馮玉華 林宇靜

CyclinD1、Cdk4在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與意義

馮玉華 林宇靜

目的探討CyclinD1、Cdk4在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與意義。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)，檢測(cè)20例正常子宮內(nèi)膜及20例不典型增生子宮內(nèi)膜和40例子宮內(nèi)膜癌中的CyclinD1與Cdk 4蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果CyclinD1與Cdk 4的陽性表達(dá)在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌中依次增加，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與子宮內(nèi)膜癌的分化程度，Dukes分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論CyclinD1與Cdk 4蛋白的過度表達(dá)可能在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移中起重要作用，對(duì)判斷子宮內(nèi)膜癌的惡性程度具有一定的臨床意義，還可能作為一種有價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。

子宮內(nèi)膜癌; CyclinD1; Cdk 4;免疫組織化學(xué)

子宮內(nèi)膜癌起源于子宮內(nèi)膜腺體的惡性腫瘤，是最常見的女性生殖系統(tǒng)腫瘤之一，是導(dǎo)致死亡的第三位常見婦科惡性腫瘤，其發(fā)病率亦逐年升高，目前僅次于宮頸癌，居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的第二位。人體腫瘤是一種細(xì)胞周期性疾病，其中細(xì)胞周期素D1(CyclinD1)和細(xì)胞周期依賴激酶4(cyclindependent kinase 4，Cdk 4)被認(rèn)為是重要的細(xì)胞周期因子。CyclinD1可以和Cdk 4結(jié)合形成CyclinD1/ Cdk 4復(fù)合物，作為細(xì)胞周期的正向調(diào)節(jié)因子，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖，從而參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。本研究擬檢測(cè)cyclinD1和Cdk 4蛋白在子宮內(nèi)膜癌的表達(dá)變化，以探討兩者在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移中的作用。

1 資料與方法

1.1組織標(biāo)本 選取2005年6月至2012年6月中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院病理科保存的資料完整的40例子宮內(nèi)膜癌為實(shí)驗(yàn)組，同時(shí)選同期20例正常子宮內(nèi)膜及20例不典型增生子宮內(nèi)膜作為對(duì)照組，全部病例均經(jīng)手術(shù)切除和常規(guī)病理證實(shí)。

1.2方法 CyclinD1單抗、Cdk4單抗、SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自武漢博士德公司。采用標(biāo)準(zhǔn)化的SP法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色, 同時(shí)以PBS代替一抗作空白對(duì)照,以已知的結(jié)腸癌作陽性對(duì)照。

1.3結(jié)果判斷 以細(xì)胞中相應(yīng)部位出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。Cdk4、CyclinD1陽性著色定位于細(xì)胞核。兩名病理醫(yī)生隨機(jī)抽取20個(gè)高倍視野，按陽性細(xì)胞所占百分比并參考著色強(qiáng)度分級(jí)如下：(-)：陽性細(xì)胞數(shù)<10%；(+)：陽性細(xì)胞數(shù)10%～24%；(++)：陽性細(xì)胞數(shù)25%以上。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 13.0軟件包, 采用χ2檢驗(yàn),P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

CyclinD1在子宮內(nèi)膜癌組織中陽性表達(dá)率24/40(60.0%)與正常子宮內(nèi)膜組織中陽性表達(dá)率2/20(10.0)及不典型子宮內(nèi)膜組織中陽性表達(dá)率7/20(35.0) 對(duì)比有顯著性差異(P<0.05)。Cdk4在子宮內(nèi)膜癌組織中陽性表達(dá)率26/40(65.0%)與正常子宮內(nèi)膜組織中陽性表達(dá)率2/20(10.0)及不典型子宮內(nèi)膜組織中陽性表達(dá)率8/20(40.0) 對(duì)比有顯著性差異(P<0.05)。(見表1)

CyclinD1陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌分化程度低，Dukes分期晚及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)，Cdk4陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌分化程度低，Dukes分期晚關(guān)系密切(P<0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切(P<0.05)。見表2。

表1 cyclinD1和Cdk 4蛋白在不同的子宮內(nèi)膜中的表達(dá)情況(例，%)

表2 CyclinD1、Cdk4的表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系(例，%)

3 討論

腫瘤被認(rèn)為是一種細(xì)胞周期性疾病，細(xì)胞周期存在G1/S期和G2/M期兩個(gè)關(guān)鍵的調(diào)節(jié)位點(diǎn)，其中以G1/S位點(diǎn)尤為重要，他可以決定細(xì)胞是繼續(xù)增殖抑或進(jìn)入G0期還是永久的離開細(xì)胞周期進(jìn)入終末分化及死亡。

