謝 心 吳 堅 竺春玲 邵筱宏 丁亞琴（上海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，上海200082）

動脈粥樣硬化是目前危害人類健康的主要疾病，具有很高的致死率和致殘率，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。許多學者認為，動脈粥樣硬化的發(fā)生與低水平慢性炎癥狀態(tài)密切相關[1-2]。目前，與動脈硬化發(fā)病關系最密切、研究最多的炎癥因子是超敏C反應蛋白（hs-CRP）、可溶性細胞間黏附分子-1（sICAM-1）和血管內(nèi)皮細胞黏附分子-1（sVCAM-1）。 本研究通過觀察益氣養(yǎng)陰方對動脈粥樣硬化大鼠免疫炎癥因子hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1的影響，挖掘干預動脈粥樣硬化免疫損傷的有效中藥復方，為中醫(yī)藥防治動脈粥樣硬化提供一個研究思路。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物中國科學院上海斯萊克實驗動物公司提供的SD雄性大鼠46只，4周齡，體重（200±10）g，清潔級，許可證號SCXK（滬）2003-0003。飼養(yǎng)地點：上海中醫(yī)藥大學動物實驗中心。

1.1.2 實驗藥物益氣養(yǎng)陰方（黃芪15g、黨參20g、麥冬15g、五味子6g、枸杞子15g、桑寄生15g）由上海中醫(yī)藥大學中藥制劑室制作，配成3g生藥/mL溶液備用。普伐他汀鈉，20mg/片，由上海三共制藥有限公司生產(chǎn)。

1.2 實驗方法

1.2.1動物分組大鼠適應性飼養(yǎng)后，根據(jù)體重隨機分組編號。將46只SD大鼠隨機分成4組：正常對照組10只，模型組12只，中藥組12只，西藥組12只。

1.2.2造模方法采用VitD3+高脂飼料喂養(yǎng)：將150g維生素D3（VitD3，每克含VitD31×105IU）溶解于375mL蒸餾水中，配制成0.4g/mL，即4×104IU/mL的溶液。高脂飼料85kg，配方：80.3%大鼠標準飼料、2%膽固醇、2%魚粉、0.5%膽酸鈉、

10%豬油、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白砂糖（中國科學院上海斯萊克實驗動物有限責任公司加工）。按7×105IU/kg的總劑量灌胃給予VitD3，分3d給完，之后每天喂高脂飼料15g，喂養(yǎng)8周。

1.2.3 動物飼養(yǎng)與給藥正常對照組只給予基礎飼料；其余各組動物以VitD3灌胃3d，并每天喂高脂飼料15g，喂養(yǎng)8周。8周后，除正常對照組外，其余各組隨機取出2只殺死，解剖頸動脈、胸主動脈確定造模成功與否。在確定造模成功的前提下，以上各組在原有飼料喂養(yǎng)下，正常對照組、模型組給予同等劑量的生理鹽水灌胃，中藥組給予益氣養(yǎng)陰方，西藥組給予普伐他汀鈉。藥物劑量參照藥典，按動物與成人的等效劑量換算。繼續(xù)喂養(yǎng)4周。所有動物自由飲水。

1.2.4 中藥血清的制備喂養(yǎng)滿4周結(jié)束時將大鼠麻醉，腹主動脈取血，放入15mL離心管中，留作標本，靜置1h后。3000r/min，離心0.5h，取上清，56℃水浴1h。用0.2μm濾器將各組血清分別注入1.5mLEppendorf管中，-20℃冰箱保存。

1.2.5 檢測指標 超敏C反應蛋白（hs-CRP）采用乳膠免疫增強比濁法試劑盒，sVCAM-1、sICAM-1采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測。試劑盒購自上海達安生物技術公司。以美國Bio-Rad公司的全自動酶免分析儀檢測。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計。結(jié)果用（±s）表示。采用單因素方差分析，方差齊者用SNK法，方差不齊用Dunnett’s T3法。

2 實驗結(jié)果

2.1 一般情況 整個實驗期間，各組動物反應靈敏，皮毛色白、致密有光澤，進食活躍，活動良好，體重增長。實驗過程中正常對照組、模型組、中藥組及西藥組大鼠均無死亡。

2.2 各組大鼠治療后血清sVCAM，sICAM-1及hsCRP含量情況 結(jié)果顯示，與模型組比較，益氣養(yǎng)陰方能明顯降低動脈粥樣硬化大鼠hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1指標水平 （P＜0.01）；與西藥組比較，在降低模型大鼠sVCAM和hsCRP方面亦具有一定優(yōu)勢（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠治療后血清sVCAM、sICAM-1及hsCRP水平

3 討論

益氣養(yǎng)陰方是在經(jīng)典名方生脈散基礎上加減化裁而來，由黃芪、黨參、麥冬、五味子、枸杞、桑寄生等6味中藥組合而成。方中黃芪益氣帥血，黨參補中益氣為君；麥冬、五味子滋陰養(yǎng)心；桑寄生、枸杞子滋補肝腎以培陰精之本。諸藥合用，切中脈痹病機，藥專力宏，共奏益氣養(yǎng)陰之功。反映中醫(yī)辨證論治的臨床特色，抓住動脈粥樣硬化“本虛標實”的病機特點[3]，體現(xiàn)治病必求本，益氣養(yǎng)陰為先的特色。

超敏CRP是最廣泛應用的炎癥標志物，是反映低度、持續(xù)炎癥的指標[4]。動脈粥樣硬化常伴有炎癥病變，超敏CRP可直接影響動脈粥樣硬化斑塊與血栓形成，且已被證實是慢性炎癥引發(fā)心血管疾病的獨立危險因素[5-6]。它在體外可激活補體，誘導內(nèi)皮產(chǎn)生單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1），上調(diào)ICAM-1、VCAM-1，介導巨噬細胞攝入天然LDL，使單核細胞組織因子增加，引起動脈內(nèi)膜損傷，最終導致斑塊和血栓形成。非活化內(nèi)皮細胞有低于正常的VCAM-1表達。標準的免疫組化方法檢測不到正常血管上VCAM-1表達，在體內(nèi)炎癥的病理條件下血管內(nèi)皮有VCAM-1表達[7]。VCAM-1在以上這些細胞表達同時分泌相應的sVCAM-1。研究認為VCAM-1介導的炎癥過程在動脈粥樣硬化發(fā)生中起著極其重要的作用[8]，在病變早期，VCAM-1主要是促單核細胞向內(nèi)皮黏附、遷移，在進展期，則促進已遷入病灶的單核細胞位移，T淋巴細胞的激活，增加其他細胞與細胞間的相互作用。動脈粥樣硬化被認為是炎癥損傷的反應，血管內(nèi)皮細胞損傷后表達黏附分子，VCAM-1介導炎癥細胞黏附和侵入血管壁是動脈粥樣硬化發(fā)生的早期步驟。隨著病程進展，VCAM-1介導更多的細胞進入斑塊，促使斑塊發(fā)展，同時影響斑塊的穩(wěn)定性。尤其在糖尿病病人sVCAM-1的水平越高，其心血管事件的風險就越大。

本研究發(fā)現(xiàn)，益氣養(yǎng)陰方能明顯降低動脈粥樣硬化大鼠血清hs-CRP、sVCAM-1、sICAM-1表達，這為我們挖掘干預動脈粥樣硬化免疫損傷的有效中藥復方來防治動脈粥樣硬化進展提供了一個研究思路。

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[5] 單倚玲.超敏CRP-血管疾病的獨立危險因子.國外醫(yī)學生化與檢驗分冊，2004，25（1）：72

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