董海偉
(許昌市人民醫(yī)院輸血科 河南許昌 461000)
目前,凝聚胺技術(shù)在臨床的應(yīng)用較為廣泛,該技術(shù)主要應(yīng)用于不完全抗體的檢測(cè)。它主要是通過(guò)對(duì)RBC唾液酸的中和,使其產(chǎn)生非特異凝聚,并具有可逆性[1]。凝聚胺的最大優(yōu)勢(shì)在于,對(duì)IgG抗體與配血的檢出能達(dá)到與鹽水介質(zhì)試驗(yàn)幾乎相同的速度,對(duì)溶血性的輸血反應(yīng)具有很好的預(yù)防效果[2]。但是,該法在臨床的輸血檢驗(yàn)中仍存在相對(duì)局限性,還需通過(guò)臨床實(shí)踐進(jìn)行不斷完善。本文主要對(duì)輸血檢驗(yàn)中凝聚胺技術(shù)的臨床應(yīng)用進(jìn)行探討,現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1 一般資料 血樣本包括:臨床輸血中存在抗體又反復(fù)輸血的血液標(biāo)本200例;臨床輸血中配血不合格的血液標(biāo)本150例;正常獻(xiàn)血與輸血反應(yīng)者的血液標(biāo)本50例。
1.2 試驗(yàn)材料選擇
1.2.1 試驗(yàn)儀器:日產(chǎn)SeromaticII型離心機(jī)。試管規(guī)格為12 mm×75 mm。
1.2.2 試驗(yàn)試劑:凝聚胺:瑞士達(dá)亞美公司;氯化鈉:成都臨江化工廠生產(chǎn);葡萄糖:東北制藥廠生產(chǎn),分析純;檸檬酸三鈉:北京化工廠生產(chǎn),分析純;疊氮鈉:上海城關(guān)化工廠生產(chǎn),化學(xué)純;乙二胺四乙酸二鈉:成都化學(xué)試劑廠,分析純??笰B與抗-D型血清為研究所自制。
1.3 方法 人工凝聚胺具體試驗(yàn)方法與試劑的配制詳見(jiàn)《輸血醫(yī)學(xué)》的相關(guān)方法,鹽水介質(zhì)與木瓜酶以及抗球蛋白試驗(yàn)等常規(guī)配血技術(shù)參見(jiàn)《血型工作手冊(cè)》的相關(guān)方法。
2.1 凝聚胺技術(shù)的特異性與非特異性凝集的消失以及對(duì)應(yīng)凝集的消失時(shí)間之間的相互關(guān)系 400位正常人中,10 s內(nèi),非特異性凝聚消失的人數(shù)有214人,占總?cè)藬?shù)的53.5%;20 s內(nèi),非特異性凝聚消失的人數(shù)有186人,占總?cè)藬?shù)的46.5%。400位正常人的非特異性凝聚在3 min之內(nèi)都已消失。400位正常人的特異性凝聚在3 min以后都未消失,見(jiàn)表1。
表1 凝聚胺技術(shù)的特異性與非特異性凝集的消失以及對(duì)應(yīng)凝集的消失時(shí)間之間的相互關(guān)系[n,(%)]
2.2 凝聚胺技術(shù)與常規(guī)技術(shù)①的疑難配血與抗體篩選以及輸血反應(yīng)的檢出對(duì)比 經(jīng)過(guò)凝聚胺技術(shù)檢出的有抗體又反復(fù)輸血的血液標(biāo)本、配血不合格的血液標(biāo)本、正常獻(xiàn)血與輸血反應(yīng)者的血液標(biāo)本82份,同常規(guī)的試驗(yàn)技術(shù)的對(duì)比情況,見(jiàn)表2。
表2 凝聚胺技術(shù)與常規(guī)技術(shù)的疑難配血與抗體篩選以及輸血反應(yīng)的檢出對(duì)比(n)
2.3 常規(guī)技術(shù)與凝聚胺技術(shù)對(duì)82份疑難標(biāo)本所檢出的抗體情況 在鑒定編號(hào)5中的4份Rh抗體標(biāo)本時(shí),采取常規(guī)的抗球蛋白技術(shù)所需的血清量是人工凝聚胺技術(shù)所需血清量的10倍,而實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻不存在任何差異。在鑒定編號(hào)1中的青霉素抗體標(biāo)本時(shí),在凝聚胺技術(shù)下,凝聚胺技術(shù)肉眼就能識(shí)別出2+凝聚,而常規(guī)技術(shù)必須要以顯微鏡進(jìn)行輔助觀察才能識(shí)別,見(jiàn)表3。
