海長(zhǎng)江

內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000

HPLC法測(cè)定蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量

海長(zhǎng)江

內(nèi)蒙古自治區(qū)通遼市醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000

目的：建立高效液相色譜法測(cè)定蒙成藥陶都格其－7中梔子苷含量的方法。方法：采用高效液相色譜法。色譜柱為十八烷基鍵和硅膠；流動(dòng)相為乙腈－水（15：85）；流速：1.0mL／min；檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm；柱溫為室溫；進(jìn)樣量：10μL。結(jié)果：梔子苷的進(jìn)樣量在4.2～16μg（r＝0.9999）范圍內(nèi)與各自峰面積積分值呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，平均回收率為100.29%，RSD為0.14%（n＝6）。結(jié)論；該方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，可用于蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量測(cè)定。

陶都格其－7；HPLC；梔子苷；含量測(cè)定

蒙成藥陶都格其－7出自《醫(yī)法海鑒》，性涼，由訶子、梔子、川楝子、通經(jīng)草、鐵屑（制）、小茴香、甘草等七味組成，具有清熱明目的功能，主治眼瞼糜爛、昏朦癥、視力減退等眼病［1］。本方劑型原為攪合劑，但通遼市蒙醫(yī)研究所、內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院等醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑室均制出水丸。采用高效液相色譜法對(duì)陶都格其－7中的梔子苷含量進(jìn)行測(cè)定，方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，可用于蒙成藥陶都格其－7的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

LC－10ATvp型高效液相色譜儀（日本島津）；AUW120型電子天平（日本島津）；BS－600型電子天平（上海友生）；AS系列超聲波清洗機(jī)（天津奧特塞恩斯）。

梔子苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品鑒定所，批號(hào)：110749－200714）；陶都格其－7（通遼市蒙醫(yī)研究所制劑室，批號(hào)：20120101、20130532）；乙腈為色譜純，其它試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法［2］與結(jié)果

2.1 色譜條件 填充劑為十八烷基鍵和硅膠，流動(dòng)相為乙腈－水（15：85），檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm，流速為1.0mL／min，柱溫為室溫，供試品與對(duì)照品進(jìn)樣量為10μL。

2.2 對(duì)照品的溶液制備 取梔子苷對(duì)照品4.2mg，精密稱(chēng)定，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.3 供試液的制備 取套都格其－7研細(xì)，約取1g，精密稱(chēng)定，置50mL的三角瓶中，精密加入甲醇25mL，稱(chēng)定重量，超聲處理20min鐘，放冷，再稱(chēng)定重量，加甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。精密吸取續(xù)濾液10mL，置25mL量瓶中加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2.4 陰性對(duì)照液的制備 取缺梔子陰性對(duì)照品約取1g精密稱(chēng)定，置50mL的三角瓶中，照供試品溶液的制備方法制備，即得。

2.5 專(zhuān)屬性考察 分別吸取梔子苷對(duì)照品溶液、供試品、陰性樣品溶液各10μL進(jìn)樣，按上述色譜條件進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果供試品溶液中梔子苷與雜峰完全分離，陰性樣品溶液無(wú)干擾。譜圖見(jiàn)圖1、2、3。

2.6 線(xiàn)性關(guān)系考察 分別精密吸取梔子苷對(duì)照品溶液1、2、3、4mL置10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取上述溶液10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定其峰面積。并以峰面積（Y）對(duì)梔子苷的進(jìn)樣量（X）進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得回歸方程：Y＝5.38157e－005*X－0.164976，r＝0.9999。結(jié)果表明，梔子苷對(duì)照品進(jìn)樣量在4.2～16μg范圍內(nèi)，與峰面積具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.7 精密度實(shí)驗(yàn) 精密吸取對(duì)照品溶液10μL，在相同色譜條件下分別重復(fù)進(jìn)樣6次，分別測(cè)定峰面積的積分值，梔子苷的RSD為0.57%（n＝6），結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.8 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 精密吸取同一供試品10μL，每隔2h注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定其峰面積積分值，結(jié)果RSD為0.75%（n＝6），表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.9 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn) 密吸取同一份供試品溶液各10μL，在上述色譜條件下分別重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，測(cè)定其峰面積積分值，結(jié)果梔子苷的平均含量2.15μg／mL，RSD 為1.39%（n＝6），分析方法重復(fù)性良好。

2.10 加樣回收率 取已知含量的供試品1.00g，分別精密加入一定量的對(duì)照品，按2.2.2項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表1，梔子苷的平均回收率為100.29%，RSD為0.14%（n＝6）。

表1 加樣回收試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果

2.11 樣品含量測(cè)定 吸取供試品溶液10μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積。結(jié)果見(jiàn)表2。

3 結(jié)論

通過(guò)蒙成藥陶都格其－7中梔子苷含量的連續(xù)測(cè)定、陰性溶液的干擾試驗(yàn)、樣品穩(wěn)定性、儀器精密度及其加樣回收率的試驗(yàn)，表明該方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，可用于蒙成藥陶都格其－7中梔子苷的含量分析。

［1］蒙醫(yī)學(xué)編輯委員會(huì).中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·蒙醫(yī)學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1992：264.

［2］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（第一部）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄36.

R284.2

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1007－8517（2013）16－0028－02

2013.06.22）