李漢臣，趙希艷，吉志新，楊曉寬，繳寶豐

（1.河北科技師范學院，河北秦皇島 066600；2.秦皇島糧豐貿(mào)易有限公司，河北秦皇島 066000）

關(guān)于黃粉蟲（Tenebrio molitorLinneeus）的營養(yǎng)成分和營養(yǎng)價值已有諸多報道。黃粉蟲的飼養(yǎng)也具有比較成熟的技術(shù)，適合進行工廠化生產(chǎn)[1-2]，是一種極具開發(fā)潛力的昆蟲資源。李漢臣等就黃粉蟲及其成分對小鼠的生長發(fā)育、學習記憶能力、抗疲勞能力等方面的營養(yǎng)保健作用做了初步報道[3-4]。近年來，高血糖和高脂血癥的發(fā)病率逐年升高，輔助降血糖和降血脂保健食品的開發(fā)也受到廣泛關(guān)注。因此，進一步研究了不同劑量的黃粉蟲脫脂粉對小鼠血糖和血脂水平的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 黃粉蟲及其脫脂粉

黃粉蟲由秦皇島糧豐貿(mào)易有限公司養(yǎng)殖并提供，微波干燥后經(jīng)超臨界二氧化碳流體萃取除去油脂，剩余物為脫脂粉，粉碎40目過篩備用。

1.1.2 實驗動物

ICR品系雌性小鼠，購于北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，合格證號：0163865，0156761。飼養(yǎng)管理條件為：室溫（23±2）℃，相對濕度為 50%～60%，自然照明。飼喂方法采用摻入飼料自由攝食，飲水均為純凈水。

1.1.3 動物飼料

基礎(chǔ)飼料配方：玉米粉31.5%、小麥粉20%、麩皮10%、豆粕22%、魚粉8%、骨粉2.5%、酵母粉2%、預混料4%[5]。

高脂飼料配方：78.8%基礎(chǔ)飼料、1%膽固醇、10%蛋黃粉、10%豬油、0.2%豬膽鹽[6]。

對血糖影響試驗劑量組飼料配方：黃粉蟲脫脂粉分別占飼料總量的20%、10%、5%，其余為基礎(chǔ)飼料。

對血脂影響試驗劑量組飼料配方：黃粉蟲脫脂粉分別占飼料總量的20%、10%、5%，其余為高脂飼料。

飼料按配方混拌均勻后，用預先溫熱的純凈水濕潤并攪拌，直至飼料軟硬度適當，以模具成型后于鼓風干燥箱中90℃～100℃烘干，冷卻后備用。

1.2 主要試劑與儀器設(shè)備

四氧嘧啶（Alloxan）：Sigma公司；膽固醇、膽鹽、肝素鈉：北京奧博星生物技術(shù)有限責任公司。

HA221-50-06型超臨界萃取裝置：南通市華安超臨界萃取有限公司；干片式快速血脂檢測儀：南京豐達醫(yī)療儀器有限公司；GT-1640型日本京都血糖儀；GZX-9240型數(shù)顯鼓風干燥箱；分析天平，電子秤，等。

1.3 黃粉蟲脫脂粉對小鼠血糖影響試驗的動物分組及處理

1.3.1 糖尿病小鼠模型的建立

將小鼠購回適應實驗室環(huán)境1周后，選25 g～27 g者，禁食（不禁水）12 h后，留10只腹腔注射生理鹽水為對照，其余分別按總劑量270 mg/kg體重間隔24 h分兩次腹腔注射0℃～4℃下現(xiàn)配的四氧嘧啶生理鹽水溶液，用于制備糖尿病模型[7]。前后兩次注射劑量為3∶2，第一次注射完4 h后，各組均給予5%的葡萄糖水自由飲用，預防出現(xiàn)低血糖引起小鼠死亡，4 h后換為普通純凈水；第二次注射完后自由進食和飲水。每天于固定時間測定各組小鼠平均進食量和平均飲水量。1周后禁食（不禁水）12 h，斷尾取血測定空腹血糖，血糖值大于11.1 mmol/L者視為造模成功[8-9]。

1.3.2 動物分組及處理

將成模小鼠按血糖值從小到大排序，淘汰血糖值大于25 mmol/L和小于11.1 mmol/L者，取其中40只按隨機區(qū)組分組設(shè)計方法平均分為4組，分別為模型對照組和高、中、低劑量組。其中模型對照組喂給基礎(chǔ)飼料；喂給含黃粉蟲脫脂粉20%、10%、5%飼料者分別為高、中、低劑量組。每天更換墊料及清洗飲水瓶。連續(xù)喂養(yǎng)20 d，分別于第10天和第20天禁食（不禁水）12 h，斷尾采血測定空腹血糖值。

1.4 黃粉蟲脫脂粉對小鼠血脂影響試驗的動物分組及處理

選?。?3.5g±1）g小鼠50只隨機分為5組，喂飼基礎(chǔ)飼料為正常對照組，喂飼高脂飼料為模型對照組，另喂飼含黃粉蟲脫脂粉20%、10%、5%的高脂飼料者分別為高、中、低劑量組。保證小鼠良好的生活衛(wèi)生條件，連續(xù)喂養(yǎng)30 d后，禁食（不禁水）12 h，摘眼球采血于事先制備好的抗凝管中，測定小鼠全血中總膽固醇（TC）、總甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的含量。

1.5 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用 t檢驗，以 Excel 2003 軟件分析數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 建模期間四氧嘧啶對小鼠進食量、飲水量和血糖值的影響

