白茹
摘要:維生素C廣泛存在于植物界,主要來源于新鮮蔬菜、水果之中。食物中的維生素C,在有氧環(huán)境下因存放時間過長和加工方法使其失去活性。因此能準(zhǔn)確、快速、簡便的測定出它們的維生素C的含量,對有效防止果蔬中維生素C的丟失,保證從果蔬中攝入足夠的維生素C具有重要的意義。
關(guān)鍵詞:維生素C 水果蔬菜 測定方法
中圖分類號:Q946 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1672-5336(2013)10-0012-02
維生素C又稱抗壞血酸,是人體中一種主要營養(yǎng)素,主要生化作用是促進(jìn)膠原蛋白的合成,參與膽固醇的轉(zhuǎn)化和芳香族氨基酸的代謝,是體內(nèi)重要的抗氧化劑,同時具有抗病毒作用。維生素C缺乏時可患維生素C缺乏癥,人體不能合成維生素C,廣泛存在于新鮮的水果及蔬菜中,其中柑橘,番茄,獼猴桃等果蔬中均具有較高的含量。維生素C是一種水溶性小分子生物活性物質(zhì),由于維生素C具有較強(qiáng)的還原性,對光敏感,氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸,脫氫抗壞血酸仍然具有生理活性。本文主要介紹幾種測定維生素C含量的方法,并比較其優(yōu)缺點。
1 二氯靛酚滴定法
1.1 測定原理
2,6-二氯靛酚是一種染料,其氧化型在酸性介質(zhì)中為粉紅色,在中性或堿性介質(zhì)中呈藍(lán)色,還原型的2,6-二氯靛酚無色。當(dāng)用此染料滴定含有維生素C的酸性溶液時,在維生素C未全部氧化前,滴下的染料立即被還原成無色;當(dāng)溶液中維生素C全部被氧化時,滴下的染料立即使溶液顯示粉紅色,此時即為滴定終點,表示溶液中的維生素C剛剛被氧化完全。因此,根據(jù)滴定時消耗的2,6-二氯靛酚體積,可以計算出被檢物質(zhì)中維生素C的含量。
1.2 測定方法
1.2.1 樣液制備
取本品適量(約相當(dāng)于維生素C50mg),用適量水溶解,分別加入少量2%草酸,用研缽磨成漿,用漏斗+脫脂棉過濾,濾液轉(zhuǎn)入100ml容量瓶中,用2%草酸定容,搖勻。
1.2.2 滴定度標(biāo)定
準(zhǔn)確吸取0.1mg/ml標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液各1.0ml,分別于錐形瓶中,加入1%草酸9.0ml,用微量滴定管以0.1%的2,6-二氯靛酚滴定至淡紅色,并保持15s即為終點。由染料的體積計算出滴定度T。
1.2.3 樣液滴定
用移液管吸取10毫升試液,置于錐形瓶中,滴定方法同前,記錄消耗的體積V。
1.3 計算
W(mg/100g) =V×T×100/m
2 紫外分光光度法
2.1 測定原理
維生素C在紫外區(qū)246.0nm處有最大吸收,且線性良好,可以直接采用紫外分光光度法進(jìn)行測定。
2.2 測定方法
2.2.1 繪制工作曲線
稱取0.05g L-抗壞血酸,溶于100ml硫酸溶液中,再稀釋成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別測定出其吸光度。以濃度為橫坐標(biāo),以相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。該曲線是經(jīng)過原點的一條直線,可求出該曲線的斜率。
2.2.2 樣品測定
將水果蔬菜樣品洗凈,擦干,稱取具有代表性樣品的可食部分10-50g,放入組織搗碎機(jī)中,加入少量水,迅速搗成勻漿。置于100ml容量瓶中,加入硫酸溶液溶解并稀釋至刻度,測出其吸光度A樣。由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出樣品的濃度C樣。
2.3.2 按下列公式計算所測試樣中維生素C含量:
W(mg/100g )=C樣×V/m
3 碘量法
3.1 測定原理
維生素C易溶于水,具有還原性,可被I2量氧化,因此可用I2標(biāo)準(zhǔn)溶液直接測定。
3.2 測定方法
3.2.1 配制Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液并標(biāo)定其濃度。用基準(zhǔn)K2Cr2O7進(jìn)行標(biāo)定。
3.2.2 配制I2標(biāo)準(zhǔn)溶液,用標(biāo)定好的Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定標(biāo)定。
3.2.3 果蔬樣品制備
洗凈,擦干,稱取具有代表性樣品的可食部分,放入組織搗碎機(jī)中,加入少量水和乙酸溶液,迅速搗成勻漿。
3.2.4 滴定果蔬溶液
以淀粉為指示劑,碘標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點。(藍(lán)色,30s不褪色)
3.3 計算
Wvc = C(I2)×V(I2)×M(vc)×100%/m(vc)
4 結(jié)論
維生素C的測定方法很多,各種方法各有特點。
4.1二氯靛酚滴定法簡便易行,但是有下列缺點
(1)操作過程要迅速,防止還原型抗壞血酸被氧化,滴定過程一般不超過2min。
(2)在本滴定條件下,一些非維生素C的還原性物質(zhì)也可與2,6-二氯靛酚發(fā)生反應(yīng),影響測定結(jié)果。(3)滴定所用2,6-二氯靛酚的量應(yīng)在1-4mL之間,超出或低于此范圍,應(yīng)該增減樣品液用量或改變提取液稀釋度。(4)2%草酸有抑制抗壞血酸氧化酶的作用,而1%草酸無此作用。(5)樣品提取液應(yīng)避免日光直射,否則會加速維生素C氧化。(6)生物組織提取物和生物體液常含有其他還原性物質(zhì),其中有些在同樣的條件下也可使二氯靛酚還原脫色。(7)在生物組織中,常有色素類物質(zhì)存在,給滴定終點造成困難。
4.2紫外分光光度法測定維生素C
紫外分光光度法不受其他還原性物質(zhì)等成分的干擾,操作簡單、快速、準(zhǔn)確,不需基準(zhǔn)物質(zhì)和標(biāo)定,所用試劑價格低廉,易得,該方法在實際生產(chǎn)中具有廣泛的使用價值。
4.3碘量法測定時,需要加入乙酸,使溶液呈弱酸性
總之,維生素C的含量測定方法很多,在這里只是介紹了幾種常見的,好用的方法。雖然它們有各自的缺點,但是隨著科技的進(jìn)步,會出現(xiàn)更好的方法。我相信對于維生素C的含量測定會越來越易操作,越來越精確。
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