阮劍均， 閆俊書(shū)， 宦海琳， 田光洪， 賈代漢， 薛永峰， 周維仁

(1.江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所，江蘇 南京 210014;2.江蘇立華牧業(yè)有限公司，江蘇 常州 213168)

油脂具有高能量、易吸收等特點(diǎn)，在肉雞日糧中添加油脂，可以滿足肉雞快速生長(zhǎng)的能量需要，并提高飼料利用效率。油脂可以提高肉雞日增重和飼料轉(zhuǎn)化率［1］，促進(jìn)飼料中養(yǎng)分的消化吸收［2］。油脂按來(lái)源一般分為植物性油脂和動(dòng)物性油脂，兩者主要區(qū)別在于脂肪酸飽和度不同。動(dòng)物油脂中飽和脂肪酸含量高，肉雞對(duì)其消化吸收利用率較低［3］，植物油脂含有較多的不飽和脂肪酸，更利于養(yǎng)分的吸收和減少脂肪的沉積［4-5］。而肉雞在生長(zhǎng)過(guò)程中，內(nèi)源酶的活性隨著日齡的增加而明顯變化，在生長(zhǎng)早期由于胃腸道發(fā)育不完善，缺乏相關(guān)的消化酶，限制了肉雞對(duì)油脂的利用［6］。因此日糧脂肪酸組成合理，不僅可以促進(jìn)脂肪的消化吸收，還能改善蛋白質(zhì)和能量的利用，促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)發(fā)育。目前飼料行業(yè)中使用較多的油脂主要有玉米油、大豆油、葵花籽油、棕櫚油、豬油和牛油等，而米糠毛油作為非傳統(tǒng)油脂，因其具有合理的脂肪酸組成［7］，含有豐富的維生素E、角鯊烯、植物甾醇、谷維素等幾十種天然生物活性成分［8］，且生產(chǎn)成本低，近年來(lái)已發(fā)展成為重要的油料資源之一。有研究結(jié)果表明，米糠油具有降低血清總膽固醇、甘油三酯和提高養(yǎng)分消化率的功效［9-10］，但是目前有關(guān)米糠油在畜禽業(yè)中應(yīng)用研究報(bào)道較少。本試驗(yàn)以肉雞為研究對(duì)像，在日糧中分別添加米糠毛油和其他常用油脂(大豆毛油、豬油、棕櫚油)，比較其對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、消化器官的發(fā)育及消化酶活性的影響，以期為米糠毛油在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

選用1日齡肉雞(中白雞)2 400只，由常州立華畜禽有限公司武進(jìn)分公司種禽部提供。試驗(yàn)用米糠毛油、大豆毛油和棕櫚油由常州龍城糧油有限公司提供，優(yōu)質(zhì)豬油從市場(chǎng)購(gòu)得。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2012年5～6月，在常州立華畜禽有限公司進(jìn)行。采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，肉雞隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100只雞(公母各半)，分為1～21日齡、22～42日齡2個(gè)飼養(yǎng)階段。各試驗(yàn)組在無(wú)油基礎(chǔ)日糧中分別添加米糠毛油(RBO)、大豆毛油(SO)、豬油(LO)、棕櫚油(PO)，所有日糧含有相同的能量水平。試驗(yàn)日糧采用玉米-豆粕型日糧，其配制參照美國(guó)NRC(1994)的“家禽的營(yíng)養(yǎng)需要量”。日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，不同油脂脂肪酸組成見(jiàn)表2。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient levels of the diet

表2 各試驗(yàn)組油脂的脂肪酸組成Table 2 Fatty acid composition of oils for different groups

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)雞只進(jìn)行常規(guī)飼養(yǎng)管理，自由采食和飲水，雞舍采用自然光和白熾燈補(bǔ)光相結(jié)合，每天光照時(shí)間控制在15～16 h。定期清理糞便，保持正常育雛溫度。分別在每天早晨8∶00和下午16∶00進(jìn)行人工投喂各試驗(yàn)組所用飼料。飼養(yǎng)期間定期對(duì)雞舍消毒，并按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫。在試驗(yàn)過(guò)程中，一旦出現(xiàn)死雞，立即稱量死雞重和剩料量，以消除死雞對(duì)最后試驗(yàn)結(jié)果的影響。

