小細(xì)胞性肺癌、頭頸癌、胰腺癌、口腔癌、肝細(xì)胞癌、腎上腺皮質(zhì)癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、惡性黑色素瘤以及腎細(xì)胞癌等[19]，然而在食管鱗癌組織和癌細(xì)胞株里miRNA-210表達(dá)是下降的[20]。White等[21]利用微陣列和定量PCR(Q-PCR)技術(shù)分析70對(duì)腎透明細(xì)胞癌和正常腎組織標(biāo)本，結(jié)果顯示在腎透明細(xì)胞癌組織中有166種miRNAs發(fā)生表達(dá)異常，其中miRNA-210過表達(dá)最明顯。Zhao等[22]收集68例腎癌術(shù)前血清、10例術(shù)后一周血清、42例健康對(duì)照血清，用熒光定量PCR的方法檢測血清中miRNA-210的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)術(shù)前血清含量顯著高于健康對(duì)照，術(shù)后miRNA-210含量較術(shù)前明顯下降，ROC曲線下面積為0.874，敏感性81%，特異性79.4%，表明miRNA-210可用于腎癌非創(chuàng)傷性診斷，其有望成為新型腫瘤標(biāo)志物。Shen等從32位受選肺癌患者血漿中第一次發(fā)現(xiàn)了miRNA-210的表達(dá)，與良性孤立性肺結(jié)節(jié)患者和健康人相比血漿miRNA-210出現(xiàn)高表達(dá)，并提出miRNAs的聯(lián)合檢測可提高肺癌診斷效率[23]。Allen等[24]收集3年間院內(nèi)初診胰腺癌患者血漿與正常對(duì)照采用相對(duì)定量方法發(fā)現(xiàn)患者血漿中循環(huán)miRNA-210的表達(dá)較對(duì)照4倍增加，其或許可以作為胰腺癌診斷新的生物標(biāo)記物。

3.2miRNA-210與惡性腫瘤的預(yù)后相關(guān)

Rothe等研究證實(shí)miRNA-210的高表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞增殖、侵襲和臨床不良預(yù)后有關(guān)[25]。Camps等[6]利用微陣列和Q-PCR技術(shù)檢測乏氧誘導(dǎo)下乳腺癌細(xì)胞株中miRNA-210的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miRNA-210過表達(dá)與乳腺癌細(xì)胞乏氧分?jǐn)?shù)相關(guān)，通過單變量和多變量分析顯示miRNA-210高表達(dá)與乳腺癌患者的無病生存率和總體生存率呈負(fù)相關(guān)，所以miRNA-210表達(dá)水平可以作為評(píng)估乳腺癌預(yù)后的獨(dú)立影響因子。另外，Volinia等通過進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)miRNA-210表達(dá)異常不但與乳腺癌預(yù)后有關(guān)，在乳腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移方面也發(fā)揮作用[26]。在乳腺癌患者進(jìn)行藥物輔助化療之前，微量殘留癌病人血漿循環(huán)miRNA-210水平明顯高于完全病情緩解的患者，術(shù)前乳腺癌患者血漿miRNA-210水平明顯高于術(shù)后和出現(xiàn)遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病人。Ren等從29例胰腺癌患者、22例慢性胰腺炎患者和13例正常人的糞便樣本中檢測出miRNA-210的表達(dá)，并且發(fā)現(xiàn)胰腺癌患者miRNA-210高表達(dá)與患者低存活率密切相關(guān)，因此糞便miRNA-210表達(dá)水平可以作為胰腺癌篩查的生物標(biāo)記物[27]。Quero等研究認(rèn)為檢測miRNA-210含量可以作為高風(fēng)險(xiǎn)前列腺癌患者的預(yù)后指標(biāo)[28]。miRNA-210表達(dá)可用來評(píng)定組織乏氧程度，同時(shí)也與頭頸癌患者的預(yù)后相關(guān)[29]。此外，研究人員也證實(shí)miRNA-210表達(dá)與軟組織肉瘤患者低生存率和腫瘤發(fā)病年齡密切相關(guān)[30]。

3.3miRNA-210可作為惡性腫瘤治療的靶點(diǎn)

