譚 艷,韓曉芳,賈海琴
(內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院 檢驗科,內(nèi)蒙古 呼和浩特010017)
尿液酶及微量蛋白的分析檢測,做為一種無創(chuàng)傷性檢驗,在臨床腎臟疾病的早期診斷起著重要的作用[1-2]。本文對120名健康成人尿海藻糖酶(trehalase,T)、尿 N-乙酰-β-D 氨基葡萄糖苷酶 (N-acetyl-D-glucosaminidase,NAG)、r-谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)3種尿酶及尿β2-微球蛋白(β2-MG)進行了研究分析。
1.1 病例選擇 在我院院進行健康體檢、均排除肝腎等疾病者120名,男68名,女52名,年齡18-56歲。
1.2 檢測方法
1.2.1 標(biāo)本采集 留晨尿,離心后進行檢測。檢測儀器:OLYMPUS AU2700
1.2.2 尿T測定 采用Sasai-Takedatsu M[3]測定方法,即將尿液標(biāo)本經(jīng)過SephadexG-25凝膠層析柱除去內(nèi)源性葡萄糖后加入海藻糖,海藻糖被海藻糖酶催化分解生成葡萄糖,檢測生成的葡萄糖,以每小時每升尿液中釋放多少微摩爾的葡萄糖量作為海藻糖酶的活性濃度(μmol/h.L)。葡萄糖測定采用葡萄糖氧化酶和過氧化物酶偶聯(lián)法,試劑由北京中生公司提供。
1.2.3 尿 NAG(IU/L)測定采用比色法測定,尿β2-MG(mg/L)采用免疫比濁法測定。由于尿β2-MG受標(biāo)本存放時間、溫度及pH的影響,因此標(biāo)本采集后用1mol/L的NaOH調(diào)節(jié)到pH7-9并及時在2h內(nèi)進行檢測[4]。尿 GGT(U/L)采用酶速率法測定;尿肌酐(g/L)采用速率比色法測定,試劑由OLYMPUS公司提供。檢測儀器:OLYMPUS AU2700。
1.2.4 為了消除尿量變化對檢測數(shù)據(jù)的影響,尿T、NAG和GGT結(jié)果與尿肌酐(Cr)比值計算。
1.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進行正態(tài)性檢驗,呈正態(tài)分布數(shù)據(jù)比較用t檢驗,呈偏態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)表示,數(shù)據(jù)比較用非參數(shù)秩和檢驗(Mann-Whitney檢驗)。P<0.05為具有顯著性差異。
2.1 120例健康者尿T、NAG 、GGT、β2-MG各項目檢測結(jié)果
尿T和β2-MG呈正偏態(tài)分布(Z=1.124、1.12;P=0.16、0.162),結(jié)果分別為6.95±3.92 μmol/h.gCr、0.14±0.09(mg/gCr);尿 NAG、GGT呈偏態(tài)分布(Z=1.626、1.369;P=0.01、0.047),結(jié)果分別為6.2(5.3-7.7)、33.4(18.5-43.4)(U/gCr)[中位數(shù)(四分位數(shù))]
2.2 120例健康者按性別分兩組,兩組尿T、NAG、GGT、β2-MG檢測結(jié)果男女間比較見附表1。
表1 不同性別尿T、NAG、GGT、β2-MG檢測結(jié)果
3.1 尿海藻糖酶為近似正態(tài)分布,男女間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,按照95%的的參考范圍(±1.96s)為0-14.6μmol/h.gCr。
3.2 NAG為偏態(tài)分布,男女間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,第95 百分位數(shù)為 11.2;其參考范圍為 0-11.2 U/gCr。
3.3 GGT為偏態(tài)分布,男女間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,第95百分位數(shù)為56.6,其正常參考范圍為0-56.6 U/gCr。
3.4 尿β2-MG為正偏態(tài)分布,男女間差異無統(tǒng)計學(xué)意義,按照95%的參考范圍(±1.96s)為0-0.32 U/gCr。
尿海藻糖酶是近幾年發(fā)展的新的近端腎小管損害指標(biāo),它僅產(chǎn)生于近端腎小管和小腸黏膜上皮細胞,由于在正常體液時帶有大量負(fù)電荷,血中濃度低、分子量大,故不能從腎小球濾過。因此,尿中海藻糖酶只源于近端腎小管上皮細胞。在腎小管上皮細胞受損時就會發(fā)生改變,即能早期、敏感地反映近端腎小管上皮細胞的損害[5,6]。NAG來源于近端小管上皮細胞的溶酶體,當(dāng)腎臟實質(zhì)性病變時 腎小管上皮細胞的破壞可使尿中NAG活性顯著增高,對于腎小管間質(zhì)病變NAG是一個很靈敏且特異性較強的反映腎實質(zhì)損傷的指標(biāo)[2,7]。β2-MG是可通過腎小球濾過的低分子量蛋白質(zhì),幾乎全部被近曲小管重吸收,在近端腎小管損傷時尿β2-MG升高[2,7,8]。人體大多臟器含豐富的 GGT,但尤以腎臟含量最高。尿GGT是一種細胞分泌酶,主要來自腎近曲小管的刷狀緣,其生理功能是催化谷胱甘肽或其他谷胱?;亩嚯牡墓劝被D(zhuǎn)移到合適的受體上去。有報道認(rèn)為GGT可作為診斷早期腎損害的依據(jù)[9]。
本研究選擇120例健康者體檢者進行了尿海藻糖酶及尿NAG、尿GGT、尿β2-MG的檢測分析,確立了尿海藻糖酶的正常參考范圍為0-14.6μmol/h.gCr、尿 NAG的正常參考范圍為0-11.2U/gCr、尿GGT的正常參考范圍為0-56.6U/gCr、尿β2-MG的正常參考范圍為0-0.32U/gCr。上述指標(biāo)正常參考范圍的確立,為其在臨床上合理應(yīng)用提供了實驗依據(jù),有助于臨床腎臟功能的判斷及腎臟損傷性疾病的診斷及治療。
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