侯小虎梁泰剛李青山

高效液相色譜法測定復方妥英麻黃茶堿膠囊中苯妥英鈉的溶出度

侯小虎1,2梁泰剛1李青山1

目的建立高效液相色譜法測定復方妥英麻黃茶堿膠囊的溶出度的方法。方法采用Diamonsil（鉆石）C18（150×4.6mm，5μm）色譜柱，以甲醇-水（50：50）為流動相，檢測波長為215nm，流速=1.0ml/min，柱溫室溫。結(jié)果三批復方妥英麻黃茶堿膠囊及片劑的溶出度為82.6%（20041202）、83.3%（20041203）、84.5%（20041204）、74.9%。結(jié)論本方法簡便，結(jié)果準確可靠，可用于本制劑質(zhì)量控制的有效方法。

復方妥英麻黃茶堿膠囊 高效液相色譜法 溶出度HPLC

【Key wors】Fufang tuoyin mahuang chajian capsules; HPLC; Dissolution

復方妥英麻黃茶堿片是主要用于治療慢性支氣管哮喘的復方制劑，其組分每片含苯妥英鈉50mg、茶堿12.5Lmg、可可堿12.5mg、咖啡因7.5mg、鹽酸麻黃堿5mg、馬來酸氯苯那敏1mg、顛茄流浸膏0.0009mL。目前只有片劑可供使用。經(jīng)前期研究發(fā)現(xiàn)，片劑的體外溶出度較低，難以達到國家藥典要求，以致于有可能影響其生物利用度，降低療效。片劑還存在生產(chǎn)工藝較為復雜、制劑成本較高等缺點。膠囊劑具有生產(chǎn)工藝簡單，可以掩蓋不良氣味等優(yōu)點，尤其是膠囊劑的體外溶出度比片劑高，可以較大程度提高藥物的生物利用度，提高療效。為此，本課題組對片劑進行了膠囊劑的劑型改造研究，對其溶出度進行了研究。

1 儀器與試藥

RCZ-8A型智能藥物溶出儀（天津大學精密儀器廠），島津 LC-10A HPLC系統(tǒng)，SPD-10Avp檢測器，LC-10ATvp輸液泵，N2000色譜工作站，TU-1900紫外可見分光光度計（普析通用），DT-100A分析天平（北京光學儀器廠），苯妥英鈉（100210-200117），其樣品由山西大同星火制藥廠提供。

2 方法與結(jié)果

由于本品為復方制劑，而苯妥英鈉為主要成分，故以苯妥英鈉為指標考察復方妥英麻黃茶堿膠囊的溶出度。

2.1 溶出度測定條件的確定

2. 1.1 溶出介質(zhì)的選擇根據(jù)中國藥典要求，選用脫氣蒸餾水作為溶出介質(zhì)。

2.1.2 方法及轉(zhuǎn)速的選擇由于本品為膠囊劑所以采用轉(zhuǎn)籃法（中國藥典2000年版二部附錄XC第一法），轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)。

2.1.3 溶出條件的確定

溶出介質(zhì)：900ml脫氣蒸餾水

溫度：37±0.5℃

方法：轉(zhuǎn)籃法（中國藥典2000年版二部附錄XC第一法）

色譜條件：以甲醇-水（50：50）為流動相；檢測波長為215nm；柱溫：室溫，

流速=1.0ml/min，靈敏度：0.05AUFS；

色譜柱：Diamonsil（鉆石）C18(150×4.6mm, 5μm)

2.2 溶出度測定方法學考察

2.2.1 囊殼及輔料的干擾性試驗按處方比例加入輔料制備空白膠囊，照“溶出度檢查法”項下方法處理，進樣20μl，記錄色譜圖，結(jié)果表明囊殼和輔料對樣品的測定沒有干擾。

2.2.2 溶液穩(wěn)定性試驗精密稱取苯妥英鈉對照品適量，加脫氣蒸餾水制成每1ml含苯妥英鈉約55μg的溶液，將溶液置于室溫（25℃），分別于0、2、4、8、12、24小時進樣20μl，RSD：0.72% 試驗結(jié)果表明，溶液在室溫（25℃）條件下24小時內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.3 線性關(guān)系試驗取苯妥英鈉對照品27.9mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加脫氣蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取0.5、1、2、4、8、10、12ml，置50ml量瓶中，用脫氣蒸餾水稀釋至刻度, 搖勻，編號為1、2、3、4、5、6、7。取1～7號溶液濾過，取續(xù)濾液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。線性方程為：A=33430.98C+22882.67，相關(guān)系數(shù)r=0.9998試驗結(jié)果見表1、圖1。

