肖 翔，張偉龍，潘理想，張達(dá)秀

（廣東省東莞市塘廈醫(yī)院檢驗(yàn)科 523721）

DXI800是美國(guó)Beckman公司推出的全自動(dòng)磁性微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的不同，其檢測(cè)方法分為競(jìng)爭(zhēng)法和雙抗體夾心法兩種，其中每種方法又分為一步法和兩步法。根據(jù)ISO15189和美國(guó)CAP的要求，新的檢測(cè)系統(tǒng)在用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)之前需要對(duì)其分析性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。本研究在每一種檢測(cè)方法中選擇一個(gè)項(xiàng)目作為代表（雌二醇為兩步競(jìng)爭(zhēng)法、促卵泡生成素為兩步夾心法、泌乳素為一步夾心法、三碘甲狀腺原氨酸為一步競(jìng)爭(zhēng)法），應(yīng)用臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）頒布的《臨床實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè)試驗(yàn)的初步評(píng)價(jià)批準(zhǔn)指南》第2版（EP10-A2）對(duì)這4個(gè)項(xiàng)目的分析性能進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)標(biāo)本 伯樂(lè)公司生產(chǎn)的Lyphochek免疫分析質(zhì)控物高、低兩個(gè)水平的質(zhì)控品，高值質(zhì)控品（批號(hào)40253，有效期2014年2月28日），低值質(zhì)控品（批號(hào)40251，有效期2014年2月28日），中值質(zhì)控品由高值質(zhì)控品和低值質(zhì)控品等比例混合而成。雌二醇（E2）均值：高值650pg／mL，低值150pg／mL。促卵泡生成素（FSH）均值：高值6.58mIU／mL，低值42mIU／mL。泌乳素（PRL）均值：高值4.7ng／mL，低值33ng／mL。三碘甲狀腺原氨酸（TT3）均值：高值0.96ng／mL，低值3.15 ng／mL。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 美國(guó)Beckman公司Unicel DXI800全自動(dòng)磁性微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

1.2.2 試劑與校準(zhǔn)品 試劑和校準(zhǔn)品都使用美國(guó)Beckman公司的產(chǎn)品，E2試劑批號(hào)017612，有效期至2012年3月12日，校準(zhǔn)品批號(hào)919196；FSH試劑批號(hào)019511，有效期至2012年2月21日，校準(zhǔn)品批號(hào)011716；PRL試劑批號(hào)023640，有效期至2012年2月28日，校準(zhǔn)品批號(hào)018583；TT3試劑批號(hào)023640，有效期至2012年2月28日，校準(zhǔn)品批號(hào)018583。

1.3 方法

1.3.1 在開始試驗(yàn)之前，參加試驗(yàn)操作的人員必須進(jìn)行儀器的操作培訓(xùn)并熟練掌握儀器的檢測(cè)操作、日常維護(hù)保養(yǎng)和常見(jiàn)故障的排除等技能，熟悉性能驗(yàn)證方案。

1.3.2 開始試驗(yàn)之前按照廠家說(shuō)明使用校準(zhǔn)品校準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)，在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程不應(yīng)該對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行再校準(zhǔn)。在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中按照廠家說(shuō)明進(jìn)行日常維護(hù)和保養(yǎng)。

1.3.3 根據(jù)試驗(yàn)要求計(jì)算試驗(yàn)樣品的用量，嚴(yán)格按照質(zhì)控品說(shuō)明書的規(guī)定溶解質(zhì)控品。并按照1∶1的比例用高值質(zhì)控品和低值質(zhì)控品配制出中值質(zhì)控品。一次性溶解和配制出整個(gè)試驗(yàn)所需的試驗(yàn)樣品用量，避免溶解質(zhì)控品過(guò)程帶來(lái)的誤差。

1.3.4 將高、中、低3個(gè)水平的質(zhì)控品上機(jī)檢測(cè)，檢測(cè)順序?yàn)橹?、高、低、中、中、低、低、高、高、中（其中第一個(gè)中值標(biāo)本為試驗(yàn)啟動(dòng)的灌注樣品，其值不進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析），這個(gè)順序不應(yīng)該改變、插入或中斷。無(wú)論何種原因，如果最后的9個(gè)標(biāo)本中任何一個(gè)被拒絕、丟失或沒(méi)有報(bào)告，整個(gè)過(guò)程需要重做。按照上述順序連續(xù)測(cè)定5d，得到高、中、低值各15個(gè)。

1.3.5 每天試驗(yàn)結(jié)束后都需要對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步判斷，看是否有明顯的離群點(diǎn)，若有需要盡最大努力找出原因，繼續(xù)試驗(yàn)。

