羅姝 曹小平 邱里

急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化

羅姝 曹小平 邱里

目的 探討急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化及意義, 為急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者的搶救提供參考。方法 回顧性總結(jié)分析本院在2009年1月～2013年1月期間收治的80例急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者的臨床病例資料, 根據(jù)患者入院時(shí)中毒程度分為輕度中毒、中度中毒和重度中毒三組, 檢測(cè)患者外周血樹突狀細(xì)胞水平, 同時(shí)以30名健康志愿者作為對(duì)照, 分析有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化。結(jié)果 與健康對(duì)照組相比, 三組不同程度中毒患者第1天外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞均有顯著升高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；中毒后第3天, 輕度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平恢復(fù)正常, 而中度中毒患者上述指標(biāo)逐漸下降, 重度中毒患者上述指標(biāo)顯著高于正常水平；中毒后第5天, 中度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平接近正常水平, 重度中毒患者上述指標(biāo)仍顯著高于正常水平。中毒后第7天, 重度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平均有所下降, 但仍高于正常對(duì)照組。結(jié)論 急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化能較客觀地反映不同中毒程度患者的病理變化過程, 檢測(cè)患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化對(duì)病情判斷以及臨床治療具有一定的指導(dǎo)意義。

急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒；外周血樹突狀細(xì)胞；變化

有機(jī)磷農(nóng)藥中毒是基層醫(yī)院中常見的中毒之一, 中毒機(jī)理主要是有機(jī)磷農(nóng)藥與人體膽堿酯酶結(jié)合并形成磷酰膽堿脂酶, 影響正常人體膽堿酯酶的功能, 造成乙酰膽堿不能正常分解, 從而使乙酰膽堿在機(jī)體神經(jīng)突觸大量積累, 造成膽堿能神經(jīng)功能失調(diào)。首先使膽堿能神經(jīng)持續(xù)興奮, 然后興奮轉(zhuǎn)為抑制, 進(jìn)而產(chǎn)生一系列中毒癥狀, 導(dǎo)致患者出現(xiàn)昏迷, 嚴(yán)重者造成呼吸衰竭而死亡［1］。在基層醫(yī)院有機(jī)磷農(nóng)藥中毒是常見急癥, 特別是農(nóng)忙季節(jié)(春、秋), 中毒者口服占多數(shù),一般病情兇險(xiǎn), 變化迅速, 中毒之后如果不能及時(shí)救治, 極容易導(dǎo)致患者死亡。在意外中毒時(shí), 多種環(huán)境污染物和藥物能改變細(xì)胞免疫功能。急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒可引起機(jī)體多種生理、生化指標(biāo)的改變, 亦可引起體液免疫功能、細(xì)胞免疫功能的改變［2］。本研究回顧性總結(jié)分析四川省南充市川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院在2009年1月～2013年1月期間收治的80例急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者的臨床病例資料, 根據(jù)患者入院時(shí)中毒程度分為輕度中毒、中度中毒和重度中毒三組, 檢測(cè)患者外周血樹突狀細(xì)胞水平, 同時(shí)以30名健康志愿者作為對(duì)照, 分析有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院在2009年1月～2013年1月期間收治的80例急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者, 其中女49例, 男31例,年齡15～66歲, 患者平均年齡為38.4歲。患者中經(jīng)消化道吸收中毒者62例, 皮膚接觸中毒者12例, 經(jīng)呼吸道吸收中毒者6例。中毒后最長(zhǎng)15 h才來本院就診, 最短30 min即來本院就診, 大多數(shù)患者在中毒后40 min～2.5 h內(nèi)來本院就診?；颊咧薪?jīng)消化道吸收中毒者表現(xiàn)為瞳孔針尖狀縮小、大汗淋漓以及肌纖維顫動(dòng)和腺體分泌增多等典型的有機(jī)磷農(nóng)藥中毒癥狀。所有患者入院以后, 按照患者的血清膽堿酯酶活力測(cè)定結(jié)果以及癥狀表現(xiàn)判定為重度中毒者12例, 判定為中度中毒者32例, 輕度中毒者36例。根據(jù)患者入院時(shí)中毒程度分為輕度中毒、中度中毒和重度中毒三組, 其中輕度中毒36例、中度中毒32例、重度中毒12例, 檢測(cè)上述三組患者外周血樹突狀細(xì)胞水平, 同時(shí)以30名健康志愿者作為對(duì)照, 分析有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化。

1.2 檢測(cè)方法 采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血樹突狀細(xì)胞水平, 采用CELLQuest軟件分析細(xì)胞數(shù)目及比例。三組急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者和健康志愿者均于入院第1、3、5、7 d清晨空腹抽取靜脈血, 采用3 ml 乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血,外周血單個(gè)核細(xì)胞分離后, 采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血樹突狀細(xì)胞水平, 所有受試者在標(biāo)本采集前均取得研究對(duì)象的知情同意。采用Ficoll梯度密度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞,采用磷酸鹽緩沖液對(duì)EDTA抗凝血進(jìn)行等體積稀釋, 然后將稀釋后的待測(cè)血液樣品按1:1的比例加到淋巴細(xì)胞分離液上, 2000 rpm/min離心20 min, 待測(cè)血液樣品離心后分為四層, 由上到下依次為血漿、外周血單個(gè)核細(xì)胞層、淋巴細(xì)胞分離液和紅細(xì)胞；將外周血單個(gè)核細(xì)胞層小心吸出, 放入離心管中,然后加入5倍體積的磷酸鹽緩沖液混合, 1500 rpm/min離心10 min, 獲得外周血單個(gè)核細(xì)胞樣品, 隨后制備成外周血單個(gè)核細(xì)胞懸浮液進(jìn)行測(cè)定［3］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)量資料采用百分率(%)或者均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 計(jì)數(shù)資料之間的比較采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行分析, 計(jì)量資料之間的比較使用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析, 統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

