李平

過敏性紫癜腎炎患兒血清hs-CRP，MMP-9的表達(dá)意義

李平

目的探討過敏性紫癜腎炎患兒血清超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，金屬蛋白酶-9(MMP-9)的表達(dá)意義。方法40例過敏性紫癜腎炎患兒作為觀察組，40例無腎受累的過敏性紫癜患兒作為對(duì)照組，30例健康兒童作為健康組。測(cè)定入選人群的血清hs-CRP和MMP-9。結(jié)果觀察組和對(duì)照組患者血清hs-CRP、MMP-9明顯高于健康兒童(P<0.01)，觀察組明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。觀察組患兒24 h尿蛋白定量為(2.53±0.91)g，與患兒血清hs-CRP呈明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.6440,P<0.05)；與患兒血清MMP-9有明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.2164,P<0.05)。本次隨訪6月觀察組患兒未出現(xiàn)腎衰竭，臨床康復(fù)組和輕度尿異常組血清hs-CRP、MMP-9明顯高于活動(dòng)性腎臟病組(P<0.01，P<0.05)，并且臨床康復(fù)組hs-CRP、MMP-9明顯高于輕度尿異常組(P<0.01)。結(jié)論血清hs-CRP和MMP-9可以作為過敏性紫癜腎炎患兒病情和預(yù)后監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)。

過敏性紫癜腎炎；兒童；超敏C反應(yīng)蛋白；金屬蛋白酶-9

過敏性紫癜是一種過敏引起的，以毛細(xì)血管為主要病變的變態(tài)反應(yīng)性疾病。常常侵犯年輕人，甚至幼兒，常累及皮膚、關(guān)節(jié)、消化道、腎臟，其中病情最為嚴(yán)重又以腎臟受累為主要表現(xiàn)。過敏性紫癜腎炎本身是過敏引起腎臟的炎癥反應(yīng)，經(jīng)過近十幾年的研究，作為機(jī)體炎癥的標(biāo)志物CRP本身也是一種促炎癥介質(zhì)，并在炎癥過程主動(dòng)參與，其水平的高低與炎癥反應(yīng)的程度有關(guān)。MMP-9屬明膠酶類，主要降解Ⅳ型膠原，破壞細(xì)胞間緊密連接的穩(wěn)定性和細(xì)胞支架的完整性，產(chǎn)生損傷腎小球、腎小管的作用，對(duì)腎小球基膜的重塑可能起重要作用。本研究通過研究過敏性紫癜腎炎患兒血清hs-CRP和MMP-9的表達(dá)情況，并判斷與患兒預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 研究病例均來自2010年8月至2012年3月住院的過敏性紫癜腎炎患兒40例作為觀察組，其中男30例，女10例，年齡3歲～13歲，平均年齡(8.2±2.1)歲。另外選取單純過敏性紫癜無腎受累患兒40例作為對(duì)照組，其中男28例，女12例，年齡3歲～14歲，平均年齡(8.7±2.4)歲。入選標(biāo)準(zhǔn):①符合過敏性紫癜和過敏性紫癜腎炎診斷；采用2006年歐洲風(fēng)濕聯(lián)合會(huì)(EULAR)和兒科風(fēng)濕學(xué)會(huì)(PRES)制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：明顯的紫癜疹，可伴有一個(gè)或多個(gè)次要指征：皮膚等組織活檢顯示以IgA為主的沉淀物；彌漫性腹痛；任何關(guān)節(jié)出現(xiàn)的急性關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)癥狀；腎臟受損(血尿或蛋白尿)。②為急性期初發(fā)病例，血標(biāo)本收集前1個(gè)月內(nèi)未使用過非甾體類抗炎藥、糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑。③排除合并急性感染、血小板減少性紫癜、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、川崎病等。另外選取30例來自本院門診體檢的健康兒童，其中男21例，女9例，年齡3～15歲，平均年齡(8.9±2.6)歲。在性別構(gòu)成及年齡上3組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。

1.2hs-CRP和MMP-9的測(cè)定 入院次日采晨起空腹抽取肘靜脈血3 ml，靜置4℃冰箱3 h后(2 500轉(zhuǎn)/分鐘，10 min)離心，血清留取500 μl，分兩管，置-80℃冰箱低溫保存待測(cè)。血清hs-CRP濃度檢測(cè)：試劑盒由北京佳科公司提供，采用乳膠增強(qiáng)免疫透射比濁法測(cè)定。MMP-9濃度測(cè)定：試劑盒由大連泛邦化工技術(shù)開發(fā)有限公司提供，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定，操作由專業(yè)人員按照試劑盒說明書的要求嚴(yán)格進(jìn)行操作。

