薛雅蓉，劉常宏

（南京大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 南京 210093）

細(xì)胞是組成幾乎所有生命有機(jī)體（除了病毒）的基本功能單位，要研究生物則避不開細(xì)胞。因此，與細(xì)胞相關(guān)的研究一直是生命科學(xué)領(lǐng)域的熱門課題，也是諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)青睞的研究領(lǐng)域，僅本世紀(jì)開始的12年時(shí)間里，就有5年頒發(fā)給了細(xì)胞生物學(xué)研究領(lǐng)域的相關(guān)學(xué)者。這些研究包括：2002年悉尼·布雷內(nèi)（Sydney Brenner）、羅伯特·霍維茨（H.Robert Horvitz）和約翰·蘇爾斯頓（John E.Sulston）的細(xì)胞程序性死亡相關(guān)研究；2006年克雷格·梅洛（Craig C.Mello）和安德魯·菲爾（Andrew Fire）的RNA干擾；2009年伊麗莎白 H.布萊克本（Elizabeth H.Blackburn）、卡羅爾 W.葛萊德爾（Carol W.Greider）和杰克 W.卓斯塔克（Jack W.Szostak）的端粒及端粒酶相關(guān)研究；2011年基斯·波特（Keith Porter）電子顯微鏡的應(yīng)用及超薄切片機(jī)的發(fā)明；2012年山中伸彌（Shinya Yamanaka）關(guān)于誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞（iPScell）的研究。

由于細(xì)胞研究的重要性，開設(shè)有生物相關(guān)學(xué)科（生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、農(nóng)學(xué)等）的各個(gè)高校對(duì)于細(xì)胞生物學(xué)理論及實(shí)驗(yàn)課程都很重視，一般作為本科生的核心必修課程，這也決定了該課程在培養(yǎng)生命科學(xué)人才中的重要作用。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程不但要培養(yǎng)學(xué)生掌握獨(dú)特的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法、原理與技術(shù)，還要在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中提高學(xué)生的細(xì)胞生物學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)素質(zhì)與創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?zāi)芰ΑＲ瓿蛇@樣艱巨的任務(wù)，實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中不但應(yīng)根據(jù)學(xué)科發(fā)展對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容不斷地進(jìn)行更新，還應(yīng)不斷探索和改進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法。

1 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法現(xiàn)狀及存在問(wèn)題

1.1 常規(guī)教學(xué)的作用及問(wèn)題

截至目前，細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法主要為常規(guī)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法，即由教師提供經(jīng)前人反復(fù)驗(yàn)證、方法可行、結(jié)果可靠的實(shí)驗(yàn)方法，并在實(shí)驗(yàn)前詳細(xì)講解實(shí)驗(yàn)背景知識(shí)、用途、原理、操作關(guān)鍵點(diǎn)及意義、注意事項(xiàng)等。學(xué)生被要求完全按照教師的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，然后教師根據(jù)學(xué)生實(shí)驗(yàn)結(jié)果及報(bào)告等評(píng)價(jià)、考核學(xué)生［1－2］。

常規(guī)教學(xué)的作用是：

（1）在每次3～4h的教學(xué)時(shí)間段內(nèi)能夠完成實(shí)驗(yàn)且得到符合預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

（2）能夠規(guī)范學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的實(shí)驗(yàn)態(tài)度。由于學(xué)生必須按照教師的方法及操作完成實(shí)驗(yàn)才能得到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，就使其認(rèn)識(shí)到，實(shí)驗(yàn)是嚴(yán)肅認(rèn)真的事情，不能馬虎大意，否則就有可能得不到預(yù)期結(jié)果。

（3）樹立學(xué)生實(shí)驗(yàn)信心。學(xué)生只要按實(shí)驗(yàn)步驟正常操作就會(huì)得到預(yù)期結(jié)果，會(huì)給學(xué)生樹立起前人能做的自己也可以做的實(shí)驗(yàn)信心。

