周建華 蘇 楠

1）鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院西藥學(xué)部 鄭州 450014 2）鄭州牧業(yè)工程高等?？茖W(xué)校 鄭州 450000

1 材料和方法

1.1 研究對象 研究樣本來源于2012-09—2013-02來我院就診并進行基因檢測的250例無血緣關(guān)系的癲患者的血液樣本。其中男175 例，女75 例；年齡19～62 歲，均為漢族，所有患者均否認家族遺傳病病史。

1.2 研究方法

1.2.1 DNA 的提取：抽取患者肘靜脈血1mL（EDTA 管存放），由BaiO 公司提供的DNA 提取試劑盒進行DNA 提取。1.2.2 PCR 產(chǎn)物擴增：根據(jù)BaiO 公司提供的相關(guān)參數(shù)進行在線擴增：50℃預(yù)熱5 min，94℃預(yù)變性5 min，94℃變性25 s，48℃退火40s，72℃延伸30s，35個循環(huán)后，再在72℃條件下延伸5min。擴增產(chǎn)物待用。

1.2.3 基因分型檢測：對于PCR 擴增產(chǎn)物利用單堿基延伸結(jié)合微陣列芯片法對位點進行基因分型，采用BaiO 公司提供的分型系統(tǒng)，嚴格按照其提供的標準操作流程進行操作。1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 按Hardy-Weinberg平衡定律計算各等位基因頻率，并將所獲數(shù)據(jù)作Hardy-Weinberg定律的吻合度測驗，驗證數(shù)據(jù)的可靠性［5］，χ2檢驗檢測不同性別見基因多態(tài)性分布的差異。

表1 CYP2C19基因型代謝快慢及性別的分布 ［n（%）］

2 結(jié)果

所得數(shù)據(jù)見表1。250例患者所得實驗數(shù)據(jù)，其中＊1＊1基因型115例，占46.0%；＊1＊2基因型95例，占38.4%；＊1＊3 基因型15 例，占6.0%；＊2＊2 基因型16 例，占6.4%；＊2＊3基因型7例，占2.8%；＊3＊3基因型1例，占0.4%。另外CYP2C19基因型代謝快慢及性別的分布見表1。

3 結(jié)論

1994年，De Momis［6］等在日本美芬妥英慢代謝人群中發(fā)現(xiàn)了兩個等位基因的突變位點，分別命名為CYP2C19外顯子5突變型和CYP2C19外顯子4突變型，這兩種突變都可引起代謝酶活性的下降或缺失，因此都屬于弱代謝者［7］。我們將野生純合子的基因型定義為＊1＊1 型（強代謝型，EM）；一個位點突變的定義為＊1＊2型和＊1＊3型（中間代謝型，IM）；兩個位點均突變的定義為＊2＊2型、＊2＊3型和＊3＊3型（慢代謝性，PM）。CYP2C19全部順序包括9個外顯子，其突變或缺失可解釋99%的東方人弱代謝者及88%的白種人弱代謝者［5，7］。因此國外相關(guān)醫(yī)學(xué)組織建議對準備服用丙戊酸鈉等的患者進行CYP2C19基因多態(tài)性檢測，從而對是否用藥進行指導(dǎo)［7，9］。從實驗中我們可以看到CYP2C19基因在人群中的突變發(fā)生率很高，其中單突變個體發(fā)生率達44.4%，與文獻報道［10］的44.0%比較接近；雙突變個體發(fā)生率達到了9.6%，與文獻報道［10］的19.2%低了很多，而與另一篇文獻報道［11］的11.6%相差無幾，我們考慮到主要是由于地理環(huán)境等因素的差異所造成的。同時我們也通過統(tǒng)計分析得出CYP2C19基因多態(tài)性在男女性別之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

本次試驗的結(jié)果由于樣本量較少，結(jié)果中可能存在一定的偏差。但從現(xiàn)有的結(jié)果中我們可以看到，CYP2C19 基因多態(tài)性在河南地區(qū)分布率比較高，建議廣大臨床醫(yī)師在使用丙戊酸鈉、苯妥英鈉等涉及到該代謝酶代謝的藥物進行抗癲治療時，可以積極參考基因檢測結(jié)果，合理選擇藥物和劑量，為患者服務(wù)。同時建議盡快建立基因型與藥物代謝的關(guān)系庫，以便廣大醫(yī)護人員更好地利用資源更好地為患者服務(wù)。

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