1.3隨訪及預(yù)后判斷標(biāo)準(zhǔn) 按中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)腎臟病學(xué)組制定的方案治療[2]，40例過敏性紫癜腎炎患兒隨訪6個(gè)月。隨訪中均詳細(xì)記錄血壓，紫癜反復(fù)情況及伴隨癥狀(腹痛、關(guān)節(jié)腫痛等)，血尿，蛋白尿，內(nèi)生肌酐清除率。預(yù)后判斷標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)[3，4]，根據(jù)末次隨訪資料，預(yù)后分為4級(jí):①臨床康復(fù)：無臨床癥狀，尿常規(guī)正常，腎功能正常。②輕度尿異常：蛋白尿<1 g/m2/d。③活動(dòng)性腎臟?。旱鞍啄颉? g/m2/d 或高血壓，但腎小球?yàn)V過率>60 ml/min/1.73 m2。④腎衰竭：活動(dòng)性腎臟病且腎小球?yàn)V過率≤60 ml/min/1.73 m2。

2 結(jié)果

2.1三組血清hs-CRP和MMP-9的比較 經(jīng)比較觀察組和對(duì)照組患者血清hs-CRP、MMP-9明顯高于健康兒童(P<0.01)，觀察組明顯高于對(duì)照組(P<0.01)。見表1。

表1 三組血清hs-CRP和MMP-9的比較例)

與健康組比較*P<0.01，觀察組與對(duì)照組比較#P<0.01

2.2觀察組血清hs-CRP、MMP-9與24 h尿蛋白定量的相關(guān)性分析 觀察組患兒24 h尿蛋白定量為(2.53±0.91)g，與患兒血清hs-CRP呈明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.6440,P<0.05)；與患兒血清MMP-9有明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.2164,P<0.05)。

2.3觀察組患兒血清hs-CRP、MMP-9與預(yù)后的關(guān)系 本次隨訪患兒未出現(xiàn)腎衰竭，故比較前三級(jí)別，臨床康復(fù)組和輕度尿異常組血清hs-CRP、MMP-9明顯高于活動(dòng)性腎臟病組(P<0.01，P<0.05)，并且臨床康復(fù)組hs-CRP、MMP-9明顯高于輕度尿異常組(P<0.01)，見表2。

表2 觀察組患兒血清hs-CRP、MMP-9與預(yù)后的關(guān)系例)

注：與活動(dòng)性腎臟病組比較*P<0.05，**P<0.01；臨床康復(fù)組與輕度尿異常組比較##P<0.01

3 討論

過敏性紫癜病因尚不完全明確，是以小血管炎為主要病變的一種血管炎綜合征，近年來有關(guān)本病的發(fā)病機(jī)制研究方向主要涉及炎癥機(jī)制、基因易感性、凝血機(jī)制、體液免疫、細(xì)胞免疫等。研究表明急性期部分患兒血清IgA增高，IgA循環(huán)復(fù)合物可在血清中測(cè)出，皮膚活檢90%以上可見IgA及補(bǔ)體沉積。腎活檢均可見有IgA在系膜區(qū)沉積，病變可以有輕微的系膜增生到局灶硬化等多種病理改變[1]。IgA在多種促炎因子失調(diào)和T細(xì)胞功能紊亂的綜合作用下，形成在腎小球系膜區(qū)沉積的免疫復(fù)合物，通過激活補(bǔ)體發(fā)揮作用[7]；部分過敏性紫癜患兒可能與具有多種易感基因有關(guān)，而易致過敏性紫癜腎炎[8，9]。腎臟損害發(fā)生在過敏性紫癜發(fā)病2個(gè)月內(nèi)，尤其是1個(gè)月內(nèi)，1月內(nèi)高達(dá)90.63%的發(fā)病率。國外報(bào)道腎損害發(fā)生中97%患兒在起病的6個(gè)月內(nèi)[6]。