1.3.6 偏倚和總不精密度的判斷使用基于生物學(xué)變異的質(zhì)量規(guī)范［1］。（1）允許偏倚：E2、FSH、PRL、TT3 4個(gè)項(xiàng)目的允許偏倚分別為8.3%、7.8%、15.4%、4.2%。（2）允許總不精密度：E2、FSH、PRL、TT3 4個(gè)項(xiàng)目的允許總不精密度分別為11.3%、5.1%、3.5%、4.4%。（3）截距、斜率、攜帶污染率、非線性、線性漂移：計(jì)算所得的校正值進(jìn)行t檢驗(yàn)，t檢驗(yàn)值介于－4.6到4.6之間表示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可接受。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 每天的原始數(shù)據(jù)記錄在EP10-A2文件提供的原始數(shù)據(jù)記錄表上，錄入Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié) 果

2.1 總不精密度 根據(jù)EP10-A2提供的計(jì)算表格和公式計(jì)算總不精密度，4個(gè)項(xiàng)目的總不精密度結(jié)果見(jiàn)表1和表2。

2.2 偏倚分析 計(jì)算各濃度試驗(yàn)樣品5d檢測(cè)結(jié)果的均值，以廠商提供的各濃度質(zhì)控品的均值為靶值，計(jì)算二者的差值，再計(jì)算差值的百分偏倚，結(jié)果見(jiàn)表1和表2。

2.3 截距、斜率、非線性、攜帶污染率、線性漂移的回歸分析結(jié)果見(jiàn)表3和表4。

表1 E2和FSH總不精密度和偏倚計(jì)算

表2 PRL和TT3總不精密度和偏倚計(jì)算

表3 E2和FSH截距、斜率、攜帶污染率、非線性、漂移計(jì)算

表4 PRL和TT3截距、斜率、攜帶污染率、非線性、漂移計(jì)算

3 討 論

近年來(lái)隨著實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的發(fā)展，質(zhì)量意識(shí)已經(jīng)深入廣大檢驗(yàn)人的心中，根據(jù)ISO15189的規(guī)定實(shí)驗(yàn)室應(yīng)評(píng)估所選方法和程序，在用于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)之前應(yīng)證實(shí)其可給出滿意的結(jié)果，因此在新的分析系統(tǒng)實(shí)施臨床標(biāo)本的檢測(cè)之前需要對(duì)其分析性能進(jìn)行評(píng)價(jià)［2－5］。本文的研究對(duì)象DXI800是新購(gòu)入的配套檢測(cè)系統(tǒng)，廠家在出廠之前已經(jīng)對(duì)其進(jìn)行了嚴(yán)格的分析性能評(píng)價(jià)，其性能參數(shù)已通過(guò)試劑說(shuō)明書給出。實(shí)驗(yàn)室如果再使用EP5－A、EP9-A等文件來(lái)對(duì)分析系統(tǒng)的精密度和準(zhǔn)確度等性能指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)就會(huì)延長(zhǎng)分析系統(tǒng)投入使用的時(shí)間，且試驗(yàn)過(guò)程需要耗費(fèi)大量的人力和物力。EP10-A2提供了一個(gè)具有操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短、評(píng)價(jià)參數(shù)多的試驗(yàn)方案，可以快速地對(duì)分析系統(tǒng)的分析性能進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，可以縮短分析系統(tǒng)投入使用的周期。

在使用EP10-A2進(jìn)行檢測(cè)系統(tǒng)性能的初步評(píng)價(jià)時(shí)，需要嚴(yán)格按照廠家的說(shuō)明書進(jìn)行操作，因?yàn)橹兄蒂|(zhì)控品是通過(guò)高值和低值質(zhì)控品等比例混合而成的，且混合后的理論值將作為靶值使用，故在混合的時(shí)候特別需要注意吸樣體積的準(zhǔn)確。在開始試驗(yàn)之前應(yīng)該根據(jù)試驗(yàn)的需要計(jì)算出試驗(yàn)樣品的用量，最好能多制備一些以便在出現(xiàn)離群值時(shí)重復(fù)測(cè)試。如果使用溶解干粉質(zhì)控品最好在穩(wěn)定期內(nèi)一次性溶解足夠的量，避免溶解質(zhì)控品帶來(lái)的誤差。如果使用液體質(zhì)控品最好統(tǒng)一每次溶解的時(shí)間、溫度和復(fù)溶操作。

本文的研究對(duì)象為配套檢測(cè)系統(tǒng)，且為新品，通過(guò)EP10－A2方案對(duì)其進(jìn)行初步性能評(píng)價(jià)后證實(shí)了廠家試劑說(shuō)明書介紹的分析性能，滿足本科室規(guī)定的質(zhì)量要求。分析系統(tǒng)在使用過(guò)程中應(yīng)該按照廠家的建議制定和執(zhí)行維護(hù)保養(yǎng)，定期對(duì)分析系統(tǒng)的性能進(jìn)行驗(yàn)證。

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