蘇曉悅 李樹(shù)學(xué) 田 明 王 紅 韓 亞 孫世曉
(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)·哈爾濱 150040)
延胡索作為中藥材在臨床治療疾病已有悠久歷史,早在南北朝時(shí)期即用延胡索治療心痛諸證,《雷公炮炙論》云:“心痛欲死,速覓延胡”[1]。目前已有實(shí)驗(yàn)表明[2、3、4、5、6],延胡索具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈,增加冠脈血流量和抗心肌缺血等作用,但高純度延胡索總生物堿影響急性心肌缺血心功能下降的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究目的是觀察延胡索總生物堿對(duì)Iso誘導(dǎo)急性心肌缺血大鼠心功能下降的影響,并為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1.1 材料 動(dòng)物:體重220±20克的成年wistar大鼠50只(雌雄各半)購(gòu)于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK黑2008-004。儀器:泰盟公司生產(chǎn)BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。藥品:延胡索總生物堿,由本實(shí)驗(yàn)室自己提取。原料藥材提取主要采用常溫酸水滲漉法,并結(jié)合強(qiáng)陽(yáng)離子交換樹(shù)脂技術(shù),再通過(guò)洗脫、醋酸化等步驟,獲得延胡索總生物堿醋酸鹽,經(jīng)光譜比色法檢測(cè),計(jì)算其純度達(dá)到60%,用蒸餾水配成相應(yīng)濃度,并放置在冰箱低溫保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 方法
1.2.1 分組:將大鼠隨機(jī)分成正常組、模型組、延胡索總生物堿高劑量(2.0mg/kg)組、總生物堿中劑量(1.0mg/kg)組、總生物堿低劑量(0.5mg/kg)組,每組10只。正常組、模型組灌飼等容量蒸餾水,正常組不給予Iso。
1.2.2 造模:取大鼠,首先灌飼相應(yīng)劑量的延胡索總生物堿,30min后腹腔注射50mg/kg Iso鹽溶液,第2天灌飼相應(yīng)劑量延胡索總生物堿后再次間隔30min腹腔注射50mg/kg Iso鹽溶液,第3天處理過(guò)程同第2天,第4天灌飼相應(yīng)劑量延胡索總生物堿并腹腔注射Iso鹽溶液后,再經(jīng)腹腔注射20%氨基甲酸乙酯5ml/kg麻醉大鼠,將大鼠固定在鼠臺(tái)上,無(wú)菌手術(shù)分離左側(cè)頸總動(dòng)脈,將消毒的內(nèi)徑為0.5mm聚乙烯心導(dǎo)管插入左心室并結(jié)扎固定,聚乙烯心導(dǎo)管預(yù)先充滿1%肝素鈉溶液。開(kāi)啟BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)記錄左心室內(nèi)壓動(dòng)態(tài)曲線。左心室內(nèi)壓曲線可直觀反映左心室的泵血功能,并經(jīng)計(jì)算機(jī)處理能分析左心室收縮壓(LVSP)、左心室終末舒張壓(LVEDP)、左心室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)、左心室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dtmax)等指標(biāo)。
1.2.3 統(tǒng)計(jì)方法:所有數(shù)據(jù)用SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,并進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。
2.1 各組記錄的心功能曲線
各實(shí)驗(yàn)組均能記錄到穩(wěn)定的左心室內(nèi)壓曲線,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,Iso致大鼠心肌缺血后,各組心功能曲線均可出現(xiàn)明顯改變,延胡索總生物堿高劑量組、總生物堿中劑量組的心功能曲線表明具有緩解Iso導(dǎo)致的大鼠心功能下降的趨勢(shì),結(jié)果見(jiàn)圖一。
圖1 正常組、模型組、低劑量組、中劑量組、高劑量組的左心室內(nèi)壓曲線
2.2 延胡索總生物堿對(duì)LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax的影響
左心室內(nèi)壓曲線經(jīng)計(jì)算機(jī)處理能分析LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax等多項(xiàng)指標(biāo),本實(shí)驗(yàn)僅統(tǒng)計(jì)了 LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax四項(xiàng)指標(biāo),發(fā)現(xiàn)Iso致大鼠心肌缺血后,LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax四項(xiàng)指標(biāo)可見(jiàn)明顯改變,延胡索總生物堿高劑量組、總生物堿中劑量組的LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax與模型組比較具有顯著性差異,結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 各組大鼠LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax變化的比較( ,n﹦10)
目前對(duì)延胡索進(jìn)行分離已從中得到9個(gè)化合物,分別為四氫非洲防己堿、降氧化北美黃連次堿、corunine、脫氫延胡索堿、dehydrocorybulbine、非洲防己堿、黃連堿、巴馬汀和小檗堿,延胡索對(duì)心臟的藥理作用主要體現(xiàn)在對(duì)心率、心肌收縮力、冠脈血流量和鈣離子等幾個(gè)方面的影響,研究表明延胡索總生物堿對(duì)離體兔心臟具有減慢心率的趨勢(shì),對(duì)豚鼠隨劑量加大其減慢心率作用增強(qiáng),乙素和脫氫延胡索堿均能使麻醉貓心跳變慢,延胡索總生物堿對(duì)離體兔心肌收縮力有抑制作用,能顯著增加冠狀動(dòng)脈流量,能明顯減輕皮下注射大劑量異丙腎上腺素所產(chǎn)生的心肌壞死程度,并抑制血小板聚集、抗血栓、抗心律失常,改善心肌供氧,增加心輸出量,因而具有治療冠心病、心絞痛的功效。
以往研究表明,延胡索總生物堿對(duì)實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血具有保護(hù)作用,并可緩解缺氧心臟心輸出量的下降,提示該藥可能會(huì)緩解心肌缺血大鼠心功能的下降。Iso屬于β受體興奮劑,當(dāng)過(guò)量注射時(shí)可通過(guò)加快心率、增強(qiáng)心肌收縮力、增加心肌耗氧量等環(huán)節(jié)造成心臟負(fù)荷過(guò)重、心肌微循環(huán)障礙、冠狀動(dòng)脈痙攣等,從而引起心肌持續(xù)性缺血損害和心功能下降。左心室內(nèi)壓曲線以及LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax是反映左心室功能變化的常規(guī)指標(biāo),故本實(shí)驗(yàn)以Iso腹腔注射誘導(dǎo)大鼠急性心肌缺血并觀察延胡索總生物堿對(duì)心功能下降的影響,本研究從各組記錄的左心室內(nèi)壓曲線看,Iso致大鼠心肌缺血后,各組左心室內(nèi)壓曲線均可見(jiàn)明顯改變,延胡索總生物堿高劑量組、總生物堿中劑量組的心功能曲線表明具有緩解Iso導(dǎo)致的大鼠心功能下降的趨勢(shì);通過(guò)分析各組LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax的變化結(jié)果表明,延胡索總生物堿高劑量組、總生物堿中劑量組的LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax與模型組比較具有顯著性差異,提示其可減輕Iso所致心肌缺血大鼠心功能的下降,對(duì)模型大鼠心臟泵血功能障礙有顯著改善作用。雖然本研究證明延胡索總生物堿可減輕Iso所致心肌缺血大鼠心功能的下降,但其詳細(xì)的作用機(jī)理則有待于進(jìn)一步研究。
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