三組患者和健康對(duì)照者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞 (mDC, CD11c+CD123-)和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞 (pDC, CD11c-CD123+)變化情況如表1所示。由表1可知, 與健康對(duì)照組相比, 三組不同程度中毒患者第1天外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞均有顯著升高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；中毒后第3天, 輕度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平恢復(fù)正常, 而中度中毒患者上述指標(biāo)逐漸下降, 重度中毒患者上述指標(biāo)顯著高于正常水平；中毒后第5天, 中度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平接近正常水平, 重度中毒患者上述指標(biāo)仍顯著高于正常水平。中毒后第7天, 重度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平均有所下降, 但仍高于正常對(duì)照組。

表1 三組患者和健康對(duì)照者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞變化情況

表1 三組患者和健康對(duì)照者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞變化情況

組別例數(shù)檢測(cè)時(shí)間細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞(×107/L)髓樣樹突狀細(xì)胞(×107/L)健康對(duì)照組301.01±0.544.01±1.54輕度中毒組3612.02±0.908.02±2.90 3 1.24±0.454.24±1.45 5 1.09±0.114.09±1.11 7 1.04±0.134.04±1.13中度中毒組3214.30±1.7012.30±3.70 3 1.87±1.248.87±2.24 5 1.40±0.965.40±1.96 7 1.06±0.744.06±1.74重度中毒組1215.50±1.1015.50±3.10 3 5.90±1.8914.90±3.89 5 4.50±1.1012.50±3.10 7 3.90±1.898.90±1.89

3 討論

有機(jī)磷農(nóng)藥是有機(jī)磷脂類化合物, 經(jīng)消化道、呼吸道以及皮膚黏膜吸收進(jìn)入人體后會(huì)導(dǎo)致機(jī)體中毒。在基層醫(yī)院有機(jī)磷農(nóng)藥中毒是一種常見的病情危重且病死率高的嚴(yán)重疾病, 中毒機(jī)理主要是有機(jī)磷農(nóng)藥與人體膽堿酯酶結(jié)合并形成磷酰膽堿脂酶, 導(dǎo)致人體膽堿酯酶不能正常分解乙酰膽堿,從而使乙酰膽堿在機(jī)體神經(jīng)突觸大量積累, 造成膽堿能神經(jīng)功能失調(diào)。首先使膽堿能神經(jīng)持續(xù)興奮, 然后興奮轉(zhuǎn)為抑制,進(jìn)而產(chǎn)生一系列中毒癥狀。中毒之后如果不能及時(shí)救治, 極容易導(dǎo)致患者死亡［4］。在意外中毒時(shí), 多種環(huán)境污染物和藥物能改變細(xì)胞免疫功能。急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒可引起機(jī)體多種生理、生化指標(biāo)的改變, 亦可引起體液免疫功能、細(xì)胞免疫功能的改變。急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化, 本次研究結(jié)果顯示, 與健康對(duì)照組相比, 三組不同程度中毒患者第1天外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞均有顯著升高, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；中毒后第3天, 輕度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平恢復(fù)正常, 而中度中毒患者上述指標(biāo)逐漸下降, 重度中毒患者上述指標(biāo)顯著高于正常水平；中毒后第5天, 中度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平接近正常水平, 重度中毒患者上述指標(biāo)仍顯著高于正常水平。中毒后第7天, 重度中毒患者外周血髓樣樹突狀細(xì)胞和細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞水平均有所下降, 但仍高于正常對(duì)照組。中毒初期, 患者血液樹突狀細(xì)胞升高, 升高程度與患者中毒程度有關(guān), 中毒越重, 升高越顯著；中毒第3 d樹突狀細(xì)胞明顯降低, 且中毒越重, 恢復(fù)越緩慢；第5 d,中度中毒患者才恢復(fù)正常, 而重度中毒患者雖然樹突狀細(xì)胞呈不斷下降的趨勢(shì), 但直到第7 d, 樹突狀細(xì)胞仍高于正常值,重度中毒患者出現(xiàn)上述表現(xiàn)可能與持續(xù)應(yīng)激有關(guān)［5］。急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化能較客觀地反映不同中毒程度患者的病理變化過程, 檢測(cè)對(duì)患者外周血樹突狀細(xì)胞的變化對(duì)病情判斷以及臨床治療具有一定的指導(dǎo)意義。

［1］ 李偉強(qiáng), 阮海林.急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒的腫瘤壞死因子, 白細(xì)胞介素-6, C 反應(yīng)蛋白的臨床研究現(xiàn)狀與展望.中國(guó)醫(yī)藥指南, 2012, 10(11): 99-100.

［2］ 潘曦明, 詹義星, 陳潔, 等.急性有機(jī)磷中毒患者白細(xì)胞, 血糖,血淀粉酶的變化及臨床意義.臨床薈萃, 2010, 25(9): 800-801.［3］ 葉紀(jì)錄.白細(xì)胞中各群細(xì)胞在有機(jī)磷農(nóng)藥中毒預(yù)后評(píng)估中的意義.中華急診醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 21(2): 207-209.

［4］ 余秀顏, 劉平, 郭喜顏.有機(jī)磷中毒病人治療過程中多項(xiàng)血清因子變化規(guī)律及護(hù)理研究.全科護(hù)理, 2011, 9(17): 1507-1508.

［5］ 張?jiān)谄? 梁仁, 黃韜, 等.全血, 血漿, 紅細(xì)胞膽堿酯酶活性在急性有機(jī)磷農(nóng)藥中毒病程中的變化及意義.中華急診醫(yī)學(xué)雜志, 2001, 10(4): 232-234.

637000 四川省南充市川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院急診科