但常規(guī)教學(xué)也有一些不可避免的弊端。由于學(xué)生實(shí)驗(yàn)時(shí)動(dòng)手多而動(dòng)腦少，必然養(yǎng)成依賴于已有方法的習(xí)慣，導(dǎo)致學(xué)生自主學(xué)習(xí)積極性下降甚至喪失，懶于思考，繼而思維僵化，嚴(yán)重時(shí)可能扼殺學(xué)生的批判性及創(chuàng)造性思維能力。

1.2 開放設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的意義及實(shí)施的困難

為了彌補(bǔ)常規(guī)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的不足，一些高校的實(shí)驗(yàn)課教師探索在教學(xué)實(shí)踐中增加開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)［3－6］。一般由教師指定選題范圍，然后讓學(xué)生選題并設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法，最后在開放實(shí)驗(yàn)室于正常教學(xué)時(shí)間之外實(shí)施設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)［3，5，7］。開放設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目一般具有4個(gè)特征［8］：學(xué)生學(xué)習(xí)的自主性，實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的探索性，實(shí)驗(yàn)技能的綜合性，實(shí)驗(yàn)精神的創(chuàng)造性。因此，開展此類實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蚩朔Ｒ?guī)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的一些弊端，調(diào)動(dòng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)積極性、提高學(xué)生自主學(xué)習(xí)及運(yùn)用所學(xué)知識(shí)分析解決實(shí)驗(yàn)問(wèn)題的能力及實(shí)驗(yàn)綜合素質(zhì)與創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Α?/p>

然而，完全的開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)往往存在實(shí)施困難的問(wèn)題［9］。原因主要有3條：

（1）實(shí)驗(yàn)硬件條件的限制。不同方法要求的實(shí)驗(yàn)條件不同，沒有哪個(gè)實(shí)驗(yàn)室具備開展所有方法實(shí)驗(yàn)的條件。比如，細(xì)胞融合的方法有電融合法、病毒介導(dǎo)法、PEG介導(dǎo)法。電融合法需要電融合儀，病毒介導(dǎo)法需要繁殖仙臺(tái)病毒，不是每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都可以開展這樣的工作。再比如，檢測(cè)細(xì)胞增殖能力可用氚標(biāo)記的胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）摻入法，也可用 MTT比色法。前一方法用到同位素，國(guó)內(nèi)大部分教學(xué)實(shí)驗(yàn)室都不具備開展此類實(shí)驗(yàn)的條件。因此，如果讓學(xué)生隨意設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法，有些方法就有可能無(wú)法實(shí)施。

（2）實(shí)驗(yàn)時(shí)間的限制。不同方法實(shí)施起來(lái)可能需要的時(shí)間差別很大。如果學(xué)生設(shè)計(jì)的一些方法需要時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，超出正常教學(xué)安排太多，就無(wú)法在正常教學(xué)有限時(shí)間內(nèi)進(jìn)行。比如，如果讓學(xué)生設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，有的學(xué)生會(huì)設(shè)計(jì)植物細(xì)胞原生質(zhì)體的分離與培養(yǎng)，那么，由于原生質(zhì)體制備時(shí)酶解需要時(shí)間較長(zhǎng)，就難以在正常實(shí)驗(yàn)時(shí)間開設(shè)。

（3）實(shí)驗(yàn)教學(xué)成本預(yù)算的限制。不同實(shí)驗(yàn)方法成本差別很大，對(duì)于一些嚴(yán)重超出額定預(yù)算的方法，就難以開展。

因此，需要尋找一種兼顧教學(xué)效果和可行性的實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法。這種方法既能在一定程度上實(shí)現(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)效果，又便于在正常教學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)間實(shí)施且結(jié)果和成本可控。為此，我們提出了“半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)”的概念。下文中，我們將對(duì)半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的內(nèi)涵、實(shí)施方法、開展時(shí)機(jī)等進(jìn)行論述，并通過(guò)2個(gè)細(xì)胞生物學(xué)“半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)”教學(xué)實(shí)例及學(xué)生評(píng)價(jià)進(jìn)一步說(shuō)明該法的具體實(shí)施方法及優(yōu)勢(shì)。

