王璐璐 逄曙光 段光蘭 黃仙萍 陸 勇 姜 強 王聰聰 李 梅 李友梅

(山東大學醫(yī)學院，山東 濟南 250012)

2型糖尿病是最常見的慢性疾病之一，早期癥狀并不明顯，在國外有“沉默的殺手”之稱。一旦患者血糖控制不佳就會引發(fā)多種并發(fā)癥(腦血管病變、腎衰竭和下肢壞疽等)，成為致死致殘的主要原因。因此對2型糖尿病患者的血糖控制和病情監(jiān)測尤為重要。α-L-巖藻糖苷酶(AFU)和腺苷脫氨酶(ADA)的檢測，過去主要側(cè)重于研究原發(fā)性肝癌的早期診斷價值〔1，2〕。近來有文獻報道AFU或ADA活性升高與2型糖尿病有關(guān)〔3～6〕。然而聯(lián)合檢測AFU和ADA活性在2型糖尿病患者病情控制中的作用罕有相關(guān)報道。由于AFU和ADA水平分別與表皮細胞功能紊亂和胰島素抵抗有關(guān)，因此可以進一步研究AFU和ADA活性在2型糖尿病血糖控制和病情監(jiān)測中的作用。本文收集2型糖尿病434例，對AFU、ADA與2型糖尿病病人HbA1c和FBG進行相關(guān)性分析，以探討2型糖尿病患者聯(lián)合檢測AFU和ADA的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 對象與分組 選取2010年1月1日至2011年12月31日濟南市中心醫(yī)院內(nèi)分泌科住院的2型糖尿病患者434例(男性213例，女性221例)，年齡(50.3±14.2)歲。按照2010年ADA糖尿病診斷新指南作為2型糖尿病診斷標準。將2型糖尿病患者按 HbA1c水平進行如下分組:血糖控制良好組(HbA1c＜7.0%)共 171例;血糖控制一般組(7.0%≤HbA1c≤9.0%)，共179例;血糖控制不良組(HbA1c＞9.0%)，共84例。正常對照組為性別與年齡相匹配的同期健康體檢人員，共94例(男性50例，女性44例)，年齡(48.5±8.6)歲。所有患者行肝功能檢測排除肝病病史，B超檢查無肝內(nèi)占位性病變，近3個月內(nèi)無服用嚴重影響肝代謝的藥物及食物，無手術(shù)、嚴重應激及感染病史。

1.2 方法 使用真空采血管于清晨采集空腹靜脈血，及時分離血清。采用拜爾2400生化儀器測定AFU和ADA，其中AFU采用連續(xù)檢測法測定，參考范圍為0～40 U/L;ADA采用速率法測定，參考范圍4～22 U/L。中佳公司的Gc1200儀器測定空腹血糖(FPG)，參考范圍3.9～6.1 mmol/L。Bio-Rad D10全自動糖化血紅蛋白儀測定糖化血紅蛋白，采用離子交換高效液相色譜(HPLC)的原理，參考范圍為4% ～6%。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析。檢測數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，計量資料用±s表示，血糖水平對 A FU、ADA的影響應用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗和Dunnett-t檢驗。各變量間相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 各組相關(guān)指標 見表1。2型糖尿病組和正常對照組FPG、HbA1c、AFU水平和ADA活性差異顯著(P＜0.05)。

表1 糖尿病各組之間和正常對照組相關(guān)指標比較(±s)

表1 糖尿病各組之間和正常對照組相關(guān)指標比較(±s)