1.4 樣品的采集

分別在第21 d和42 d清晨8∶00(此前供水禁食12 h)從每組隨機(jī)取6只雞(公母各半，每個(gè)重復(fù)1只)，稱重后進(jìn)行頸靜脈放血至死。隨后迅速解剖試驗(yàn)雞，取出肝臟、腎臟、肌胃、腺胃和脾臟，裝入自封袋中－20℃保存?zhèn)溆?。取出腸道，輕輕擠出前腸(十二指腸和空腸)中的內(nèi)容物，擠入10 ml帶蓋的離心管內(nèi)，并于－20℃冰箱中保存。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生產(chǎn)性能 分別于第1 d、21 d、42 d(其中21 d和42 d提前禁食12 h，自由飲水)空腹稱量試驗(yàn)雞體重，計(jì)算平均體重。以重復(fù)為單位，每重復(fù)抓取與該重復(fù)平均體重相近的試驗(yàn)雞1只，稱重后頸靜脈放血致死。并記錄各重復(fù)的采食量和死亡情況，計(jì)算日增重、料重比和死淘率。

1.5.2 器官指數(shù) 解剖試驗(yàn)雞后，立即分離肝臟(去膽囊)、心臟、胰腺、腺胃和肌胃并稱重。計(jì)算臟體比值(Ogan index)，臟體比 =器官重(g)/體重(kg)。

1.5.3 腸道內(nèi)容物消化酶活性 測(cè)定前將腸道內(nèi)容物解凍，用10倍體積的4℃生理鹽水稀釋。稀釋后在冰浴中勻漿，然后于4 000 r/min在4℃離心20 min，取上清液分裝后于－20℃冰箱中保存待測(cè)。采用試劑盒(劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所)測(cè)定消化酶活性。脂肪酶(LPS)活性單位(U)定義為:在37℃條件下，1 min消耗1.0 μmol底物為1個(gè)酶活性單位。胰蛋白酶(Trypsin)活性單位(U)定義為:在pH 8.0、37℃條件下，1 mg蛋白質(zhì)中含有的胰蛋白酶1 min使吸光度變化0.003即為1個(gè)酶活性單位。淀粉酶(AMS)活性單位(U)定義為:組織中1 mg蛋白質(zhì)在37℃下與底物作用30 min，水解10 mg淀粉定義為1個(gè)淀粉酶活性單位。

1.5.4 胰腺消化酶活性測(cè)定 取部分胰腺剪碎，用10倍體積的4℃生理鹽水稀釋，稀釋后在冰浴中勻漿。然后于4 000 r/min在4℃離心20 min，取上清液分裝后于－20℃冰箱中保存待測(cè)。用試劑盒測(cè)定脂肪酶、胰蛋白酶和淀粉酶活性。

1.6 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用Excel 2007進(jìn)行初步整理，用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因子方差(One-way ANOVA)分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，并用鄧肯氏(Duncan’s)法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同油脂對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，試驗(yàn)前期日糧中添加不同油脂對(duì)肉雞的平均體重、平均日增重和料重比均無(wú)顯著性影響(P＞0.05)，但不同程度地影響試驗(yàn)雞的平均日采食量，米糠毛油組平均日采食量顯著低于大豆毛油組和棕櫚油組(P＜0.05)，分別降低了3.88%和4.09%，而大豆毛油組、豬油組和棕櫚油組之間無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在試驗(yàn)后期，豬油組平均日增重高于其他各組，而米糠毛油組平均日增重均比其他各試驗(yàn)組低;對(duì)于平均日采食量，米糠毛油組同樣低于其他各試驗(yàn)組，并且顯著低于棕櫚油組(P＜0.05)，但各試驗(yàn)組的料重比差異均不顯著(P＞0.05)?？v觀試驗(yàn)全期，平均日增重、平均日采食量及料重比在各試驗(yàn)組之間并無(wú)顯著差異(P＞0.05)。

表3 不同油脂對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響Table 3 Effects of different oils on growth performance of broilers