2 半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的內(nèi)涵、實(shí)施方法及實(shí)施時(shí)機(jī)

2.1 半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的內(nèi)涵

“半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)”指讓學(xué)生在指定的方法內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)化設(shè)計(jì)，并能夠在正常實(shí)驗(yàn)教學(xué)的限定時(shí)間內(nèi)實(shí)施的實(shí)驗(yàn)。由于它無(wú)論在內(nèi)容選擇方面還是在實(shí)施時(shí)間方面都有限制，不及一般開放設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的開放程度，因此，我們將其稱為半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。

2.2 半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)實(shí)施方法

實(shí)驗(yàn)前2～3周，教師布置半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容及設(shè)計(jì)要求、實(shí)施時(shí)間及考核方法，建議學(xué)生自由組合成4人小組，以組為單位進(jìn)行資料查閱與分析、實(shí)驗(yàn)方案討論與確定、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及實(shí)施。實(shí)驗(yàn)前1周，學(xué)生應(yīng)以組為單位開出實(shí)驗(yàn)需要的儀器設(shè)備及試劑清單；實(shí)驗(yàn)時(shí)學(xué)生分工合作，完成所有設(shè)計(jì)內(nèi)容；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，同組學(xué)生共享實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并經(jīng)過(guò)分析和討論提出實(shí)驗(yàn)結(jié)論，匯總實(shí)驗(yàn)報(bào)告。教師通過(guò)批閱學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告對(duì)學(xué)生設(shè)計(jì)的合理性及實(shí)驗(yàn)分析進(jìn)行點(diǎn)評(píng)指導(dǎo)。

2.3 半開放設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的開展時(shí)機(jī)

半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目最好安排在學(xué)期后期，在學(xué)生做過(guò)一些精心挑選的細(xì)胞生物學(xué)代表性、經(jīng)典性實(shí)驗(yàn)，掌握了基本的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法原理和技術(shù)，并對(duì)理論課內(nèi)容有很好的理解后進(jìn)行。這樣學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方法時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)的難度及可行性會(huì)有一個(gè)比較切合實(shí)際的評(píng)估，并且對(duì)實(shí)驗(yàn)實(shí)施需要時(shí)間也會(huì)有一個(gè)較好的掌控。

3 細(xì)胞生物學(xué)半開放設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)實(shí)例

3.1 PEG介導(dǎo)的細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞融合（cell fusion）又稱為細(xì)胞雜交（cell hybridization），是指2個(gè)或2個(gè)以上的細(xì)胞合并成一個(gè)細(xì)胞的現(xiàn)象。通過(guò)細(xì)胞融合可以將2個(gè)親本細(xì)胞的遺傳物質(zhì)集中在一個(gè)后代細(xì)胞里，有可能使后代細(xì)胞獲得2個(gè)親本細(xì)胞的優(yōu)良性狀。如單克隆抗體生產(chǎn)中通過(guò)細(xì)胞融合獲得的雜交瘤細(xì)胞，就同時(shí)兼?zhèn)湫∈蟪墒霣細(xì)胞能夠分泌特定抗體的特性和小鼠骨髓瘤細(xì)胞能夠在體外長(zhǎng)期存活的特性。直至目前，細(xì)胞融合技術(shù)在細(xì)胞工程領(lǐng)域仍然發(fā)揮著重要作用，除了用于研制生產(chǎn)單克隆抗體外，還用于培育植物新品種，誘導(dǎo)不同種間、屬間，甚至科間原生質(zhì)體的融合。細(xì)胞融合有可能打破有性雜交不親和性的界限，廣泛地組合各種基因型，從而形成有性雜交方法所無(wú)法獲得的新型雜種植株。

