劉曉雯

（河南省漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院，河南 漯河 462300）

便潛血試驗酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法做對比分析

劉曉雯

（河南省漯河市郾城區(qū)人民醫(yī)院，河南 漯河 462300）

目的 探討便潛血試驗酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法結(jié)果。方法 本次醫(yī)學(xué)研究選擇我院2010年1月至2012年1月之間收治的60例便潛血試驗患者為觀察對象，所有患者均同時接受酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法檢測，對比兩種方法臨床檢查結(jié)果。結(jié)果 聯(lián)苯胺法便潛血試驗陽性檢出率為40%，酶聯(lián)法為23.4%；聯(lián)苯胺法對于動物和人的血紅蛋白檢測結(jié)果均為陽性，酶聯(lián)法僅對人類檢測結(jié)果為陽性，兩種方法試驗結(jié)果對比具有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。結(jié)論 由本次臨床研究結(jié)果可知，聯(lián)苯胺法便潛血試驗，盡管敏感性較好，但假陽性率較高，且特異性較差；而酶聯(lián)法可作為人類便潛血試驗首選方法，因而具有較高的臨床推廣和應(yīng)用價值。

便潛血試驗；酶聯(lián)法；聯(lián)苯胺法

便潛血試驗是的是肉眼無法見到血色，消化道出血量較少，顯微鏡檢查無法發(fā)現(xiàn)，且僅含有少量被破壞紅細(xì)胞的一種出血癥狀。便潛血試驗是臨床上較為常用的消化道出血臨床檢查依據(jù)。便潛血檢查的方法較多，但最為常用的主要包括免疫方法和化學(xué)方法兩類，其中，前者具有不收還原性藥物和飲食結(jié)構(gòu)影響和限制等顯著優(yōu)勢，而后者則會受到較多因素的影響，因而假陽性檢出率較高，特異性較差。酶聯(lián)法是近年來出現(xiàn)的一種便潛血臨床試驗方法，該方法具有不受飲食和藥物因素影響，操作方法便捷、準(zhǔn)確、簡單、快速等顯著優(yōu)勢，因而受到了臨床醫(yī)學(xué)工作者和醫(yī)學(xué)理論研究人員的一種認(rèn)可。本次臨床研究對便潛血試驗酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法的檢查結(jié)果進(jìn)行了分析，現(xiàn)將本次臨床研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 試劑

聯(lián)苯胺法便潛血試驗，選用3%的過氧化氫溶液和聯(lián)苯胺冰醋酸溶液10g/U作為試驗試劑；酶聯(lián)法便潛血試驗，選用萬華牌速而準(zhǔn)便潛血條形試紙（萬華普曼工程有限公司生產(chǎn)，批號：98020303）作為試驗器材。

1.2 方法

依據(jù)《臨床檢驗基礎(chǔ)》的相關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格執(zhí)行聯(lián)苯胺法便潛血試驗。酶聯(lián)法便潛血試驗方法為：依據(jù)說明書嚴(yán)格執(zhí)行操作，糞便液混合搖勻后，將其滴入測試窗口內(nèi)，靜置5min，對反應(yīng)區(qū)變化情況進(jìn)行觀察。若反應(yīng)線和控制線均未出現(xiàn)，則視為無效，需要重新進(jìn)行試驗；若僅顯示處控制線，則確定為陰性；若同時出現(xiàn)反應(yīng)線和控制線，則確定為陽性。

1.3 標(biāo)本來源

本次醫(yī)學(xué)研究選擇我院2010年1月至2012年1月之間收治的60例便潛血試驗患者為觀察對象，所有患者均同時接受酶聯(lián)法與聯(lián)苯胺法檢測。同時，從魚、雞、羊、豬四種動物中獲取用于特異性試驗的血紅蛋白。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

使用SPSS17.0軟件對本次醫(yī)學(xué)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。使用（）表示計量資料，使用單因素方差分析法對數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，使用χ2檢驗方法對計數(shù)資料進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，若P＜0.05，則表示數(shù)據(jù)之間差異具有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 敏感性對比

酶聯(lián)法便潛血試驗共有14例患者為陽性，約占23.4%，聯(lián)苯胺法便潛血共有24例患者為陽性，約占40%。聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法便潛血試驗結(jié)果對比具有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.05）。如表1所示。

表1 聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法便潛血試驗靈敏性對比分析[n/%]

2.2 特異性對比

分別對四種動物和人類的血蛋白液的肌肉組織和血液樣品進(jìn)行聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法檢測，檢測結(jié)果證實，人血紅蛋白液聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法檢測結(jié)果均為陽性，而魚、雞、羊、豬4種動物的聯(lián)苯胺法檢測結(jié)果為陰性，酶聯(lián)法檢測結(jié)果為陽性。4種動物血液辨別血紅蛋白液分別接受聯(lián)苯胺法和酶聯(lián)法便潛血試驗，如表2所示。

