鄒澤華，馮永濤，曾志偉，劉希華，邢建宏

（三明學(xué)院資源與化工學(xué)院，福建三明365004）

雷公藤試管苗的馴化和移栽

鄒澤華，馮永濤，曾志偉，劉希華，邢建宏

（三明學(xué)院資源與化工學(xué)院，福建三明365004）

研究煉苗時間、培養(yǎng)基質(zhì)、栽培條件對雷公藤試管苗移栽成活率的影響。結(jié)果顯示，采用3 d閉瓶煉苗+3 d開瓶煉苗處理雷公藤試管苗移栽成活率最高，達(dá)63.3％。采用50 mg/L的ABT3號生根粉浸泡根部、在腐殖土與紅土1︰1配比的基質(zhì)中移栽成活率最高，達(dá)89.6％。雷公藤試管苗馴化和移栽過程中，不宜進(jìn)行根葉修剪，只需剪掉近地面幾片較為枯萎的葉子以便于移栽操作，移栽苗在空氣濕度高于60％的條件下室外種植即可，不必進(jìn)行溫室培養(yǎng)。

雷公藤；煉苗；移栽；基質(zhì)

雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook.f.）屬衛(wèi)矛科雷公藤屬植物，主產(chǎn)于福建、浙江、安徽、河南等地。雷公藤以根入藥，具有消腫止痛、祛風(fēng)除濕等功效[1]，近年來研究表明，雷公藤中所含的雷公藤甲素是一種高效、廣譜的抗腫瘤物質(zhì)[2]，具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。目前，雷公藤原料主要依賴野生資源，經(jīng)多年大量采挖，現(xiàn)已瀕臨枯竭[3]。因此，開展雷公藤資源的人工培育是保證其可持續(xù)開發(fā)的前提，通過生物技術(shù)手段，建立工廠化育苗技術(shù)體系是雷公藤資源培育的有效途徑。關(guān)于雷公藤組織培養(yǎng)已有一些報道，尹作鴻[4]，劉希華[5]等分別摸索出了雷公藤愈傷組織的最佳誘導(dǎo)條件，周偉等[6]研究了雷公藤生根培養(yǎng)的最佳條件，劉希華等[7]開展了雷公藤以芽繁芽培養(yǎng)研究，邢建宏[8]等優(yōu)化了雷公藤繼代增殖的條件。上述研究攻克了雷公藤組織培養(yǎng)的上游技術(shù)，但缺乏對組培苗煉苗移栽技術(shù)的探究，這直接制約了組培苗的造林利用。本研究對影響雷公藤煉苗移栽的幾個關(guān)鍵因素進(jìn)行優(yōu)化，旨在摸索出雷公藤瓶苗移栽的最佳條件，為最終實現(xiàn)雷公藤組培苗造林提供技術(shù)保障。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

以三明學(xué)院篩選的雷公藤優(yōu)良無性系為外植體，參照劉希華[7]等人的方法進(jìn)行誘導(dǎo)、繼代、壯苗和生根培養(yǎng)，獲得生根瓶苗。栽培用紅土采自三明學(xué)院后山，園土采自三明學(xué)院周邊農(nóng)田，細(xì)沙采自三明沙溪河，草炭土、腐殖土購自三明市花卉市場。

1.2 試驗方法

1.2.1 煉苗時間的選擇

選擇如下3個不同的煉苗處理，其中：處理①為直接將組培苗脫瓶移栽到培養(yǎng)基質(zhì)中；處理②為提前6 d將組培苗直接放入溫室里閉瓶煉苗3 d后再開瓶煉苗3 d；處理③為提前12 d將組培苗直接放入溫室里閉瓶煉苗6 d后再開瓶煉苗6 d。組培苗脫瓶后移栽到同一種培養(yǎng)基質(zhì)中。每個處理36株試管苗，30 d后調(diào)查移栽成活率。

1.2.2 培養(yǎng)基質(zhì)的選擇

選取最佳煉苗方式進(jìn)行煉苗處理，洗凈根部后進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)的選擇試驗。選取0、25、50 mg/L 3種不同濃度的ABT3號生根粉浸泡試管苗根部。選?。簣@土與細(xì)沙比例為2︰l；草炭土、細(xì)沙、腐殖土與紅土比例為1︰2︰2︰l；紅土與腐殖土比例為l︰1 3種不同配比的基質(zhì)，使用L9(34)正交設(shè)計表進(jìn)行正交試驗。水平設(shè)置如表1所示。每個處理48株試管苗，30 d后調(diào)查移栽成活率。

表1 正交試驗因素水平表

1.2.3 栽培條件摸索

對組培苗進(jìn)行剪根剪葉處理，以不剪根剪葉為對照，探索雷公藤試管苗移栽過程中的最佳移栽方式，每個處理60株試管苗，30 d后調(diào)查移栽成活率。

1.2.4 瓶苗移栽后的養(yǎng)護(hù)管理

試管苗移栽后第一次宜澆透水，之后以見干見濕為原則控制澆水頻率。雷公藤試管苗移栽后要做好保濕工作，前3 d不宜在烈日下暴曬，以免瓶苗干枯。移栽前要選好適宜的移栽地點，移栽后不宜再進(jìn)行搬遷，以免搬遷過程中損傷根系而影響移栽成活率。