開始時各組小鼠進食量和飲水量差別不明顯，給藥各組小鼠腹腔注射四氧嘧啶后第3天開始出現(xiàn)多飲、多食、多尿的癥狀，從第3天至第7天給藥各組小鼠平均進食量和飲水量均顯著高于對照組（見表1），而對照組小鼠平均進食量和飲水量比較平穩(wěn)。與對照組小鼠相比，給藥組小鼠血糖水平均極顯著升高，說明該方法建立小鼠糖尿病模型成功。

表1 糖尿病模型及對照組小鼠的平均進食量、平均飲水量和血糖值（±s）Table 1 Average feed and water intake and blood glucose level of control and diabetes model group（±s）

表1 糖尿病模型及對照組小鼠的平均進食量、平均飲水量和血糖值（±s）Table 1 Average feed and water intake and blood glucose level of control and diabetes model group（±s）

注：與對照組相比，a：P＜0.01。

血糖值/（mmol/L）對照組 10 3.9±0.3 5.2±0.5 3.78±0.21糖尿病建模組 70 7.3±1.3 31±4.4 13.25±4.47a組別 實驗動物數(shù)平均進食量/（g/d）平均飲水量/（mL/d）

2.2 黃粉蟲脫脂粉對糖尿病小鼠血糖水平的影響

黃粉蟲脫脂粉對糖尿病小鼠血糖水平的影響，見表2。

表2 黃粉蟲脫脂粉對各組小鼠血糖水平的影響（±s）Table 2 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood glucose level in varided group mice（±s）

表2 黃粉蟲脫脂粉對各組小鼠血糖水平的影響（±s）Table 2 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood glucose level in varided group mice（±s）

注：a與喂養(yǎng)開始相比P＜0.05。

第20天血糖值/（mmol/L）模型對照組 13.31±2.62 16.06±6.51 13.48±6.38高劑量組 13.33±2.74 15.04±6.84 11.70±5.82中劑量組 13.28±2.50 15.16±5.40 11.14±4.41低劑量組 13.11±2.52 18.25±6.89a 17.28±8.65a組別 喂養(yǎng)開始血糖值/（mmol/L）第10天血糖值/（mmol/L）

從表2可知，連續(xù)喂給糖尿病模型小鼠黃粉蟲脫脂粉10 d和20 d后，高、中、低劑量組與對照組小鼠相比，血糖值均未見顯著差異。同時，高、中同一劑量組小鼠喂養(yǎng)前后其血糖值也無顯著差異，低劑量組小鼠血糖值還有繼續(xù)升高趨勢。說明不同劑量的黃粉蟲脫脂粉對該糖尿病模型小鼠血糖水平無顯著降低作用。

2.3 黃粉蟲脫脂粉對不同處理小鼠血脂水平的影響

黃粉蟲脫脂粉對不同處理小鼠血脂水平的影響，見表3。

表3 黃粉蟲脫脂粉對各組小鼠血脂水平的影響（±s）Table 3 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood lipid level in varided group mice（±s）

表3 黃粉蟲脫脂粉對各組小鼠血脂水平的影響（±s）Table 3 Effects of fatless Tenebrio molitor Linneeus powder on blood lipid level in varided group mice（±s）

注：a與正常對照組相比P＜0.05，b與模型對照組相比P＜0.05，bb與模型對照組相比P＜0.01。

LDL-C/（mmol/L）正常對照組 1.76±1.41 0.47±0.54 0.95±1.03 0.51±0.57模型對照組 3.47±1.33a 0.95±0.49a 1.95±0.73a 0.89±0.85高劑量組 1.73±1.40b 0.41±0.10bb 0.71±0.74bb 0.96±1.14中劑量組 1.89±1.63b 0.50±0.61bb 1.02±0.75bb 0.64±0.91低劑量組 1.96±1.46b 0.55±0.81b 0.78±0.76bb 0.92±1.49組別 TC/（mmol/L）TG/（mmol/L）HDL-C/（mmol/L）

從表3數(shù)據(jù)可知，模型對照組小鼠全血TG和TC含量均顯著高于正常對照組。對于喂飼高脂飼料時血液中HDL-C含量是升高還是降低文獻中各有報道，本實驗中HDL-C含量模型對照組也顯著高于正常對照組，這可能與TC水平升高幅度較大有關(guān)，其原因需要進一步探索。但仍能夠說明該方法建立小鼠高血脂模型成功。

高、中、低劑量組小鼠全血中TC、TG和HDL-C含量均顯著或極顯著低于模型對照組，且趨于正常對照組水平；而各劑量組之間差異不顯著。說明給小鼠喂飼高脂飼料時，摻入不同劑量黃粉蟲脫脂粉能有效抑制其血脂水平的升高，且5%劑量即可達到理想效果。

3 結(jié)論與討論

給該試驗四氧嘧啶致糖尿病模型小鼠飼料中添加不同劑量黃粉蟲脫脂粉，均不能有效降低其升高的血糖水平。而給小鼠高脂飼料的同時，在其中添加黃粉蟲脫脂粉含量達5%劑量時，即可有效預防其血液甘油三酯和膽固醇水平的升高。

本文黃粉蟲脫脂粉對血糖水平的影響試驗中采用注射四氧嘧啶法制備小鼠糖尿病模型，其機理是部分損傷小鼠胰腺β細胞導致胰島素分泌不足造成，試驗中未發(fā)現(xiàn)對已升高的血糖水平有顯著改善作用；但對于常見的由于胰島素受體異常所致糖尿病是否有效需進一步研究。在其對血脂水平的影響試驗中本文只進行了預防性試驗，發(fā)現(xiàn)有顯著抑制小鼠血脂水平升高的效果；但對于已形成高血脂水平的小鼠是否有治療性作用也需進一步研究。

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