在輸注血液的過(guò)程中,應(yīng)注意同種反應(yīng)問(wèn)題,同種反應(yīng)對(duì)輸血的有效性有著重要作用[3]。在輸血后,抗原細(xì)胞遭到破壞,還容易引發(fā)溶血性輸血反應(yīng),嚴(yán)重的會(huì)對(duì)患者的生命安全構(gòu)成威脅[4]。目前,凝聚胺技術(shù)是臨床上對(duì)RBC、IgG抗體檢出的最好的方法之一,其操作簡(jiǎn)單、靈敏度高,不但能對(duì)血型與交叉配血進(jìn)行鑒定,還能有效篩選抗體,應(yīng)用于溶血性貧血。一般情況下,臨床常采取RBC凝集試驗(yàn)來(lái)證實(shí)機(jī)體產(chǎn)生的特異性抗原體反應(yīng)[5]。得益于凝聚胺技術(shù)的可逆凝集反應(yīng),臨床上常以特異性反應(yīng)以及非特異性反應(yīng)的消失時(shí)間來(lái)進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果的判斷,且結(jié)果具有相當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確性,這無(wú)疑對(duì)假陰性與假陽(yáng)性的預(yù)防提供了非常重要的依據(jù)。根據(jù)本研究所選實(shí)驗(yàn)儀器與材料試劑,對(duì)400名正常人以凝聚胺技術(shù)進(jìn)行試驗(yàn),400位正常人的非特異性凝聚在21 s之后都已消失。而相關(guān)文獻(xiàn)記載的10 s內(nèi)非特異性凝聚沒(méi)有消失即可判定為陽(yáng)性,本研究中,有46.5%的人都可被判定為假陽(yáng)性,這與事實(shí)相違背,是不成立的。本研究中的試驗(yàn)設(shè)備和材料以及試劑等試驗(yàn)條件都是自己創(chuàng)造和準(zhǔn)備的,以凝聚胺技術(shù)應(yīng)用于正常人非特異性凝集和特異性凝集的消失與對(duì)應(yīng)的消失時(shí)間之間的相互關(guān)系研究,旨在得出試驗(yàn)觀察時(shí)間,對(duì)假陽(yáng)性做出了有效預(yù)防,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確,客觀。
表3 常規(guī)技術(shù)與凝聚胺技術(shù)對(duì)82份疑難標(biāo)本所檢出的抗體對(duì)比
本研究中,對(duì)82份有抗體又反復(fù)輸血的血液標(biāo)本、配血不合格的血液標(biāo)本、正常獻(xiàn)血與輸血反應(yīng)者的血液標(biāo)本進(jìn)行了常規(guī)技術(shù)檢出與凝聚胺技術(shù)檢出結(jié)果的對(duì)比,通過(guò)對(duì)比結(jié)果發(fā)現(xiàn),凝聚胺技術(shù)比常規(guī)技術(shù)的檢測(cè)更為靈敏,因此,確立了其重要的臨床免疫血液學(xué)的地位,這與以鹽水立即離心技術(shù)作為主要試驗(yàn)的國(guó)內(nèi)臨床配血互補(bǔ)。因?yàn)辂}水配血只能檢出ABO抗體,而對(duì)IgG抗體卻無(wú)法正常檢出,從而容易導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng),而凝聚胺技術(shù)卻很好地彌補(bǔ)了這一缺陷。
綜上所述,凝聚胺技術(shù)比傳統(tǒng)配血技術(shù)的反應(yīng)更加快速,靈敏度更高,操作也更加簡(jiǎn)便,對(duì)于臨床輸血中溶血性輸血反應(yīng)癥狀具有很好的預(yù)防作用,在臨床輸血中應(yīng)廣泛應(yīng)用。
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