移栽15 d后小苗基本成活，可向葉面噴施1/10MS營養(yǎng)液每周1次，促進(jìn)其健壯生長。所加肥料濃度不宜過高以免引起肥害。使用50％多菌靈1000倍液噴灑幼苗每個月一次，以防止組培苗的病蟲害。當(dāng)試管苗移栽兩個月后，將成活的幼苗帶土移植到育苗杯中，便于后期的下地種植。

1.2.5 試驗調(diào)查與計算

計算方法：移栽成活率=移栽成活株數(shù)／移栽總數(shù)×100％

2 結(jié)果與分析

2.1 不同煉苗處理對雷公藤試管苗移栽成活率的影響

不同煉苗處理對雷公藤試管苗移栽成活率的影響如表2所示，從表2可看出，開瓶煉苗3 d+閉瓶煉苗3 d、開瓶煉苗6 d+閉瓶煉苗6 d都能提高移栽成活率，其中，開瓶煉苗3 d+閉瓶煉苗3 d這種煉苗方式移栽成活率更高，達(dá)63.3％；不進(jìn)行練苗處理的移栽成活率較低，只有25.0％。由結(jié)果可知，不同練苗處理對雷公藤試管苗移栽成活影響差異顯著。適宜天數(shù)的煉苗處理可以顯著提高試管苗馴化和移栽成活率。雷公藤試管苗最佳的煉苗方式應(yīng)為：開瓶煉苗3 d+閉瓶煉苗3 d。

表2 不同練苗處理對試管苗移栽成活率的影響

2.2 不同培養(yǎng)基質(zhì)對雷公藤試管苗移栽成活率的影響

雷公藤試管苗移栽一周后若還未出現(xiàn)萎蔫狀態(tài)則一般都已經(jīng)成活。9組處理中，移栽一周后便能看出各組試管苗的生長狀況的區(qū)別，有些處理的試管苗移栽3 d后便出現(xiàn)萎蔫現(xiàn)象，試管苗萎蔫后不容易再救活。待移栽30 d后，生長翠綠的試管苗都已成活，即可調(diào)查各組成活率。各組試管苗移栽成活率如表3所示。

表3 不同培養(yǎng)基質(zhì)對試管苗移栽成活率的影響

對試驗結(jié)果極差分析如表5所示，由表5可知，B因素（培養(yǎng)基質(zhì)）對實驗結(jié)果影響顯著，A因素（ABT3號生根粉濃度）次之。就A因素而言，K3＞K2＞K1，說明A因素的最優(yōu)水平為50 mg/L的激素濃度浸泡根部，就B因素而言，K3＞K2＞K1，說明B因素最優(yōu)水平為紅土與腐殖土比例為1︰1的基質(zhì)，兩因素中最佳組合為A3B3。

對試驗結(jié)果方差分析見表4，查表可知，F(xiàn)0.10(2，4)=4.32，F(xiàn)0.05(2，4)=6.94，F(xiàn)0.01(2，4)=18.00。對比可知，F(xiàn)B＞F0.05(2，4)，說明在雷公藤試管苗的移栽成活率影響因子中因子B(培養(yǎng)基質(zhì)的配比)影響最大，達(dá)顯著水平。FA﹤F0.10(2，4)，說明因子A(ABT3號生根粉濃度)影響小，未達(dá)顯著水平。

表4 不同培養(yǎng)基質(zhì)對移栽成活率的方差分析表

由以上結(jié)果可知，不同濃度ABT3號生根粉與不同栽培基質(zhì)配比對組培苗移栽成活率的影響不同，雷公藤試管苗移栽最佳基質(zhì)配比應(yīng)為：使用50 mg/L的激素濃度浸泡根部，在紅土與腐殖土比例為1︰1的基質(zhì)中移栽，移栽成活率達(dá)89.6％。

2.3 栽培條件摸索情況

處在瓶中卷曲的雷公藤試管苗拉直長度可達(dá)15 cm以上，移栽經(jīng)驗表明3～7 cm長的雷公藤試管苗最適合移栽。過長的試管苗移栽后卷曲成堆，容易出現(xiàn)干枯現(xiàn)象。

不同的栽培條件對雷公藤試管苗移栽成活率的影響如表5所示。由表5可知，脫瓶后的試管苗不宜進(jìn)行根部、莖部的修剪，只需減掉近地面幾片較為枯萎的葉子以便于移栽操作。試驗表明，修剪莖部以及修剪太多葉子顯著降低移栽成活率達(dá)20％。用420mm×420mm×100mm規(guī)格的正方形平底育面盆和13mm×13mm的塑料育苗杯進(jìn)行雷公藤試管苗的移栽有較大的區(qū)別的成活率，正方形平底育面盆移栽的試管苗成活率較高，達(dá)56.7％。