2.3 抗干擾試驗

將維生素C加入濃度為的3.0g/mL血紅蛋白液中，從而配置成維生素C濃度分別為5.0 mg/mL和2.5mg/mL的兩種血紅蛋白液試驗樣品。分別通過酶聯(lián)法和聯(lián)苯胺法對兩種濃度不同血紅蛋白液試驗樣品進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果證實，聯(lián)苯胺法檢測結(jié)果會受到大劑量維生素C的影響，產(chǎn)生反應(yīng)抑制作用，從而降低Hb含量，并提高假陽性檢出率；而酶聯(lián)法檢測結(jié)果則全部為陰性，不會受到維生素C劑量的影響。

表2 聯(lián)苯胺法與酶聯(lián)法便潛血試驗特異性對比分析[n/%]

3 討 論

便潛血試驗檢測的主要化學(xué)依據(jù)在于：血紅蛋白與過氧化物酶的基本作用相近，能夠?qū)^氧化氫氧化某些色原顯色產(chǎn)生催化作用。聯(lián)苯胺無色孔雀綠是臨床上較為常用的色原。聯(lián)苯胺法就是以上述作用原理為基礎(chǔ)上，通過聯(lián)苯胺為色原，進(jìn)行便潛血試驗的一種技術(shù)[1]。酶聯(lián)法是針對便潛血試驗的特異性特點而逐漸發(fā)展成熟起來的一種免疫學(xué)檢測方法，其主要作用原理在于以克隆抗體和單克隆為基礎(chǔ)上，僅僅針對人體糞便樣品中血紅蛋白的特異性檢測，而不針對其他種類血紅蛋白，因而使用酶聯(lián)法進(jìn)行便潛血試驗時，只有在糞便樣品中含有血紅蛋白時，其便潛血試驗結(jié)果才能夠顯示為陽性，而其他試驗結(jié)果均為陰性[2]。臨床醫(yī)學(xué)研究結(jié)果表明，消化道癌癥患者便潛血檢測陽性率通常在95%以上，而消化道潰瘍患者便潛血檢測的陽性率應(yīng)在40%～70%，糞便中的微量血紅蛋白檢測對于消化道潰瘍和消化道腫塊等胃腸系統(tǒng)出血性疾病的早期診斷和治療過程中具有十分重要的意義。

通過聯(lián)苯胺法進(jìn)行糞便隱血測試會在一定程度上受到多種復(fù)雜因素的影響，通常情況下，要求首檢人間在檢測前3d內(nèi)要避免食用維生素C、含有過氧化物酶類的新鮮蔬菜（包括木耳、油菜、芹菜、韭菜、菠菜、西紅柿和胡蘿卜等）以及動物肉類，但是，這一要求通常無法進(jìn)行準(zhǔn)確的界定和嚴(yán)格顯示。由此可見，使用聯(lián)苯胺法進(jìn)行便潛血測定仍然存在一定的限制，具有中高敏感性、假陽性檢出率較高且特異性較差，因而不能進(jìn)行0.18～2g/mL的微量出血測試，而這一觀點在本次臨床研究中也得到了可靠的證明。糞便潛血測試在消化系統(tǒng)腫瘤和消化道出血的臨床檢查和診斷過程中具有較高的應(yīng)用價值和參考意義，這就需要試驗具有操作簡便，特異性和靈敏度高的優(yōu)勢，且試驗過程中應(yīng)選擇對操作人員無明顯危害的檢測試劑。由本次臨床研究結(jié)果可知，試驗酶聯(lián)法進(jìn)行便潛血測試，具有較高的準(zhǔn)確性、特異性和靈敏程度，且檢測結(jié)果與臨床診斷的符合率較高，不會受到食物和藥物因素的影響。

由本次臨床研究結(jié)果可知，聯(lián)苯胺法便潛血試驗靈敏度能夠達(dá)到100%，特異性為83.3%，陽性檢出率為40%；酶聯(lián)法便潛血試驗靈敏度為93.8%，特異性為100%，陽性檢出率為23.4%?？梢?，聯(lián)苯胺法便潛血試驗技術(shù)，盡管操作較為簡單，且靈敏性較高，但假陽性率較高，特異性較差，同時，聯(lián)苯胺法還具有一定的致癌危險，因而臨床應(yīng)用價值有限。而酶聯(lián)法則具有較強(qiáng)的特異性，結(jié)果更加易于判讀，且檢驗結(jié)果獲得速度較快，操作簡單易行，靈敏性和特異性較強(qiáng)，同時，不會受到某些藥物、維生素C和鐵劑等物質(zhì)的影響，因而具有較高的臨床推廣和應(yīng)用價值[3]。

[1] 盧克友.糞便隱血試驗單克隆抗體法與聯(lián)苯胺法的比較[J].福建醫(yī)藥雜志,2008,30(2):109-110.

[2] 何淑霞,張冬青.便潛血單克隆抗體法與聯(lián)苯胺法特異性比較[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2001,23(8):472-473.

[3] 石晶,張麗霞,于素云.糞便潛血單克隆抗體一步實驗法[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,2009,22(3):192-193.

R446.13+3

B

1671-8194（2013）35-0145-02