占伯林 張 來 鄭穎俊

（廣東省深圳市中醫(yī)院 518033）

肝纖維化是各種慢性肝病的病理學(xué)共同基礎(chǔ)，慢性乙型肝炎病變活動(dòng)及進(jìn)展，并非病毒本身所致，與人體的免疫應(yīng)答及調(diào)控紊亂有密切的關(guān)系[1]，本文將對丹葉膠囊治療慢性乙型肝炎肝纖維化的臨床療效及對外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響略作探討，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選擇慢性乙型肝炎肝纖維化患者80例，全部病例均為我院2008年10月～2011年10月門診及住院患者。隨機(jī)分為兩組，治療組40例，其中男24例，女16例，年齡23～58歲，平均（34.2±9.4）歲；對照組40例，其中男25例，女15例，年齡21～59歲，平均（36.7±8.3）歲。兩組患者基本資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理比較，無顯著性差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù)2000年9月中華醫(yī)學(xué)會傳染病及寄生蟲學(xué)會《病毒性肝炎防治方案》[2]及中華肝臟病學(xué)會肝纖維化學(xué)組制定的《肝纖維化診斷及療效評估共識》

[3]。

（1）病史≥6個(gè)月，血清HBsAg陽性，血清ALT異常并小于正常值上限的10倍；總膽紅素（TBil）≤ 54μmol/L。

（2）血清纖維化指標(biāo)：透明質(zhì)酸（HA）；層粘連蛋白（LN）；Ⅲ型前膠原肽（P-Ⅲ-P）；Ⅳ型膠原（Ⅳ-C），上述指標(biāo)異?；蛉我庖豁?xiàng)高于正常值2倍以上。

（3）B超檢查表現(xiàn)為肝實(shí)質(zhì)回聲增強(qiáng)、增粗，肝臟表面不光滑，邊緣變鈍，肝臟、脾臟可增大。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn)

（1）符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）年齡在18～65歲之間。（3）簽署知情同意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）TBiI＞54μmol/L，診斷為重型或有重型肝炎傾向者。（2）酒精性、藥物性、免疫性等其它肝臟疾病。（3）肝硬化失代償期患者。（4）入選前6個(gè)月內(nèi)使用過干擾素等抗病毒藥物、免疫調(diào)節(jié)劑或其它治療肝纖維化藥物者。

1.5 治療方法

兩組均給予基礎(chǔ)護(hù)肝治療，前4周靜滴甘利欣（正大天晴制藥，30ml/d），谷胱甘肽（積華藥業(yè)，1.2/d）；第5周至24周，單用五酯膠囊（五味子甲素，四川禾正制藥，2粒/次，3次/天）。治療組加用丹葉膠囊，組成為丹參，葉下珠（比例為2：1，每粒含生藥0.25g），由我院制劑室提供，4粒/次，3次/天，療程均為24周。

1.6 觀測指標(biāo)

1.6.1 肝功能 血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽紅素（TBil），采用Olympus2700型全自動(dòng)生化儀檢測。治療前和用藥4周、8周、12周、24周各檢查一次。

1.6.2 肝纖維化血清學(xué)指標(biāo) HA、LN、P-Ⅲ-P、IV-C用放射免疫法測定，治療前、用藥12周及24周各檢查一次。

1.6.3 T淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo) CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+，采用美國BD公司生產(chǎn)的FAGS Cal-ibur型流式細(xì)胞儀及試劑盒。

1.6.4 安全性指標(biāo) 治療前后檢測血、尿、大便常規(guī)、心電圖、腎功能及監(jiān)測試驗(yàn)中出現(xiàn)的不良反應(yīng)。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS13.0軟件處理。計(jì)量資料數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布的采用t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)用（x-±s）表示，P＜0.05時(shí)提示數(shù)據(jù)存在差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后兩組肝功能變化情況比較，見表1。

表1 兩組治療前后肝功能的變化情況比較

表1 兩組治療前后肝功能的變化情況比較

注：治療前與對照組相比△P＞0.05，治療組治療前后相比，P＜0.01，治療后與對照組相比 *P＞0.05。

組 別 時(shí)間 ALT（U/L） AST（U/L） TB（umol/L）治療組 0周 157.26±37.68△●73.24±23.72△●36.21±8.33△●24 周 67.19±16.91* 36.83±9.65* 17.38±4.67*對照組 0周 149.61±35.84 76.07±25.60 38.14±7.18 24 周 63.43±17.23 38.39±10.93 16.87±5.23

2.2 兩組治療前后肝纖維化指標(biāo)的變化情況，見表2。

表2 兩組患者治療前后血清肝纖維化指標(biāo)變化情況比較,ng/ml）

表2 兩組患者治療前后血清肝纖維化指標(biāo)變化情況比較,ng/ml）

注：治療前與對照組相比△P＞0.05，治療組治療前后相比●P＜0.01，治療后與對照組相比*P＜0.01。

組 別 時(shí)間 HA LN P-Ⅲ-P IV-C治療組 0周 428.17±94.67△● 167.12±45.37△● 186.20±46.91△● 193.14±43.62△●24周 289.43±61.85* 107.28±26.81* 127.18±28.87* 136.29±30.39*對照組 0周 439.10±88.13 173.08±43.26 178.25±42.13 187.37±40.03 24周 341.09±76.14 129.15±28.37 152.30±37.31 159.12±34.81