2.2 不同油脂對(duì)肉雞消化器官發(fā)育的影響

由表4可以看出，在21日齡時(shí)，米糠毛油組各器官臟體比與其他各組相比均無(wú)顯著差異(P＞0.05)，且各組間也無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。在42日齡時(shí)，米糠毛油組心臟指數(shù)高于大豆毛油組、棕櫚油組和豬油組，且顯著高于棕櫚油組和豬油組(P＜0.05);大豆毛油組肝臟指數(shù)值最高，豬油組最低，但各組間無(wú)顯著差異(P＞0.05);對(duì)于胰腺相對(duì)質(zhì)量指標(biāo)，米糠毛油組極顯著高于棕櫚油組(P＜0.01)，且顯著高于豬油組(P＜0.05)，其中以棕櫚油組胰腺相對(duì)質(zhì)量最小;米糠毛油組的腺胃相對(duì)質(zhì)量顯著低于豬油組(P＜0.05)，但與棕櫚油組和大豆毛油組相比無(wú)差異顯著;肝臟與肌胃的相對(duì)質(zhì)量受油脂類型的影響不大(P＞0.05)。

表4 不同油脂對(duì)肉雞消化器官指數(shù)的影響Table 4 Effects of different oils on indexes of digestive organs of broilers

2.3 不同油脂對(duì)肉雞胰腺消化酶活性的影響

不同油脂對(duì)肉雞胰腺胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性的影響見(jiàn)表5。在肉雞21日齡時(shí)，與棕櫚油、豬油相比，米糠毛油和大豆毛油分別提高了胰腺淀粉酶、脂肪酶的活性(P＜0.05)，其中在淀粉酶和脂肪酶活性指標(biāo)上，大豆毛油均比棕櫚油、豬油極顯著地增加酶活性(P＜0.01)，且米糠毛油也比棕櫚油、豬油更能提高酶的活性(P＜0.05)。在試驗(yàn)后期，大豆毛油組的胰腺脂肪酶活性極顯著高于棕櫚油組(P＜0.01)，顯著高于豬油組(P＜0.05)。但無(wú)論是試驗(yàn)前期或試驗(yàn)后期，日糧中添加不同類型油脂對(duì)肉雞胰腺胰蛋白酶活性無(wú)顯著影響。

表5 不同油脂對(duì)肉雞胰腺消化酶活性的影響Table 5 Effects of different oils on pancreatic digestive enzyme activities of broilers

2.4 不同油脂對(duì)肉雞腸道內(nèi)容物消化酶活性的影響

日糧中添加不同類型油脂對(duì)第21 d和第42 d肉雞腸道內(nèi)容物中胰蛋白酶、淀粉酶活性均無(wú)顯著影響(P＞0.05)，在第21 d棕櫚油、豬油組的胰蛋白酶和淀粉酶活性均比米糠毛油、大豆毛油組有不同程度的提高(P＞0.05)(表6)。在第21 d，腸道內(nèi)容物脂肪酶活性棕櫚油組顯著高于大豆毛油組(P＜0.05)，且比米糠毛油組、大豆毛油組和棕櫚油組組分別提高了 8.79%、72.01%、40.45%;在第 42 d，棕櫚油組脂肪酶活性極顯著地高于米糠毛油組(P＜0.01)，豬油比米糠毛油更能提高腸道內(nèi)容物的脂肪酶活性(P＜0.05)，此外，大豆毛油組的脂肪酶活性也低于棕櫚油組。

表6 不不同油脂對(duì)肉雞腸道內(nèi)容物消化酶活性的影響Table 6 Effects of different oils on intestinal digestive enzyme activities of broilers

