張?bào)沔?顧冬英 張保國 湯翠菊 仝娜 龔偉達(dá) 譚永飛 周建偉 王美林 陳錦飛 張正東

胃癌是中國最常見的惡性腫瘤之一，近年來雖然在部分地區(qū)逐漸下降，但仍然是導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡的主要原因。由于胃癌的早期癥狀多不典型，多為腹痛腹脹等消化不良表現(xiàn)，尤其老年人往往合并高血壓、糖尿病等多種疾病，癥狀交雜且自身認(rèn)識不足，有些因?yàn)槔夏耆俗陨矸磻?yīng)性低，自覺癥狀較輕甚至無癥狀，直至發(fā)生梗阻或出血等情況才就診［1］。胃癌的發(fā)病幾乎侵襲著各個(gè)年齡段的人們，其高發(fā)年齡段在50 ～70 歲之間。老年人易患胃癌的原因有:其一，致癌因素作用于人體后往往要經(jīng)過15 ～30 年的致癌潛伏期。其二，機(jī)體的免疫功能減弱，對病變的免疫監(jiān)視作用自40 歲起逐漸降低，從而有利于腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

rs13387042 基因多態(tài)位于2q35 染色體［2］。已有文獻(xiàn)對rs13387042 基因多態(tài)性與乳腺癌及前列腺的易感性進(jìn)行研究［3-5］，并發(fā)現(xiàn)rs13387042 基因多態(tài)性與乳腺癌的易感性有關(guān)。rs13387042 多態(tài)性是否與胃癌的易感性及預(yù)后存在聯(lián)系目前尚不清楚。此研究探討了rs13387042 基因多態(tài)性與中國人群的老年胃癌患者預(yù)后的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 研究對象 本研究收集從1999 年2 月到2006 年10 月期間在江蘇省宜興市人民醫(yī)院接受手術(shù)治療的522 例(≥60 歲)老年胃癌患者。所有患者均為無親緣關(guān)系的漢族人群。對上述觀察對象進(jìn)行隨訪，采用電話聯(lián)系的方式，直接聯(lián)系患者本人或家屬。隨訪時(shí)間為手術(shù)開始時(shí)至隨訪截止、患者失訪或死亡的時(shí)間。缺少足夠隨訪信息的患者會被剔除。生存期是從手術(shù)開始至胃癌相關(guān)性死亡或者末次隨訪時(shí)間。TNM 分期系統(tǒng)是參照美國癌癥聯(lián)合會(AJCCS)標(biāo)準(zhǔn)劃分的［6］。

1.2 基因分型 從患者的石蠟包埋組織中通過蛋白酶K 分解，異丙醇提取和乙醇沉淀分離出DNA 基因片段。采用SNaPshot 方法對分離的DNA 進(jìn)行基因分型。最終，499 例胃癌患者被納入研究，基因分型中DNA 質(zhì)量存在問題的被排除。其中男396 例，女103例。年齡60 ～81 歲，平均(71.0 ±7.2)歲。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有的臨床數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0軟件包進(jìn)行處理和分析。rs13387042 基因多態(tài)性對胃癌患者生存影響的比較采用Kaplan-Meier 法和Logrank 檢驗(yàn)［7］。單變量和多變量Cox 回歸分析被用于估計(jì)死亡危險(xiǎn)性。3 種基因模型(共顯性模型、顯性模型、隱性模型)用于評估rs13387042 與老年胃癌患者生存之間的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 隨訪時(shí)間和生存期 本組資料隨訪0 ～118 月。中位生存時(shí)間為63 月。

2.2 rs13387042 基因多態(tài)性對胃癌預(yù)后的影響 用單變量Cox 回歸分析在3 種不同基因模型中的rs13387042 基因型與老年胃癌生存的關(guān)系，結(jié)果顯示，在顯性基因模型中，攜帶GA/AA 基因型的胃癌患者死亡率與攜帶GG 基因型者相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(HR=1.07，95% CI:0.85 ～1.36，P =0.54)。為了進(jìn)一步評估rs13387042 基因型與胃癌生存的關(guān)系，按照腫瘤大小進(jìn)行了分層分析。無論是在腫瘤≤5 cm，還是＞5 cm 的患者中，攜帶GA/AA 基因型患者的死亡危險(xiǎn)系數(shù)與攜帶GG 基因型者相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(HR=0.75，95% CI:0.47 ～1.21，P =0.24;HR =1.15，95% CI:0.74 ～1.80，P=0.15)。見表1。