2.3 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況，見表3。

表3 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況比較

表3 兩組治療前后T淋巴細(xì)胞亞群的變化情況比較

注：治療前與對照組相比△P＞0.05，治療組治療前后相比●P＜0.05，●●P＜0.01，治療后與對照組相比 *P＜0.05，**P＜0.01。

組 別 時(shí)間 CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+治療組 0周 63.19±7.38△●● 35.64±5.90△● 27.31±4.18△●● 1.37±0.41△●●24周 69.57±7.92* 38.18±5.27** 23.89±5.39** 1.68±0.59**對照組 0周 65.73±6.84 34.21±6.43 26.90±5.26 1.34±0.53 24周 64.97±8.03 34.73±5.81 27.69±5.47 1.30±0.48

2.4 安全性及不良反應(yīng)

治療期間兩組均未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。

3 討論

肝纖維化是各種慢性肝病發(fā)展過程中共同的病理基礎(chǔ)，中醫(yī)學(xué)歸屬于“脅痛”、“積聚”等范疇。目前對本病病因病機(jī)的認(rèn)識主要為濕熱瘀毒，如霍清萍等[4]認(rèn)為,瘀熱互結(jié)是肝纖維化的重要病理基礎(chǔ),清熱化瘀是治療肝纖維化的一條重要途徑。本研究丹葉膠囊所含的葉下珠微苦甘，性涼，具有清熱解毒、消積之功，實(shí)驗(yàn)證明其對乙肝病毒有抑制作用，及有保護(hù)肝細(xì)胞及提高細(xì)胞免疫力等作用。丹參苦，微寒，具有活血止痛，涼血消癰等功效，藥理研究證明其有改善肝臟微循環(huán)，促進(jìn)肝組織修復(fù)、再生等作用。兩藥相輔相成，共奏清熱解毒、活血化瘀之功。

肝纖維化機(jī)制為細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的合成與降解失調(diào)，病理特征為膠原纖維生成及大量ECM在Disse間隙沉積。血清纖維化標(biāo)志物HA、LN、P-Ⅲ-P和Ⅳ-C屬細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）代謝成分，已作為無創(chuàng)傷診斷肝纖維化的常用血清學(xué)指標(biāo)，本研究結(jié)果治療組肝纖維化指標(biāo)HA、LN、P-Ⅲ-P和Ⅳ-C均較治療前明顯下降（P＜0.01），且較對照組有顯著差異（P＜0.01），說明丹葉膠囊具有較好的抗肝纖維化作用。

慢性乙型肝炎患者體內(nèi)存在著不同程度細(xì)胞免疫功能紊亂，使機(jī)體不能有效清除入侵的HBV，導(dǎo)致疾病的慢性化。有研究表明CD4+、CD8+T細(xì)胞在慢性肝炎、重癥肝炎到肝硬化呈現(xiàn)逐漸減少，提示T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與慢性乙型肝炎病情進(jìn)展有一定關(guān)系，且HBV-DNA陽性患者與HBV DNA陰性組比較，CD4+/CD8+值有明顯差異（P＜0.05），CD4+減少和CD8+增加，反映了T淋巴細(xì)胞亞群失衡和細(xì)胞免疫功能紊亂[5]。既往認(rèn)為肝臟內(nèi)免疫細(xì)胞主要引起肝臟炎癥，但近年來的研究表明免疫細(xì)胞可直接調(diào)節(jié)肝臟星狀細(xì)胞功能，可能在肝纖維化進(jìn)程中起著更為重要的作用，如在無T淋巴細(xì)胞小鼠的CCl4肝纖維化模型中加入CD8+T細(xì)胞會促進(jìn)肝星狀細(xì)胞激活并造成丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶升高；加入CD4+細(xì)胞對肝纖維化無影響，提示CD8+細(xì)胞在肝纖維化形成中有更加重要作用[6]。本研究治療組治療后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均有不同程度提高（P＜0.01或0.05），CD8+下降（P＜0.01），較對照組有顯著差異（P＜0.01或0.05），說明丹葉膠囊對調(diào)節(jié)特異性免疫細(xì)胞功能有一定的作用，亦可能通過此途徑間接起到抗肝纖維化的作用。

本研究結(jié)果表明丹葉膠囊具有較好的抗肝纖維化及調(diào)節(jié)免疫的作用，為治療慢性乙型肝炎肝纖維化有效的純中藥制劑。

[1] 陳灝珠.主編.實(shí)用內(nèi)科學(xué)[M].第11版,北京∶人民衛(wèi)生出版社 ,2001∶315.

[2] 中華醫(yī)學(xué)會傳染病寄生蟲病學(xué)會.病毒性肝炎防治方案[J].中華肝臟病學(xué)雜志，2000，8（6）∶ 324.

[3] 中華肝臟病學(xué)會肝纖維化學(xué)組.肝纖維化診斷及療效評估共識[J].藥品評價(jià)，2007，4（4）：265-66.

[4] 霍清萍,張延昭.瘀熱互結(jié)與肝纖維化關(guān)系的臨床研究[J].新中醫(yī),1999 ,37 （4）：36.

[5] 劉英，胡萍.乙型病毒性肝炎患者T淋巴細(xì)胞亞群的測定與其臨床意義分析[J].臨床消化病雜志，2010,22（6）∶50-51.

[6] Tang JT. Fang JY. Gu WQ，et al. T cell immune response is correlated with fibrosis and inflammatory activity in hepatitis B cirrhotics [J]，World J Gastroenterol.2006.12（19）∶3015-3019.