3 討論

3.1 不同油脂對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

油脂作為動(dòng)物必需三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之一，是畜禽機(jī)體組織的重要組成成分，為動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育提供能源、必需脂肪酸，平衡日糧的營(yíng)養(yǎng)水平。大量研究結(jié)果表明，在日糧中添加油脂可以提高肉雞的日增重和飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)養(yǎng)分的消化與吸收，改善雞肉的品質(zhì)等［11-13］。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在試驗(yàn)前期不同油脂對(duì)肉雞平均日增重、平均體重均無(wú)顯著影響，添加米糠毛油后肉雞平均日采食量顯著低于添加豆油和棕櫚油處理;試驗(yàn)后期添加米糠毛油處理的日增重及日采食量均低于其他各處理?？赡芤?yàn)槊卓访褪苣朊追椒按鎯?chǔ)時(shí)間的影響，油脂中游離脂肪酸含量增加，且毛油中含有較多的不皂化物和糠屑等雜質(zhì)［14］，導(dǎo)致日糧的適口性差，肉雞采食量降低。王改琴等［15］的研究結(jié)果表明，氧化油脂可導(dǎo)致肉雞日增重和采食量降低，料肉比增加。但本試驗(yàn)各處理間料重比無(wú)顯著差異，主要因?yàn)橛椭南帐苤舅峤M成影響［16］，肉雞在幼齡階段腸道和消化酶系統(tǒng)未發(fā)育完全，對(duì)油脂的消化能力有限，肉雞更容易消化吸收富含不飽和脂肪酸的油脂［17-18］。本試驗(yàn)中米糠毛油不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸的比例為3.73，顯著高于豬油(1.69)和棕櫚油(1.22)，因此在飼養(yǎng)前期，添加米糠毛油處理的肉雞即使采食量低，日增重與其他組相比也無(wú)顯著差異。在飼養(yǎng)后期，米糠毛油處理的平均日增重、日采食量均低于其他處理，棕櫚油處理的日采食量最高。因?yàn)樵陲曫B(yǎng)后期，肉雞對(duì)脂肪的消化能力有所提高，又因米糠毛油的酸敗與雜質(zhì)影響了飼糧的適口性，使得米糠毛油處理的日增重及采食量低于其他各處理。Scaife等［13］也發(fā)現(xiàn)，不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸比例合理的油脂可提供較高的生產(chǎn)性能，添加豬油處理的耗料量高于添加豆油和配比油處理。本試驗(yàn)中不同油脂對(duì)肉雞的全期平均日增重、平均日采食量及料重比均無(wú)顯著影響，安文俊等［19］也發(fā)現(xiàn)飼喂大豆油、豬油及棕櫚油的肉雞全期生產(chǎn)性能無(wú)顯著變化，可能因?yàn)槿怆u對(duì)不飽和脂肪酸含量高的油脂會(huì)通過(guò)提高采食量來(lái)彌補(bǔ)日糧能量攝入的不足，各生長(zhǎng)時(shí)期肉雞對(duì)油脂消化吸收機(jī)理的差異有待進(jìn)一步研究。

3.2 不同油脂對(duì)肉雞消化器官發(fā)育的影響

動(dòng)物內(nèi)臟器官正常發(fā)育是動(dòng)物體各項(xiàng)生理功能發(fā)揮的基礎(chǔ)，其臟器系數(shù)的高低是該器官代謝是否旺盛、功能是否增強(qiáng)的反映［20］。本研究結(jié)果表明，飼養(yǎng)前期日糧中添加不同油脂未對(duì)肉雞的器官體重比產(chǎn)生明顯影響，說(shuō)明肉雞攝入不同油脂后器官均能正常發(fā)育。在飼養(yǎng)后期添加不同油脂處理間差異較為明顯，飼喂米糠毛油處理的心臟體重比高于其他處理，胰腺指數(shù)也顯著高于豬油和棕櫚油處理。肝臟是家禽最重要的脂肪代謝器官之一，95%以上的脂肪合成在肝臟中進(jìn)行［21］。與米糠毛油和大豆毛油相比，豬油和棕櫚油含有較多的不飽和脂肪酸，而飽和脂肪酸在家禽消化道中的消化和吸收率不如短鏈和不飽和的脂肪酸［22］。消化過(guò)程中，日糧中的脂肪以乳糜微粒從消化道運(yùn)輸至血液，乳糜微粒在血液中經(jīng)脂蛋白脂酶(LPL)水解后在脂肪組織沉積，未經(jīng)LPL水解的乳糜微粒返回肝臟，通過(guò)肝臟中特殊脂蛋白受體接受后重新在肝臟沉積，提高肝臟的質(zhì)量［23］。Botham 等［24］研究發(fā)現(xiàn)，富含 n-3(魚(yú)肝油)、n-6(玉米油)的多不飽和脂肪酸通過(guò)降低肝極低密度脂蛋白(VLDL)合成、組裝和分泌，誘使小鼠肝脂肪變性，使肝臟質(zhì)量上升。因此本試驗(yàn)中肝臟質(zhì)量的增加也可能與VLDL存在一定關(guān)系。家禽消化系統(tǒng)中淀粉酶、蛋白質(zhì)水解酶、脂肪水解酶等主要由胰腺合成，胰腺質(zhì)量的下降可能會(huì)導(dǎo)致消化酶分泌量不足，消化能力下降［25］。本研究中發(fā)現(xiàn)米糠毛油對(duì)42 d肉雞的胰腺指數(shù)有明顯影響，添加米糠毛油處理的胰腺指數(shù)顯著高于豬油和棕櫚油處理，表明油脂中不飽和脂肪酸與飽和脂肪酸的比例適宜有利于胰腺的發(fā)育［26］。而腺胃通過(guò)分泌鹽酸，激活胃蛋白酶和輔助消化，對(duì)飼料蛋白質(zhì)的消化起著至關(guān)重要的作用。本試驗(yàn)中添加豬油處理的腺胃指數(shù)顯著高于米糠毛油處理，可能是由于采食量的增加，食糜中蛋白質(zhì)、礦物鹽類物質(zhì)絕對(duì)量增加，刺激了腺胃液的分泌，促進(jìn)了器官的生長(zhǎng)發(fā)育［27］。