Cdk4蛋白是CDKS蛋白家族中重要一員，其含量及活化程度在細(xì)胞增殖周期由G1期向S過渡過程中起限速作用。同時(shí)Cdk4是一種癌基因[1]，其異常表達(dá)可促進(jìn)腫瘤的發(fā)展，與在良惡性腫瘤組織中的表達(dá)有明顯的差異，提示有作為腫瘤標(biāo)志物的可能性，為腫瘤的早期診斷提供依據(jù)。有研究表明Cdk4在其他腫瘤中有過表達(dá)，如膀胱癌，皮膚癌，食管癌，乳腺癌，胰腺癌，肺小細(xì)胞癌，脂肪肉瘤，黑色素瘤等。有學(xué)者報(bào)道，Cdk4能促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生，持續(xù)高水平的Cdk4蛋白的表達(dá)使癌細(xì)胞的增殖活性維持在較高的水平，并認(rèn)為乳腺癌患者有可能從抑制Cdk4蛋白的治療中獲益[2]。Cdk4能特異地與CyclinD1結(jié)合形成CyclinD1/Cdk4復(fù)合物，引起一系列的G1-S轉(zhuǎn)變和S期行進(jìn)有關(guān)的靶分子的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞完成DNA復(fù)制[3]。促進(jìn)細(xì)胞從G期向S期的轉(zhuǎn)化，促進(jìn)細(xì)胞的增殖，從而參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，并影響腫瘤的生物學(xué)行為。有學(xué)者應(yīng)用免疫組織研究CyclinD1、Cdk4在喉癌中過表達(dá)，且陽性表達(dá)與腫瘤大小及臨床分期明顯相關(guān)[4]。有報(bào)道:CyclinD1和Cdk4不僅參與胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展，且和胰腺癌的臨床病理參數(shù)及預(yù)后有密切的關(guān)系[5]。

本研究Cdk4、CyclinD1的表達(dá)呈現(xiàn)出明顯的趨勢(shì)性，子宮內(nèi)膜癌組最高,子宮內(nèi)膜不典型增生組次之,正常內(nèi)膜組最低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明Cdk4、CyclinD1的過度表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的惡性轉(zhuǎn)化有關(guān)，Cdk4、CyclinD1蛋白可能參與子宮內(nèi)膜由良性演變?yōu)閻盒缘倪^程。Cdk4、CyclinD1陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌分化程度，Dukes分期、與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系，表明Cdk4、CyclinD1的過度表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的惡性轉(zhuǎn)化及侵襲行為有關(guān)。從而可以認(rèn)為CyclinD1和Cdk4不僅參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展，且和子宮內(nèi)膜癌的臨床病理參數(shù)及預(yù)后有密切的關(guān)系。推測(cè)CyclinD1的表達(dá)參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲與轉(zhuǎn)移,可以作為早期診斷子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)指標(biāo)。而Cdk4的高表達(dá),則通過Cdk4途徑在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲與轉(zhuǎn)移過程中起重要的協(xié)同作用，兩者相互促進(jìn)，相互協(xié)同，共同影響子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為。所以,通過連續(xù)觀測(cè)子宮內(nèi)膜組織中Cdk4、CyclinD1的表達(dá),可能對(duì)子宮內(nèi)膜病變的監(jiān)測(cè)起到一定的作用，可作為臨床早期診斷和科學(xué)評(píng)論腫瘤預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療的指標(biāo)。

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CyclinD1andCdk4ProteinsExpressioninEndometrialCarcinomaanditssignificance

FENGYu-hua,LINYu-jing.

PopulationandFamilyplanningservicestationTheFifthHospitalAffiliatedtosunYat-senUniversity,zhuhai,Guangdong519000,China

ObjectiveTo study the expression of CyclinD1and Cdk 4 proteins in endometrial carcinoma and its significance.MethodsThe expression of CyclinD1and Cdk 4 proteins were tested by S-P immunohistochemistry on tissues of normal endometrium (20 cases)，atypical endometrial hyperplasia (20 cases) and endometrial carcinoma (40 cases).ResultsThe positive expression of CyclinD1and Cdk 4 in normal endometrial atypical endometrial hyperplasia and endometrial cancer in turn increase.A statistically significant difference between groups(P<0.05)，And the differentiation of endometrial carcinoma.Dukes staging and lymph node metastasis were positively related(P<0.05).ConclusionCyclinD1、 Cdk 4 and excessive protein expression may be in endometrial cancer occurrence, development, invasion and metastasis plays an important role, the judgment of the endometrial carcinoma malignant degree has a certain clinical significance, but also may be as a valuable tumor markers.

Endometrial cancer； CyclinD1； Cdk 4； Immunohitochemistry

519000 廣東珠海斗門區(qū)人口和計(jì)劃生育報(bào)務(wù)站(馮玉華)；珠海市中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院病理科(林宇靜)

林宇靜