近年來，人們發(fā)現(xiàn)了大量miRNA-210的靶分子，這些靶分子參與線粒體代謝、血管生成、DNA修復(fù)、細(xì)胞存活等生命過程。例如：3-磷酸甘油脫氫酶1(GPD1L)、SHIP-1、泡膜蛋白1(VMP1)、琥珀酸脫氫酶復(fù)合物(SDHD)、MNT及ephrin-A3等。低氧條件下， miRNA-210通過靶向抑制GPD1L而增加HIF-1α的水平，HIF-1α參與誘導(dǎo)miRNA-210表達(dá)，由此可見GPD1L是乏氧正反饋環(huán)中重要的調(diào)控因子[31]。利用miRNA-210轉(zhuǎn)染骨髓細(xì)胞株能引起SHIP-1蛋白表達(dá)的缺失[32]。乏氧引起VMP1表達(dá)減少，并且miRNA-210下調(diào)VMP1在調(diào)節(jié)乏氧介導(dǎo)的肝癌細(xì)胞遷移中發(fā)揮重要作用[33]。SDHD是三羧酸循環(huán)過程中的催化酶和線粒體呼吸鏈(復(fù)合體Ⅱ)的功能單位。miRNA-210依賴性靶分子SDHD能夠激活HIF-1[34]。MNT mRNA的3′UTR包含miRNA-210的多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，沉默該位點(diǎn)可使miRNA-210過表達(dá)[35]。在乏氧條件下，miRNA-210能夠下調(diào)ephrin-A3的表達(dá)[36]。近期研究也證實(shí)鐵-硫簇支架蛋白聚合物(ISCU)和細(xì)胞色素C氧化酶10(COX10)也是miRNA-210的潛在靶分子，它們都是線粒體電子傳遞鏈和三羧酸循環(huán)的重要作用因子[37]，Chan等研究發(fā)現(xiàn)miRNA-210靶向抑制ISCU表達(dá)[38]。這些靶分子的發(fā)現(xiàn)為惡性腫瘤的治療提供了新方向。Liu等[39]在體外利用人工合成miRNA剪切酶剪切膀胱癌細(xì)胞系中miRNA-210基因簇活性位點(diǎn)抑制miRNA-210的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)可抑制膀胱癌細(xì)胞生長和遷移并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，提出miRNA-210具有治療膀胱癌的潛在價(jià)值。對(duì)于miRNA-210高表達(dá)的特異腫瘤而言miRNA-210拮抗劑是有價(jià)值的治療工具，抗miRNA-210治療與其它藥物聯(lián)合可明顯降低心血管等系統(tǒng)的副作用，與其它治療方法(如放療化療)結(jié)合可顯著提高抗癌療效。

4 總結(jié)與展望

綜上可見miRNA-210在多種腫瘤細(xì)胞系、腫瘤組織、腫瘤患者體液中均有表達(dá)，相較正常對(duì)照，其表達(dá)可上調(diào)可下調(diào)也可無顯著差異。對(duì)于某些腫瘤而言，miRNA-210可成為有價(jià)值的腫瘤診斷和監(jiān)控標(biāo)志物。腫瘤患者預(yù)后情況和生存率高低也與miRNA-210表達(dá)密切相關(guān)。miRNA-210因?yàn)榭梢哉{(diào)節(jié)細(xì)胞增殖，干擾線粒體代謝，影響DNA修復(fù)和血管生物學(xué)活性，所以或許可以成為一種新的干預(yù)治療介質(zhì)。miRNA-210在臨床上的應(yīng)用前景廣闊，所以需要對(duì)miRNA-210調(diào)節(jié)功能進(jìn)行更深入的研究以期為腫瘤新的診斷和治療方法的發(fā)現(xiàn)提供有力依據(jù)。

5 存在的問題

國內(nèi)外對(duì)miRNA-210機(jī)制層面的研究已經(jīng)比較深入，尤其是乏氧細(xì)胞誘導(dǎo)miRNA-210表達(dá)的結(jié)論已得到廣泛共識(shí)。目前，人們將miRNA-210的研究重點(diǎn)指向腫瘤，因?yàn)榇罅垦芯恳呀?jīng)證實(shí)二者密切相關(guān)。miRNA-210在腫瘤學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值巨大，但在具體實(shí)施階段仍有許多問題有待解決：①腫瘤細(xì)胞尤其是惡性腫瘤細(xì)胞乏氧與miRNA-210關(guān)聯(lián)的分子機(jī)制仍需進(jìn)一步探討，另外還需要繼續(xù)尋找和鑒定miRNA-210的特異靶點(diǎn)。②miRNA-210及其靶分子作為治療方法的具體設(shè)想至今不明確。③如何使miRNA-210作為無創(chuàng)診斷標(biāo)志物具有更高的準(zhǔn)確性。④探索檢測miRNA-210更精準(zhǔn)的方法，如何做好質(zhì)量控制。⑤miRNA-210是否可用于監(jiān)控腫瘤動(dòng)態(tài)和治療療效等方面都需要進(jìn)行更深一步的研究和探索。所以將miRNA-210運(yùn)用于腫瘤性疾病的臨床實(shí)踐還有很長的路要走。人們在對(duì)腫瘤患者長期隨訪過程中需要繼續(xù)進(jìn)行基礎(chǔ)和臨床研究，并不斷增加對(duì) miRNA-210作用機(jī)制和調(diào)控規(guī)律的探索。

[1] Witold F, Suvendra N, et al. Mechanisms of post-transcriptional regulation by microRNAs: are the answers in sight[J]? Nature, 2008, 9(2):102-114.