正常情況下，對(duì)維持腎臟的正常結(jié)構(gòu)和功能炎癥因子起重要作用；而炎癥因子在病理狀態(tài)下，則使腎小球病理變化加劇，腎小球組織功能和結(jié)構(gòu)異常從而發(fā)生。人類CRP是一種主要的急性期蛋白，是一種由肝細(xì)胞合成和分泌的非糖基化聚合蛋白，血漿濃度在感染和組織損傷時(shí)快速、急劇升高，可以作為一種急性損傷或炎癥刺激的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，CRP可通過加強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬和激活補(bǔ)體起到調(diào)理作用，入侵機(jī)體的病原微生物從而得到清除，發(fā)揮著重要的機(jī)體的天然免疫過程，其主要生物學(xué)作用是激活補(bǔ)體導(dǎo)致細(xì)胞裂解，結(jié)合單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞受體并使其活化，淋巴因子分泌，從而參與各種炎癥反應(yīng)。Hs-CRP是一種非特異性的炎癥血清生物標(biāo)記因子[10]。高濃度CRP損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，增加血管阻力，直接參與機(jī)體全身或局部的炎癥反應(yīng)，而且可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增生、遷移。本研究顯示過敏性紫癜腎炎患兒血清hs-CRP比非腎炎的過敏性紫癜患兒明顯升高，并且其與患兒24 h尿蛋白定量呈明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.6440，P<0.05)?？赡茉?yàn)椋^敏性紫癜刺激肝臟合成CRP，慢性炎癥反應(yīng)從而啟動(dòng)，腎小球系膜造成過度氧化、刺激腎功能損害(如細(xì)胞增殖、系膜增厚等)，而腎小球小動(dòng)脈可被CRP本身而直接，腎小球高灌注、高濾過狀態(tài)加重，造成腎臟損傷。另外，炎癥時(shí)，被激活的腎小管上皮細(xì)胞對(duì)血管細(xì)胞刺激黏附因子-1(VCAM-1)和細(xì)胞刺激黏附因子-1(ICAM-1)的表達(dá)增強(qiáng)，進(jìn)而促進(jìn)T細(xì)胞的活化和白細(xì)胞向炎癥部位的浸潤，其表達(dá)的增加進(jìn)一步加重了腎臟的損害，重要可通過血液細(xì)胞的黏附增強(qiáng)，造成相應(yīng)內(nèi)皮細(xì)胞和微血管的損傷，從而增加患兒的尿蛋白量。

MMPs主要作用是降解細(xì)胞外基質(zhì)，是一組鋅離子依賴性的蛋白水解酶。MMP-9是降解Ⅳ型膠原最主要的酶，Ⅳ型膠原是血管內(nèi)皮細(xì)胞外基質(zhì)主要成分。正常情況下MMP-9很少表達(dá)，但在細(xì)胞因子、細(xì)菌毒素等外源性及內(nèi)源性因素的刺激下，自中性粒細(xì)胞MMP-9大量釋放，血管組織結(jié)構(gòu)及基底膜從而遭到破壞，進(jìn)一步造成組織損傷[11，12]。李茜等[13]認(rèn)為過敏性紫癜形成機(jī)制可能與Ⅳ型膠原等基底膜重要成分遭到明膠酶降解，從而導(dǎo)致破壞了腎小球的結(jié)構(gòu)有關(guān)。本研究顯示過敏性紫癜腎炎患兒血清hs-CRP比非腎炎的過敏性紫癜患兒明顯升高，并且其與患兒24 h尿蛋白定量呈明顯正相關(guān)關(guān)系(r=0.2164,P<0.05)。

我們對(duì)所有患兒隨訪6月，臨床康復(fù)組和輕度尿異常組血清hs-CRP、MMP-9明顯高于活動(dòng)性腎臟病組(P<0.01，P<0.05)，并且臨床康復(fù)組hs-CRP、MMP-9明顯高于輕度尿異常組(P<0.01)?？梢酝茢嗷純貉録s-CRP、MMP-9與患兒的預(yù)后有密切關(guān)系。由于本研究采納病例較少，可能出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的偏差，希望同道們繼續(xù)研究，為紫癜腎炎患兒的病情監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷提供依據(jù)。

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Thevalueofhs-CRPandMMP-9inseruminchildrenwithallergicpurpuranephritis

LIPing.

Thepeople’shospitalinRizhaocity,shandong,276800

ObjectiveTo study the value of high sensitivity C-reactive protein(hs-CRP)and matrix met alloproteinase-9(MMP-9)in serum in children with allergic purpura nephritis.Methods40 children with allergic purpura nephritis were enrolled into the observation group,40 children with allergic purpura non-nephritis were enrolled into the control group and 30 healthy children were enrolled into the healthy group.The hs-CRP and MMP-9 in serum were detected.ResultsThe hs-CRP and MMP-9 in the observation group and the control group were higher than these in the healthy group(P<0.01). The hs-CRP and MMP-9 in the observation group were higher than these in the control group(P<0.01). 24-hour urinary protein in the observation group was(2.53±0.91)g,which had a positive correlation with hs-CRP(r=0.6440,P<0.05)and a positive correlation with MMP-9(r=0.2164,P<0.05).They were followed up for six months.The hs-CRP and MMP-9 in the clinical rehabilitation group and mild urinary abnormalities group were higher these in the activities kidney disease group(P<0.01,P<0.05). The hs-CRP and MMP-9 in the clinical rehabilitation group were higher these in mild urinary abnormalities group(P<0.01).ConclusionSerum hs-CRP and MMP-9 can be used as an important indicator of allergic purpura nephritis in children with the disease and prognostic monitoring.

Allergic purpura nephritis; Children; Hs-CRP；MMP-9

276800 日照市人民醫(yī)院