細(xì)胞發(fā)生自然融合（骨骼肌細(xì)胞形成、精卵結(jié)合）的機(jī)會(huì)很少，一般需要在特殊誘導(dǎo)條件存在時(shí)才會(huì)發(fā)生融合。其中一種最為常用的方法就是PEG介導(dǎo)的化學(xué)融合法。

PEG即聚乙二醇（polythyleneglycol，PEG），為乙二醇不同分子量的聚合物，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞和植物原生質(zhì)體融合。用PEG介導(dǎo)融合相對(duì)于電融合和病毒介導(dǎo)融合的優(yōu)點(diǎn)是材料易得而價(jià)廉、操作簡(jiǎn)單、效果可靠［10－11］。但是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，PEG介導(dǎo)細(xì)胞融合的效果常常不如預(yù)期，不是融合率太低，就是細(xì)胞破壞（凋亡、壞死、甚至脫核）嚴(yán)重。文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞種類、用于融合的細(xì)胞所處狀態(tài)、PEG的分子量、融合液中PEG的濃度、是否添加鈣離子、PEG作用于細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)短以及去除PEG作用后細(xì)胞溫育時(shí)間長(zhǎng)短，都對(duì)最后的觀察結(jié)果有影響。

為了讓學(xué)生了解PEG介導(dǎo)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)的復(fù)雜性，我們將該實(shí)驗(yàn)作為半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生在限定條件下對(duì)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行優(yōu)化。首先，教師提供給學(xué)生足夠的特定細(xì)胞材料（雞紅細(xì)胞或小鼠腹水瘤細(xì)胞）、不同分子量的PEG以及一個(gè)常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法，要求學(xué)生通過(guò)查閱、分析資料，了解影響融合效率的其他因素及條件，設(shè)計(jì)優(yōu)化方案并通過(guò)在正常教學(xué)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)找到組內(nèi)相對(duì)理想的實(shí)驗(yàn)方法。

經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)，學(xué)生了解到：

（1）不同分子量的PEG溶液在相同濃度時(shí)黏度不同，對(duì)細(xì)胞的作用也不同；

（2）PEG濃度過(guò)小不能有效介導(dǎo)細(xì)胞融合；

（3）PEG作用時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞破壞越嚴(yán)重；

（4）將PEG加在細(xì)胞懸液中融合效果極差，必須加在離心去掉上清的細(xì)胞沉淀中；

（5）鈣離子有促融合作用，但應(yīng)注意使用濃度與添加方法（避免沉淀產(chǎn)生）；

（6）文獻(xiàn)資料并非都正確，不能照搬于實(shí)驗(yàn)，要多方印證，甄別應(yīng)用。比如：學(xué)生通過(guò)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，鈣離子有促融合作用，但在具體實(shí)驗(yàn)時(shí)卻發(fā)現(xiàn)，多個(gè)參考書提供的鈣離子濃度都太大，其溶液無(wú)法配制；懷疑單位有誤，后經(jīng)查閱多篇發(fā)表的科研論文求證，證明其確系單位錯(cuò)誤。再比如，一些細(xì)胞實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中融合實(shí)驗(yàn)是將PEG加在細(xì)胞懸液中，但經(jīng)證實(shí)效果極差，幾乎得不到融合的細(xì)胞。

3.2 MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)

MTT即二甲基噻唑二苯基四唑溴鹽。MTT法是Mosmen于1983年率先建立的一種用線粒體酶活性反映細(xì)胞增殖與活力的方法。由于其與通過(guò)細(xì)胞DNA合成反映細(xì)胞增殖活性的3H－TdR摻入法相比，具有無(wú)放射危險(xiǎn)、操作簡(jiǎn)便而快速的優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科的研究以及臨床腫瘤細(xì)胞的藥敏實(shí)驗(yàn)。