[2] Xie X, Lu J, Kulbokas EJ, et al. Systematic discovery of regulatory motifs in human promoters and 3′UTRs by comparison of several mammals[J]. Nature, 2005, 434(7031):338-345.

[3] Hong L, Han Y, et al. The malignant phenotype-associated microRNA in gastroenteric, hepatobiliary and pancreatic carcinomas[J]. Expert Opin Biol Ther, 2010,10(12):1693-1701.

[4] Chen WY, Liu WJ, et al. Induction, modulation and potential targets of miR-210 in pancreatic cancer cells[J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int, 2012, 11(3):319-324.

[5] Keith B, Simon MC. Hypoxia-inducible factors, stem cells and cancer[J]. Cell, 2007, 129(3):465-472.

[6] Camps C, Francesca M.Buffa, et al. Hsa-miR-210 is induced by hypoxia and is an independent prognostic factor in breast cancer[J]. Clin Cancer Res, 2008, 14(5):1340-1348.

[7] Huang X, Ding L, Bennewith KL, et al. Hypoxia-inducible miR-210 regulates normoxic gene expression involved in tumor initiation[J]. Mol Cell, 2009, 35(6):856-867.

[8] Fasanaro P, D′Alessandra Y, Di Stefano V, et al. MicroRNA-210 modulates endothelial cell response to hypoxia and inhibits the receptor tyrosine kinase ligand ephrin-A3[J]. J Biol Chem, 2008, 283(23):15878-15883.

[9] Chang TC, Yu D, Lee YS, Wentzel EA, et al. Widespread micro-RNA repressor by Myc contributes to tumorigenesis[J]. Nat Genet, 2008,40(1):43-50.

[10] Fasanaro P, Greco S, Lorenzi M, et al. An integrated approach for experimental target identification of hypoxia-induced miR-210[J]. J Biol Chem, 2009, 284(50):35134-35143.

[11] Faraonio P, Salerno P, Passaro F, et al. A set of miRNAs participates in the cellular senescence program in human diploid fibroblasts[J].Cell Death Differ, 2012, 19(4):713-721.

[12] Yang W, Sun T, et al. Downregulation of miR-210 expression inhibits proliferation, induces apoptosis and enhances radiosensitivity in hypoxic human hepatoma cells in vitro[J]. Exp Cell Res, 2012, 318(8):944-954.

[13] Zhang GL, Li YX, Zheng SQ, et al. Suppression of hepatitis B virus replication by microRNA-199a-3p and microRNA-210[J]. Antiviral Res, 2010, 88(2):169-175.

[14] Manicardi A, Fabbri E, Tedeschi T, et al. Cellular uptakes, biostabilities and anti-miR-210 activities of chiralarginine-PNAs in leukaemic K562 cells[J]. Chem Bio Chem, 2012, 13(9):1327-1337.

[15] Chen WY, Liu WJ, et al. Induction, modulation and potential targets of miR-210 in pancreatic cancer cells[J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int, 2012, 11(3):319-324.

[16] Nakada C, Tsukamoto Y, Matsuura K, et al. Overexpression of miR-210, a downstream target of HIF lalpha, causes centrosome amplification in renal carcinoma cells[J]. J Pathol, 2011, 224 (2):280-288.

[17] Mutharasan RK, Nagpal V, Ichikawa Y, et al. MicroRNA-210 is upregulated in hypoxic cardiomyocytes through Akt- and p53-dependent pathways and exerts cytoprotective effects[J]. Am J Physiol Heart Cire Physiol, 2011, 301(4):H1519-1530.

[18] Mizuno Y, Tokuzawa Y, Ninomiya Y, et al. miR-210 promotes osteoblastic differentiation through inhibition of AcvR1b[J]. FEBS Lett, 2009, 583(13):2263-2268.

[19] McCormick R, Buffa FM, Ragoussis J, Harris AL. The role of hypoxia regulated microRNAs in cancer[J]. Curr Top Microbiol Immunol, 2010, 345:47-70.