表5 不同栽培條件試管苗移栽成活率的影響

研究發(fā)現(xiàn)，低于45％的空氣濕度不適于雷公藤試管苗煉苗和移栽，在此溫度下開瓶煉苗中很多試苗會出現(xiàn)干枯現(xiàn)象。在60～90％的空氣濕度最四核煉苗和移栽。由上述結(jié)果可知，在雷公藤試管苗的馴化和移栽過程中，不宜對試管苗根莖進(jìn)行修剪，在空氣濕度大于60％的條件下，使用420mm× 420mm×100mm規(guī)格的正方形育苗盤進(jìn)行移栽效果最佳方式。

3 討論

不經(jīng)過煉苗的組培苗移出后不能馬上適應(yīng)外界環(huán)境的變化，因此成活率較低。隨著開瓶煉苗時間的增加組培苗已基本適應(yīng)了外部光照和濕度變化，抵抗力逐漸增強(qiáng)，成活率也提高[9]。但是，增加開瓶煉苗的時間培養(yǎng)基受到各種微生物的污染的機(jī)率變大，培養(yǎng)基變干，將幼苗從培養(yǎng)瓶中取出時容易損傷幼根。試驗表明，適宜天數(shù)的煉苗處理可以顯著提高試管苗馴化和移栽成活率，不進(jìn)行煉苗處理的試管苗移栽成活率明顯較低，這與絕大多數(shù)試管苗馴化試驗研究中的結(jié)果相一致。

ABT3號生根粉對多種農(nóng)作物具有提高發(fā)芽率、促進(jìn)植株生長和提高產(chǎn)量等生理功效。本試驗通過研究發(fā)現(xiàn)使用ABT3號生根粉浸泡根部，可顯著提高移栽成活率，這與陳愛勤[10]等人研究ABT3號生根粉在造林中的應(yīng)用的結(jié)果相一致?；|(zhì)成分決定了基質(zhì)本身養(yǎng)分含量及持水能力?；|(zhì)1的配比持水能力較差，且養(yǎng)分含量相對較少，基質(zhì)3紅土與腐殖土養(yǎng)分含量高，且基質(zhì)持水能力強(qiáng)，能夠為植株提供充分的水分和養(yǎng)分?；|(zhì)2中的紅土和腐殖土含量大大減少，含有的細(xì)沙和草炭雖然改善了基質(zhì)的通氣狀況，但為植株提供的養(yǎng)分及水分不及基質(zhì)3。采用50mg/L的ABT3號生根粉浸泡根部，在紅土與腐殖土1︰1的基質(zhì)中移栽，與林照授[11]等人使用的1︰2的珍珠巖與蛭石比例為基質(zhì)相比，其生產(chǎn)成本更低，移栽的成活率更高。

試驗表明，雷公藤試管苗在60～90％的空氣濕度下煉苗和移栽最適合，較低的空氣濕度會使試管苗出現(xiàn)干枯現(xiàn)象。春夏季節(jié)自然環(huán)境即可達(dá)到此濕度要求，冬秋季節(jié)天氣干燥，適當(dāng)做好保濕工作也可移栽，整個移栽過程在自然環(huán)境下即可，溫室大棚沒能有效提高試管苗移栽成活率。這與廖才科[12]等人對雷公藤育苗氣象因子影響分析與溫室控制試驗結(jié)果相一致。

雷公藤試管苗生長過程中會有很多叢生芽，叢生芽過多加大了養(yǎng)分的吸收，不利于移栽的成活，一般以一棵植株一至兩個叢生芽為宜。研究發(fā)現(xiàn)，將多出的芽剪下后，在50 mg/L的ABT3號生根粉浸泡底部，在紅土與腐殖土1∶1的基質(zhì)中進(jìn)行扦插。仍有較高的成活率，這大大提高了繁殖系數(shù)，值得在生產(chǎn)中推廣。

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Acclimatization and Transplanting Techniques for Tissue Culture Seedlings of Tripterygium wilfordii

ZOU Ze-hua,FENG Yong-tao,ZEN Zhi-wei,LIU Xi-hua,XING Jian-hong
(School of Resources and Chemical Engineering,Sanming University,Sanming 365004,China)

In this paper the factors such as acclimatization time,substrate and cultivation techniques that influenced the transplanting survival rate of tissue culture seedlings of Tripterygium wilfordii have been researched.The results showed that covered the tissue culture bottle for 3 d and opened for 3 d,can get the good transplanting survival rates,and up to 63.3％. With 50 mg/L ABT-3 soaking the roots,transplanted in the substrate of half humus soil and half red soil,the survival rates reached about 89.6％.In the process of acclimatization and transplanting,the roots and leaves of tissue culture seedlings are unfavorable to pruning,only cut several near the ground withered leaves to facilitated transplanting operation.As long as the air humidity is more than 60％,the transplanting seedlings just need cultivate outdoor,not greenhouse.

Tripterygium wilfordii；transplant；rate of survival；substrate

S567.239

A

1673-4343（2013）06-0071-05

2013-09-25

國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目（201211311012）；福建省質(zhì)量工程建設(shè)項目（ZL1001/JT(sj)）

鄒澤華，男，福建漳州人，大學(xué)生；通訊作者：邢建宏，男，陜西寶雞人，講師。研究方向：林業(yè)與生物技術(shù)研究。