與正常對照組比較:1)P＜0.05;2)P＜0.01

指標 男/女(n) 年齡(歲) BMI(kg/m2)HbA1c(%)FPG(mmol/L)AST(IU/L) ALT(IU/L)BUN(mmol/L)正常對照組(n=94) 50/44 48.50±6.20 23.71±0.76 4.54±0.60 4.40±1.20 35.20±1.40 27.47±0.90 5.60±0.30糖尿病對照組(n=434) 213/221 52.65±3.54 25.44±0.46 7.91±1.001)8.20±2.671) 35.70±1.67 30.60±1.11 7.47±1.23血糖控制良好組(n=171) 90/81 50.30±3.50 24.60±0.63 5.83±0.50 5.88±1.50 32.80±2.10 29.20±1.30 6.20±1.20血糖控制一般組(n=179) 91/88 52.30±4.58 25.58±0.32 7.20±0.40 7.23±2.20 36.10±0.80 30.40±0.80 7.80±1.60血糖控制不良組(n=84) 40/44 55.35±2.54 26.15±0.42 10.70±1.801)2)11.50±4.301)2)38.20±2.10 32.20±2.30 8.40±0.90指標 Scr(μmol/L) AFU(U/L) TG(mmol/L)TCH(mmol/L)HDL-C(mmol/L)LDL-C(mmol/L)ADA(U/L)正常對照組(n=94) 68.30±2.60 14.85±3.64 0.72±0.42 3.80±0.61 0.96±0.21 2.56±0.32 15.37±1.57糖尿病對照組(n=434) 81.50±2.571)23.61±3.071) 0.96±0.27 5.08±1.25 1.50±0.47 2.19±0.44 23.29±2.171)血糖控制良好組(n=171) 78.60±3.20 18.35±2.54 0.93±0.23 4.24±1.26 1.43±0.42 2.42±0.57 17.52±3.37血糖控制一般組(n=179) 75.50±2.10 21.70±3.27 0.86±0.36 4.67±0.89 1.46±0.67 2.72±0.27 22.16±2.06血糖控制不良組(n=84) 90.40±2.40 30.78±3.391)2) 1.10±0.21 6.32±1.61 1.62±0.32 3.05±0.47 30.20±1.081)2)

表2 血清AFU、ADA與HbA1c、GLU相關(guān)性分析

表3 血清AFU、ADA與各項指標相關(guān)性分析

2.2 糖尿病各組和正常對照組相關(guān)指標對比 見表1。2型糖尿病患者AFU和ADA活性高于正常對照組(P＜0.05)，尤其是血糖控制不良組，AFU、ADA活性顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);雖然在血糖控制一般組和血糖控制良好組AFU和ADA比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，但是AFU、ADA活性仍高于正常對照組。以上結(jié)果表明AFU和ADA活性與血糖控制程度密切相關(guān)，血糖控制越差，AFU和ADA活性越高。

2.3 血清AFU和ADA活性與血糖控制程度相關(guān)性分析 見表2。與正常對照組血清AFU、ADA與GLU、HbA1c水平無顯著線性相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)，在糖尿病組血清 AFU、ADA與GLU、HbA1c水平有顯著直線相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)，尤其是血糖控制不良組 AFU、ADA與 GLU、HbA1c有顯著相關(guān)性(P＜0.01)，而血糖控制一般組與控制良好組AFU與GLU、HbA1c水平無顯著直線相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)。

2.4 血清AFU、ADA活性與各項指標相關(guān)性分析 見表3。由表3可知AFU和ADA活性與其他各項指標(包括受試對象性別、年齡、等)之間的相關(guān)性分析表明，AFU和ADA活性分別與FPG、HbA1c、ALT和AST呈正相關(guān)關(guān)系，有顯著的統(tǒng)計學差異。而且糖尿病患者血糖控制指標(FPG、HbA1c)與AFU和ADA活性顯著呈正相關(guān)關(guān)系。

3 討論

糖尿病患病率呈逐年上升趨勢，目前每年有400萬人因糖尿病死亡。據(jù)統(tǒng)計到2030年全世界大約有4.4億糖尿病患者〔7〕。2型糖尿病占糖尿病的90%以上，是以靶組織對胰島素敏感性降低導致胰島素相對缺乏和胰腺β細胞破壞導致胰島素絕對缺乏為特征的疾病。由于2型糖尿病發(fā)病具有隱匿性，許多病人發(fā)現(xiàn)時已處于血糖失控狀態(tài)，臨床上多以糖化血紅蛋白作為糖尿病病情控制的指標。α-L-巖藻糖苷酶(AFU)是一種溶酶體酸性水解酶，廣泛存在于人體的肝、腎、腦等組織，其生理功能是催化含有巖藻糖基的糖蛋白、糖脂和黏多糖的分解代謝，黏多糖代謝紊亂是糖尿病晚期并發(fā)癥的重要病理改變〔8〕，因此參與細胞外基質(zhì)降解的溶酶體酶的活性，與糖尿病病情進展關(guān)系密切。腺苷酸脫氨酶(ADA)是一種與能量代謝、機體細胞免疫活性有重要關(guān)系的核酸代謝酶。ADA作為細胞介導免疫活性的標志物，在淋巴結(jié)、脾和胸腺等淋巴系統(tǒng)中活性最高〔9〕。腺苷酸作為腺嘌呤核苷酸的降解產(chǎn)物，對調(diào)節(jié)和糖代謝有關(guān)的胰島素活性有重要作用〔10〕。本研究發(fā)現(xiàn)AFU和ADA活性在糖尿病患者中明顯升高，并且與糖尿病患者的血糖控制密切相關(guān)，這與國內(nèi)外許多研究結(jié)果一致〔3～6〕。因此聯(lián)合檢測AFU和ADA可以作為糖尿病患者血糖控制和病情進展的又一重要指標。

