劉海紅

枸櫞酸西地那非是治療陰莖勃起功能障礙(ED)的口服藥,也叫萬(wàn)艾可,中文簡(jiǎn)稱“偉哥”。它是西地那非的枸櫞酸鹽,一種對(duì)環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)特異的5型磷酸二酯酶(PDE5)選擇性抑制劑。本研究提供一種載藥量大,快速釋藥,快速顯效,生物利用度高,毒副作用小,使用方便、價(jià)格低廉的枸櫞酸西地那非滴丸制劑,比較枸櫞酸西地那非滴丸與枸櫞酸西地那非片劑體外溶出度的差別。

1 材料與方法

1.1 儀器 ZRS-8G型智能溶出試驗(yàn)儀(天津大學(xué)無(wú)線電廠)；島津LC-10ATvp高效液相色譜儀(日本Shimadzu公司)；島津LC-10 Avp紫外檢測(cè)器,島津CLASS-VP色譜工作站；CP124S電子分析天平(SARTORIUS,德國(guó))；色譜柱為奧泰Alltima ODS 柱(5 μm,250×4.6 mm)。

1.2 試藥 枸櫞酸西地那非對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)100624-200401)；枸櫞酸西地那非滴丸(規(guī)格：50 mg,自制)；枸櫞酸西地那非片(規(guī)格：50 mg,美國(guó)輝瑞公司,批號(hào)：88080025)；甲醇(色譜純)山東禹王實(shí)業(yè)有限公司化工分公司；水(娃哈哈純凈水)杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司；磷酸(分析純)北京化工廠；三乙胺(分析純)北京化學(xué)試劑公司；乙腈(色譜純)山東禹王實(shí)業(yè)有限公司化工分公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 枸櫞酸西地那非含量測(cè)定方法的建立

2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)選擇 精密稱取105℃干燥至恒重的枸櫞酸西地那非對(duì)照品適量(約5.05 mg)于100 ml量瓶中,用0.01 M鹽酸稀釋至刻度。以0.01 M鹽酸為空白,參照2005年版藥典及相關(guān)文獻(xiàn),在200~800 nm范圍內(nèi)掃描,結(jié)果在292 nm的波長(zhǎng)處有最大吸收峰,輔料在該波長(zhǎng)處幾乎無(wú)吸收,故選292 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。

2.1.2 線性關(guān)系考察 精密量取濃度為0.998 mg/ml的枸櫞酸西地那非對(duì)照品溶液適量,用流動(dòng)相依次稀釋成濃度分別為9.98、49.9、99.8、199.6、499.0 μg/ml的一系列溶液。各精密量取20 μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖,測(cè)定峰面積。以峰面積值(A)對(duì)濃度(C)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程,A=49970C+25.818,r=1,并以峰面積值A(chǔ)對(duì)濃度C作圖,得一直線。以上結(jié)果表明,在9.98~499.0 μg/ml范圍內(nèi),進(jìn)樣濃度與峰面積值有良好的線性關(guān)系。

2.1.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取經(jīng)微孔膜過(guò)濾的枸櫞酸西地那非滴丸樣品溶液與枸櫞酸西地那非片樣品溶液,分別在0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h進(jìn)樣20 μl,記錄色譜峰面積,結(jié)果枸櫞酸西地那非滴丸樣品溶液與枸櫞酸西地那非片樣品溶液中枸櫞酸西地那非的峰面積RSD均小于2%,說(shuō)明供試樣品在12 h之內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.1.4 精密度試驗(yàn) 取同一批枸櫞酸西地那非對(duì)照品6份,配制成同濃度枸櫞酸西地那非溶液,依次注入液相色譜儀,每次20 μl,記錄主峰峰面積,測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度,以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示,結(jié)果RSD為0.32%,符合要求。

2.1.5 重復(fù)性試驗(yàn) 精密稱取經(jīng)碾碎、混勻的枸櫞酸西地那非滴丸細(xì)粉適量,依法用流動(dòng)相配置成相當(dāng)于100%濃度水平的供試品溶液六份,分別測(cè)定并記錄主峰峰面積,計(jì)算含量測(cè)定方法的精密度,結(jié)果表明本法用于含量測(cè)定的精密度較好,符合測(cè)定要求。

2.1.6 含量測(cè)定 隨機(jī)取枸櫞酸西地那非滴丸及片劑各20丸(粒),精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于枸櫞酸西地那非50 mg),分別置于100 ml量瓶中,加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),精密量取上述兩種續(xù)濾液各20 μl注入液相色譜儀,記錄色譜圖,以枸櫞酸西地那非對(duì)照品溶液為對(duì)照,按照峰面積計(jì)算制劑中枸櫞酸西地那非的含量。

2.2 溶出度測(cè)定 綜合以上結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)按照溶出度測(cè)定法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄XC,第一法),在智能溶出儀溶出杯內(nèi)各加0.01 M鹽酸溶液900 ml作為溶出介質(zhì),水浴加熱至(37±0.5)℃,設(shè)置轉(zhuǎn)速為100 r/min,于每個(gè)轉(zhuǎn)籃中放入1粒枸櫞酸西地那非滴丸(或枸櫞酸西地那非片,用金屬線輕繞后投入溶出杯中 ),分別于 2、5、8、10、15、30、60 min,按籃法取樣5 ml濾過(guò),取續(xù)濾液2 ml,用流動(dòng)相稀釋至10 ml,定容,作為供試液,每取5 ml溶液,馬上補(bǔ)充溶出介質(zhì)5 ml,另取枸櫞酸西地那非對(duì)照品適量,精密稱定,用0.01 M鹽酸溶解并稀釋成每1 ml約含西地那非22 g的溶液,作為對(duì)照品溶液,照含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定,計(jì)算在不同時(shí)間點(diǎn)的溶出量。

3 討論

在相同實(shí)驗(yàn)條件下,枸櫞酸西地那非滴丸與片劑釋藥規(guī)律基本一致,可確保臨床給藥的安全、有效。且枸櫞酸西地那非滴丸比片劑溶出情況更好,充分體現(xiàn)了滴丸劑速釋的優(yōu)點(diǎn),更符合該藥臨床用藥的要求。