MTT法的檢測(cè)原理是：MTT能被各種活細(xì)胞（除紅細(xì)胞外）攝取，在線粒體內(nèi)被脫氫酶還原，由黃色可溶性溶液轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘淖仙着H（formazan）顆粒沉積在細(xì)胞內(nèi)；甲臜的形成量與活細(xì)胞數(shù)量及活性成正比，死細(xì)胞不形成甲臜。再用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞并溶解甲臜后，于波長(zhǎng)550～600nm（甲臜有光吸收而MTT無(wú)光吸收）測(cè)定溶液的吸光值，用以反映細(xì)胞的增殖與活力。也就是說(shuō)，對(duì)于同樣活力的細(xì)胞，活細(xì)胞的數(shù)量越多，測(cè)定的可溶性甲臜的吸光值越大，吸光值與細(xì)胞數(shù)量成正比。反過(guò)來(lái)講，只有吸光值與活細(xì)胞數(shù)量成正比，才能用吸光值變化反映細(xì)胞的增殖活性變化。然而，可溶性甲臜的吸光值并非在任何細(xì)胞濃度都與細(xì)胞數(shù)量成正比。對(duì)于特定細(xì)胞而言，只有在一定濃度范圍內(nèi)時(shí)，甲臜溶液的吸光值大小才與細(xì)胞數(shù)量成正比，影響細(xì)胞增殖（促進(jìn)或抑制）的因素才會(huì)引起吸光值的靈敏變化，不同處理的作用才得以有效顯示；若細(xì)胞濃度偏離線性檢測(cè)范圍，測(cè)定結(jié)果就很不規(guī)律，不能反映被檢因素的實(shí)際效果。另外，裂解液組成、作用條件與時(shí)間等多種因素都會(huì)影響甲臜溶液的吸光值測(cè)定結(jié)果［12－14］，如果應(yīng)用不當(dāng)，則會(huì)造成細(xì)胞裂解不完全、甲臜溶解不充分而致測(cè)定值偏小或不穩(wěn)定（隨時(shí)間變化）。

為了讓學(xué)生充分了解影響MTT法檢測(cè)效果的因素，我們也將該實(shí)驗(yàn)作為半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。提供給學(xué)生小鼠腹腔內(nèi)大量繁殖的S－180細(xì)胞（每30人的班只需提供2只接瘤1周的荷瘤小鼠），讓學(xué)生從細(xì)胞濃度、裂解液及作用條件等方面進(jìn)行設(shè)計(jì)，找出MTT檢測(cè)值與細(xì)胞濃度呈線性關(guān)系的細(xì)胞濃度范圍以及能夠在正常實(shí)驗(yàn)課時(shí)間充分裂解細(xì)胞、溶解甲臜（可用倒置顯微鏡監(jiān)測(cè)溶解情況）的裂解液及對(duì)應(yīng)裂解條件。

經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)，學(xué)生不僅對(duì)上述影響MTT法測(cè)定結(jié)果的因素有了充分的認(rèn)識(shí)，還了解到細(xì)胞計(jì)數(shù)及稀釋準(zhǔn)確性、向96孔反應(yīng)板加細(xì)胞前細(xì)胞樣品是否充分混勻、操作時(shí)是否產(chǎn)生氣泡等對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。

4 學(xué)生對(duì)于半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)

學(xué)期末，我們要求學(xué)生寫一份“細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)總結(jié)、評(píng)價(jià)與建議”，一方面是為了加強(qiáng)學(xué)生對(duì)本門實(shí)驗(yàn)課所學(xué)內(nèi)容的掌握，另一方面是希望了解學(xué)生對(duì)該課程本學(xué)期教學(xué)相關(guān)情況的評(píng)價(jià)以及對(duì)今后教學(xué)的改進(jìn)建議?？偨Y(jié)內(nèi)容應(yīng)包括實(shí)驗(yàn)過(guò)的項(xiàng)目?jī)?nèi)容、本人從中學(xué)習(xí)到的知識(shí)及技能、獲得的經(jīng)驗(yàn)及教訓(xùn)等。評(píng)價(jià)及建議主要考慮3個(gè)方面：教學(xué)內(nèi)容及安排，教學(xué)方法，實(shí)驗(yàn)室硬件條件。