表1 rs13387042 多態(tài)性與胃癌預(yù)后的關(guān)系

2.3 腫瘤≤5 cm 患者顯性模型中的分層分析rs13387042 基因多態(tài)性在腫瘤≤5 cm 的胃癌患者中與整體生存的關(guān)系通過有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，入侵深度，有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，組織類型和TNM 分期進(jìn)行分層分析。無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(HR=0.68，95% CI:0.41 ～0.93)、腸型胃癌(HR =0.61，95% CI:0.33 ～0.97)患者中，攜帶GA/AA 患者與攜帶GG 患者相比死亡風(fēng)險(xiǎn)顯著降低。見表2。

在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、不同入侵深度、有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及不同TNM 分期的患者中，攜帶GA/AA 患者與攜帶GG 患者相比死亡風(fēng)險(xiǎn)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見表2。

2.4 死亡危險(xiǎn)性Cox 回歸的多變量分析 以性別、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、組織類型、rs13387042為自變量，以預(yù)后為因變量作Cox 回歸的多變量分析。結(jié)果表明性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、組織類型以及rs13387042 不可作為預(yù)測腫瘤≤5 cm 患者預(yù)后的獨(dú)立標(biāo)志。見表3。

表2 rs13387042 基因多態(tài)性與預(yù)后關(guān)系的分層分析

3 討論

胃癌的發(fā)生是一個(gè)十分復(fù)雜的生物學(xué)過程，它與基因背景和環(huán)境因素的相互作用有關(guān)［8］。大量的流行病學(xué)研究表明不但幽門螺桿菌感染、腌制食品等外在因素可以導(dǎo)致胃癌的發(fā)生，遺傳因素在胃癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)中也占有重要位置［9-10］。特別是單核苷酸多態(tài)性被認(rèn)為與胃癌的易感性及預(yù)后有關(guān)，例如PSCA 的基因多態(tài)性可能作為預(yù)測胃癌預(yù)后的標(biāo)志［11］。本研究發(fā)現(xiàn)，3 種不同基因模型中的rs13387042 基因型與老年胃癌患者的生存無明顯相關(guān)性。在腫瘤≤5 cm 患者中，攜帶GA/AA 基因型患者較攜帶GG 基因型者有相對較長的生存期。在腫瘤＞5 cm 的患者中，攜帶GA/AA 基因型患者較攜帶GG 基因型者有相對的較高的死亡率。有關(guān)攜帶不同基因型患者生存期上差別的機(jī)制仍然沒有非常明確。其原因可能是不同的基因型在癌癥起源、發(fā)生發(fā)展及臨床特征上存在差別，從而對胃癌的預(yù)后產(chǎn)生不同的影響。進(jìn)一步的分層分析中，我們發(fā)現(xiàn)在無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和腸型胃癌患者患者中有較好的預(yù)后。已有研究發(fā)現(xiàn)，在影響胃癌預(yù)后的諸多因素中，病灶的浸潤深度和淋巴轉(zhuǎn)移是最重要的因素。本研究提示腫瘤大小也一定程度胃癌預(yù)后。我們推測，與腫瘤＞5 cm 患者相比，在腫瘤≤5 cm 患者中，攜帶GA/AA 基因型患者可能會有效抑制腫瘤生長，進(jìn)而延長患者的生存期。

研究報(bào)道，在正常人群中，TOX3 基因在中樞神經(jīng)系統(tǒng)大量表達(dá)。其過表達(dá)可通過激活抗壞死系統(tǒng)阻止神經(jīng)元細(xì)胞死亡［12］。由此可以猜想，rs13387042 在無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和腸型胃癌患者中提高生存期可能與其可以通過某些我們未知機(jī)制阻止正常細(xì)胞向腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化或者抑制腫瘤細(xì)胞大量增殖有關(guān)。我們的研究可能為預(yù)測老年胃癌患者的生存，特別是中國患者提供基因基礎(chǔ)上的支持。

表3 死亡危險(xiǎn)性Cox 回歸的多變量分析

一些GWAS 研究證明rs13387042 多態(tài)性與歐洲、非裔美國等國家的婦女乳腺癌患病率相關(guān)［13-16］。然而，在日本婦女中的研究并未發(fā)現(xiàn)rs13387042 與乳腺癌易感性有關(guān)［17-18］。由此可知，由于我們只在中國人群中做了研究，而不同國家人群由于遺傳背景及生活方式不同，其結(jié)果可能不同。由于我們只分析了2q35 rs13387042 一個(gè)基因多態(tài)，其他被篩選的可能影響癌癥易感性及預(yù)后的基因多態(tài)沒有被研究，我們不能肯定是否只有這一個(gè)位點(diǎn)參與影響胃癌預(yù)后。因此，有待于以不同人群為研究對象的大樣本的研究來驗(yàn)證2q35 rs13387042 與胃癌預(yù)后的關(guān)系。

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