3.3 不同油脂對(duì)肉雞消化酶活性的影響

消化三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的水解淀粉酶、脂肪酶和蛋白質(zhì)酶，是肉雞的重要消化酶，其活性直接影響肉雞的生產(chǎn)性能［28］。在本試驗(yàn)前期，飼喂豬油、棕櫚油后肉雞胰腺淀粉酶、脂肪酶的活性均低于飼喂米糠毛油或大豆毛油的處理，而腸道內(nèi)容物消化酶活性則高于飼喂米糠毛油或大豆毛油的處理。胰腺是動(dòng)物體中一個(gè)較大的消化腺，分泌的胰液中含有大量消化酶。Hara等［29］研究發(fā)現(xiàn)，腸黏膜上消化酶活性對(duì)胰液、膽汁分泌具有負(fù)反饋的效應(yīng)。艾曉杰等［30］也發(fā)現(xiàn)食糜中淀粉酶的作用效果提高，胰腺中淀粉酶的產(chǎn)生會(huì)因反饋?zhàn)饔枚鴾p少。這解釋了本試驗(yàn)中胰腺和腸道內(nèi)容物中消化酶活性相反的現(xiàn)象。但是，胰腺合成的各種消化酶只有分泌到消化道內(nèi)，并以激活狀態(tài)存在才對(duì)畜禽的養(yǎng)分消化具有實(shí)際意義［6］，因此，消化道內(nèi)酶活性水平能夠真正反映畜禽消化道酶活隨日齡的發(fā)育情況［27］。Corring等［31］認(rèn)為，日糧中養(yǎng)分類型和含量的微小改變都會(huì)引起各種消化酶的適應(yīng)性變化。本試驗(yàn)中，飼養(yǎng)前期肉雞攝入棕櫚油后腸道內(nèi)容物脂肪酶活性顯著高于飼喂大豆毛油的處理，后期顯著高于飼喂米糠毛油及大豆毛油的處理，提示脂肪酶活性受日糧中脂肪含量和類型的影響。Krogdalh等［6］發(fā)現(xiàn)，飼喂脂肪含量為12%的日糧后，21～42日齡火雞小腸內(nèi)容物中脂肪酶活性提高了5倍。本試驗(yàn)中豬油和棕櫚油因飽和脂肪酸比例明顯高于米糠油及大豆油，機(jī)體為了提高飽和油脂的消化率，腸道黏膜細(xì)胞會(huì)促進(jìn)脂肪酶的合成及增加活性，提高油脂消化吸收率。另外，腸道蛋白酶和淀粉酶活性的增強(qiáng)，能夠促進(jìn)組織對(duì)飼糧中蛋白質(zhì)和糖類的消化吸收，而腸道內(nèi)容物中消化酶的活性反映了酶分泌與酶降解的動(dòng)態(tài)平衡，酶活性的增加主要與酶分泌增多或酶降解減少有關(guān)［27］。胰蛋白酶是消化蛋白質(zhì)的主要酶之一，在消化中起著關(guān)鍵作用，可直接影響蛋白質(zhì)在小腸內(nèi)的消化;淀粉酶在碳水化合物的水解過(guò)程中起重要作用，家禽對(duì)飼糧中碳水化合物的表觀消化率主要取決于淀粉酶。本試驗(yàn)中各處理間胰蛋白酶、淀粉酶的活性無(wú)顯著差異，說(shuō)明日糧中添加不同油脂對(duì)日糧的蛋白質(zhì)及碳水化合物的消化吸收影響不明顯。

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