從學(xué)生總結(jié)中了解到，半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)受到學(xué)生的普遍歡迎，他們對(duì)于該類實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)是：能夠調(diào)動(dòng)自主學(xué)習(xí)積極性；從某種程度上模擬了科研實(shí)驗(yàn)的過(guò)程，能夠培養(yǎng)科學(xué)思維能力及創(chuàng)新意識(shí)；能夠提高利用所學(xué)知識(shí)及網(wǎng)絡(luò)資源分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力；能夠強(qiáng)化團(tuán)隊(duì)協(xié)作意識(shí)。因此，學(xué)生建議在以后教學(xué)中增加這類實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的比例。

5 結(jié)束語(yǔ)

半開放設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)可通過(guò)學(xué)生對(duì)已有方法的改進(jìn)與靈活運(yùn)用激發(fā)學(xué)生自主學(xué)習(xí)積極性、提高其實(shí)驗(yàn)綜合素質(zhì)、培養(yǎng)其批判性思維習(xí)慣，繼而提高其創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)?zāi)芰ΑＯ鄬?duì)于開放設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)還具有便于實(shí)施、實(shí)驗(yàn)結(jié)果和實(shí)驗(yàn)成本可控、適宜于正常教學(xué)時(shí)間開展的優(yōu)勢(shì)，值得在細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)及其他實(shí)驗(yàn)課教學(xué)中推廣。

（References）

［1］王春玲，孫爾康.大學(xué)化學(xué)實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力的探索［J］.實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理，2011，28（10）：27－30.

［2］陳玉霞，林峰，陳文，等.激發(fā)學(xué)生主體性，提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量［J］.實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理，2011，28（7）：147－150.

［3］聞俊，郭凱欣，蘇玉懷，等.創(chuàng)新型設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的設(shè)置與實(shí)施探索［J］.藥物服務(wù)與研究，2011，11（6）：466－468.

［4］朱秋華，王素芳，陳永富，等.自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法在《生物制藥實(shí)驗(yàn)》中的實(shí)踐［J］.高校實(shí)驗(yàn)室工作研究，2011（3）：3－6.

［5］曹瑰華，席美云.化學(xué)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容和方法的探索與實(shí)踐［J］.高等理科教育，2005（6）：27－29.

［6］張紅梅，孫設(shè)宗，趙杰，等.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生科研能力培養(yǎng)的措施研究［J］.高等理科教育，2012（1）：133，162.

［7］董玉瑋，陳宏偉，曹澤虹，等.生物化學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合實(shí)驗(yàn)、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)有機(jī)結(jié)合的探討［J］.科技資訊，2010（21）：187－188.

［8］何昆.對(duì)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的思考［J］.武警學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27（11）：72－74.

［9］孔祥平，王娟，呂海濤.開放式分析化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式研究［J］.實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理.2011，28（7）：164－166，179.

［10］李玟.細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)方法的改進(jìn)［J］.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，18（3）：183－184.

［11］霍乃蕊，孟利梅.細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2005，26（3）：32－35.

［12］薛慶善.體外培養(yǎng)的原理與技術(shù)［M］.北京：科學(xué)出版社，2001.

［13］Werner Luttmann，Kai Bratke，Michael Kupper.實(shí)驗(yàn)者系列：免疫學(xué)［M］.沈倍奮，譯.北京：科學(xué)出版社，2007.

［14］謝異泓，馬紅.測(cè)定重組人粒細(xì)胞集落刺激因子生物學(xué)活性的MTT 比色法［J］.中國(guó)免疫學(xué)雜志，1997，13（4）：225－227.