[20] Tsuchiya S, Fujiwara T, et al. MicroRNA-210 regulates cancer cell proliferation through targeting fibroblast growth factor receptor-like1(FGFRL1)[J]. J Biol Chem, 2011, 286(1):420-428.

[21] White NM, Bao TT, Grigull J, et al. Carcinoma: biomarker discovery and consequences of miRNA dysregulation[J]. J Urol, 2011, 186(3):1077-1083.

[22] Zhao A, Li G, Péoc'h M, et al. Serum miR-210 as a biomarker for molecular diagnosis of clear cell renal cell carcinoma[J]. Exp Mol Pathol,2013,94(1):115-120.

[23] Shen J, Liu Z, Todd NW, et al. Diagnosis of lung cancer in individuals with solitary pulmonary nodules by plasma microRNA biomarkers[J]. BMC Cancer, 2011, 11:374-380.

[24] Allen S, Xin H, Hongbin C, Claudia C, et al. Circulating miR-210 as a novel hypoxia marker in pancreatic cancer[J]. Translational Oncology, 2010, 3(2):109-113.

[25] Rothe F, Ignatiadis M, Chaboteaux C, et al. Global microRNA expression profiling identifies miR-210 associated with tumor proliferation, invasion and poor clinical outcome in breast cancer[J]. PLoS One, 2011, 6(6):e20980.

[26] Volinia S, Galasso M, Sana ME, et al. Breast cancer signatures for invasiveness and prognosis defined by deep sequencing of microRNA[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 2012, 109(8):3024-3029.

[27] Ren Y, Gao J, et al. Differential signature of fecal microRNAs in patients with pancreatic cancer[J]. Mol Med Rep, 2012, 6(1):201-209.

[28] Quero L, Dubois L, Lieuwes NG, et al. miR-210 as a marker of chronic hypoxia, but not a therapeutic target in prostate cancer[J]. Radiother Oncol, 2011, 101(1):203-208.

[29] Gee HE, Camps C, et al, et al. Hsa-miR-210 is a marker of tumor hypoxia and a prognostic factor in head and neck cancer[J]. Cancer, 2010, 116(9):2148-2158.

[30] Greither T, Wurl P, Grochola L, et al. Expression of microRNA-210 associates with poor survival and age of tumor onset of soft-tissue sarcoma patients[J]. Int J Cancer, 2012, 130(5):1230-1235.

[31] Kelly TJ, Souza AL, Clish CB, et al. A hypoxia-induced positive feedback loop promotes hypoxia-inducible factor lalpha stability through miR-210 suppression of glycerol-3-phosphate dehydrogenase 1-like[J]. Mol Cell Biol, 2011, 31(13):2696-2706.

[32] Lee DW, Futami M, Carroll M, et al. Loss of SHIP-1 protein expression in high-risk myelodysplastic syndromes is associated with miR-210 and miR-155[J]. Oncogene, 2012, 31(37):4085-4094.

[33] Ying Q, Liang L, Guo W, et al. Hypoxia-inducible microRNA-210 augments the metastatic potential of tumor cells by targeting vacuole membrane protein 1 in hepotocellular carcinoma[J]. Hepatology, 2011, 54(6):2064-2075.

[34] Puissegur MP, Mazure NM, et al. miR-210 is overexpression in late stages of lung cancer and mediates mitochondrial alteration associated with modulation of HIF-1 activity[J]. Cell Death Differ, 2011, 18 (3):465-478

[35] Zhang Z, Sun H, Dai H, et al. MicroRNA-210 modulates cellular response to hypoxia through the MYC antagonist MNT[J]. Cell Cycle, 2009:8(17):2756-2768

[36] Pulkkinen K, Malm T, Turunen M, et al. MicroRNA-210 in vitro and in vivo ephrin-A3 and neuronal pentraxin 1 are potentially regulated by miR-210[J]. FEBS Lett, 2008, 582(16):2397-2401.

[37] Favaro E, Ramachandran A, et al. MicroRNA-210 regulates mitochondrial free redical response to hypoxia and Krebs cycle in cancer cells by targeting iron sulfur cluster protein ISCU[J]. PLoS One, 2010, 5(4):e10345.

[38] Chan SY, Zhang YY, Hemann C, et al. MicroRNA-210 controls mitochondrial metabolism during hypoxia by repressing the iron-sulfer cluster assembly proteins ISCU1/2[J]. Cell Metab, 2009,10(4) 273- 284.

[39] Liu Y, Han Y, Hu Z，et al. Synthetic miRNA-mowers targeting miR-183-96-182 cluster or miR-210 inhibit growth and migration and induce apoptosis in bladder cancer cells[J]. Plos One, 2012, 7(12):e52280.