表1 溶出度檢查線性關(guān)系

圖1 苯妥英鈉溶出度工作曲線

試驗表明，苯妥英鈉溶液在2.79～66.96μg/ml濃度范圍內(nèi)與其峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.2.4 精密度試驗精密稱取苯妥英鈉對照品適量，加脫氣蒸餾水溶解并稀釋制成每1ml含苯妥英鈉55μg的溶液，進樣20μl，照高效液相色譜法測定6次。結(jié)果RSD：0.27%。說明本法精密度良好。

2.2.5 回收率試驗分別取苯妥英鈉對照品約13.75mg、18.75mg、23.75mg，精密稱定，分別置于50ml量瓶中，按處方比例加入其余對照品及輔料，加脫氣蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液6ml，置50ml量瓶中，加脫氣蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，每個濃度各制備3份，共 9份。取供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按工作曲線以峰面積計算。苯妥英鈉測得量與投入量的比值即為回收率。試驗結(jié)果見表2。

由結(jié)果可知，本法平均回收率在95～105%范圍之間，準確度可滿足含量測定要求。

2.2.6 樣品溶出曲線的測定及批間差異取三批樣品及原劑型復方妥英麻黃茶堿片各6粒（片），照溶出度測定法（中國藥典2000年版二部附錄X C第一法），以脫氣蒸餾水900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作。分別于5，10，15，20，30，45，60分鐘，取溶液3ml，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另精密稱取苯妥英鈉對照品適量，加脫氣蒸餾水制成每1ml中約含苯妥英鈉55μg的溶液，作為對照品溶液。照上述色譜條件，分別取上述兩種溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法計算出各時間點的溶出百分率。三批樣品批間差異結(jié)果見表3，由表3可知，苯妥英鈉批間差異較小。

表2 溶出度測定方法的回收率

表3 各批間溶出度差異

2.3 溶出度檢查取本品三批樣品及復方妥英麻黃茶堿片，照溶出度測定法（中國藥典2000年版二部附錄X C第一法），以脫氣蒸餾水900ml為溶劑，轉(zhuǎn)速為每分鐘100轉(zhuǎn)，依法操作。經(jīng)30分鐘時取溶液適量，濾液作為供試品溶液。另取苯妥英鈉對照品溶液。照苯妥英鈉含量測定項下方法，取上述兩種溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法，以峰面積計算每粒的溶出量。各批樣品及復方妥英麻黃茶堿片溶出度測定結(jié)果見表4、圖3～4。

表4 溶出度檢查結(jié)果

圖3 溶出度測定苯妥英鈉對照品色譜圖

圖4 溶出度測定樣品色譜圖

2.4 結(jié)果經(jīng)測定三批復方妥英麻黃茶堿膠囊及片劑溶出行為后發(fā)現(xiàn)，復方妥英麻黃茶堿膠囊的溶出度比片劑有較大提高，根據(jù)測定結(jié)果確定復方妥英麻黃茶堿膠囊溶出限度為30分鐘時溶出量不小于標示量的75%。

3 討論

溶出度測定多采用紫外分光光度法測定，但由于本品含有七種有效成分，采用紫外分光光度法測定干擾嚴重，故本文參考片劑國家標準擬采用高效液相色譜法測定。

參照復方妥英麻黃茶堿片的國家藥品標準WS-10001-(HD-1097)-2002中含量測定項下色譜條件，確定215nm為本品的溶出度測定波長，空白輔料在此處無吸收

[1] 楊志凌,陳杖榴.HPLC-2 電化學檢測法測定豬組織中的克倫特羅對人體有害的動物生長促進劑[J].色譜,2003,21(3)：245.

[2] Varian.600MHz NMR2Cold prodes[J].Instrument News,2003.

[3] 王緒明.CGC-MS聯(lián)用對中毒患者毒物快速分析的研究[J].解放軍藥學學報,2003,19(4)：250.

Determination of Dissolution in Fufang Tuoyin Mahuang Chajian Capsules bu HPLC

Hong Xiaohu Liang Taigang Li Qingshan

ObjectiveTo establish an method for the dissolution of fufang tuoyin mahuang chajian capsules by HPLC.MethodsA column of Diamonsil C18 (150×4.6mm, 5μm) was used the mobile phase consisted of methanol-water (50∶50) and the flow rate was 1.0ml.min-1. The UV detection wavelength was 215nm and column temoerature was room- temoerature.ResultsThe dissolution of batch in 20041202 was 82.6%; The dissolution of batch in 20041203 was 83.3%, The dissolution of batch in 20041204 was 84.5% The dissolution of the tablets was 74.9%.ConclusionsThe method is simple, accurate, useful in quality control for the capsules.

R917

A

1673-5846(2013)02-0616-03

1山西醫(yī)科大學藥學院，山西太原 030001

2山西醫(yī)科大學第三醫(yī)院，山西太原 030053