本文結(jié)果表明2型糖尿病患者AFU和ADA活性顯著升高，并且AFU和ADA活性與血糖控制程度有關(guān)。血糖控制不良組，AFU、ADA活性顯著高于正常對照組;即使血糖控制一般組和血糖控制良好組AFU和ADA比較差異無統(tǒng)計學意義，AFU、ADA活性仍高于正常對照組。由AFU和ADA水平與糖尿病患者各項指標相關(guān)性分析表明，AFU和ADA活性分別與FPG、HbA1c、ALT和AST呈正相關(guān)。糖尿病患者血糖控制指標(FPG、HbA1c)尤其是血糖控制不良組，與AFU和ADA活性呈顯著正相關(guān)。

目前糖尿病患者血清AFU升高的具體機制尚不明確，可能的原因是:(1)在糖尿病的病情進展中，由于過度氧化應激、蛋白激酶C激活和糖基化終末產(chǎn)物的形成等一系列病理生理改變導致血管內(nèi)皮的損傷〔11，12〕。血管內(nèi)皮的損傷會引起某些生長因子和細胞因子的釋放，這可以引起黏多糖生物合成的改變。AFU作為溶酶體酸性水解酶，其活性改變或許與黏多糖代謝紊亂有關(guān)。(2)持續(xù)高血糖激活多元醇旁路途徑，醛糖還原酶活性增加，山梨醇生成增加，在細胞內(nèi)大量聚集;而AFU主要存在于細胞溶酶體中，山梨醇對溶酶體有很強的親和力，可導致溶酶體破壞，使AFU釋放入血〔3〕。因此在臨床診斷治療中，測定AFU的活性可作為糖尿病患者血糖控制的又一個良好觀察指標。

ADA可以調(diào)節(jié)細胞內(nèi)外腺苷酸的濃度，腺苷酸通過影響葡萄糖轉(zhuǎn)運、脂質(zhì)合成和丙酮酸激酶的活性刺激胰島素活性。ADA是調(diào)節(jié)胰島素生物活性的重要酶。Prakash等〔5〕提出2型糖尿病患者ADA活性升高是由于自身免疫的改變。本文結(jié)果表明ADA活性與血糖水平呈正相關(guān)關(guān)系。糖尿病患者持續(xù)高血糖水平可能與 DPP-Ⅳ活性升高有關(guān)〔13～15〕。DPP-Ⅳ作為ADA結(jié)合蛋白，血糖升高可以激活DPP-Ⅳ-ADA復合物，從而導致ADA活性的升高。ADA活性越高，腺苷酸促進葡萄糖吸收就會受到抑制。同時由于ADA代謝終產(chǎn)物是尿酸，ADA活性升高或許與糖尿病早期腎損害有關(guān)。

因此，應用和推廣AFU作為2型糖尿病血糖控制和病情監(jiān)測的指標，具有重要的意義。因與ADA無明顯相關(guān)可互相判斷病情進展，聯(lián)合檢測更有助于對患者病情進展程度的判斷。

綜上所述，血清AFU、ADA與FPG和HbA1c聯(lián)合檢測成為2型糖尿病病血糖制和病情監(jiān)測好壞的重要指標，為臨床提供了近期、縱向、全程的血糖水平信息，對觀察2型糖尿病患者的發(fā)展轉(zhuǎn)歸有一定的指導意義，為指導臨床提供更為合理的治療方案。

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