摘要:目的:觀察六堡茶對(duì)小鼠免疫功能的影響。方法:采用正常小鼠免疫器官測(cè)定法、碳粒廓清法和自然殺傷(natural killer,NK)細(xì)胞活性測(cè)定。結(jié)果:六堡茶可明顯增加小鼠單核—巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、提高NK細(xì)胞活性,但對(duì)小鼠的胸腺、脾臟指數(shù)無(wú)明顯影響。結(jié)論:六堡茶具有增強(qiáng)小鼠非特異性免疫功能的作用。
關(guān)鍵詞:六堡茶;自然殺傷細(xì)胞;吞噬指數(shù)
中圖分類號(hào):R967文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1007-2349(2013)02-0050-02
六堡茶以原產(chǎn)于廣西梧州市蒼梧縣六堡鄉(xiāng)而得名,生產(chǎn)歷史悠久,遠(yuǎn)在唐代已有生產(chǎn),屬我國(guó)特有的茶類—黑茶;六堡茶以紅、濃、陳、醇四絕著稱,具有清暑祛濕、明目健心、幫助消化、減肥除膩、利尿解毒等功效[1],成人服用量是一次3g,一日3次。本文主要探討六堡茶對(duì)正常小鼠免疫功能的影響。
1材料
11動(dòng)物健康KM小鼠160只,體重18~22 g,雌雄兼用,廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(許可證號(hào):SCXK桂2009-0002)。
12藥品與試劑六堡茶水提物,由研究者自行提取,性狀為棕褐色浸膏(每毫升相當(dāng)于藥材187 g)。臨用時(shí)以蒸餾水配成相應(yīng)濃度使用。小牛血清,由美國(guó)Hyclone公司生產(chǎn);RPMI l640,由美國(guó)Gibco公司生產(chǎn);其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
13儀器722型分光光度計(jì)(上海分析儀器廠);二氧化碳培養(yǎng)箱(美國(guó)Queue公司);超凈工作臺(tái)(上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠);自動(dòng)酶標(biāo)儀(美國(guó)Bio-Rad公司)。
2方法
21小鼠免疫器官系數(shù)測(cè)定[2]將小鼠隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組、六堡茶低劑量組(375 g/kg)、六堡茶中劑量組(75 g/kg)、六堡茶高劑量組(15 g/kg),每組10只。除正常對(duì)照組外,各組每天ig六堡茶1次,給藥體積20 mL/kg,正常對(duì)照組ig等體積的蒸餾水,連續(xù)30 d。每周稱體重1次,根據(jù)體重調(diào)整給藥量。末次給藥后次日,小鼠稱重,頸椎脫臼處死,取胸腺、脾臟稱濕重并計(jì)算胸腺和脾臟指數(shù),胸腺或脾臟指數(shù)=胸腺或脾重(mg)/體重(g)。
22小鼠碳粒廓清實(shí)驗(yàn)[3~4]分組及給藥同21。于尾靜脈注射1:3稀釋的印度墨汁,立即計(jì)時(shí),于注入墨汁后2、10 min從眼內(nèi)眥靜脈采血20 μL,加入2 mL 01%Na2CO3溶液中,在600 nm波長(zhǎng)處測(cè)光密度OD值。將小鼠處死,取肝臟和脾臟稱質(zhì)量,按文獻(xiàn)方法計(jì)算吞噬指數(shù)α。
23NK細(xì)胞活性測(cè)定[5]分組及給藥同21。連續(xù)30d后,頸椎脫臼處死,無(wú)菌取脾,制備脾細(xì)胞懸液,用乳酸脫氫酶法測(cè)定NK細(xì)胞活性。
NK細(xì)胞活性(%)=(反應(yīng)孔OD-自然釋放孔OD)/(最大釋放孔OD-自然釋放孔OD)×100%
24統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS130軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,各項(xiàng)數(shù)據(jù)均以(Ax-G ±s )表示。
3結(jié)果
31六堡茶對(duì)小鼠免疫器官系數(shù)的影響由表1可見,各劑量組小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)與正常對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>005),表明六堡茶對(duì)小鼠免疫器官的重量無(wú)明顯影響。
32六堡茶對(duì)小鼠碳粒廓清能力的影響 由表2見,六堡茶中、高劑量能明顯增加小鼠的吞噬指數(shù)(與正常對(duì)照組比較(P<005),低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(與正常對(duì)照組比較(P>005),表明六堡茶具有促進(jìn)小鼠的單核—巨噬細(xì)胞碳粒廓清作用。
33六堡茶對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響 表3結(jié)果顯示,六堡茶高劑量組小鼠NK細(xì)胞活性明顯升高(與正常對(duì)照組比較,[FL)][SD1,1][FQ(20。175mm,X,DY-W][SQ+1mm][CD=175mm][FL(K8mm]P<005),中、低劑量組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(與正常對(duì)照組比較,P>005)。
4討論
六堡茶以原產(chǎn)于廣西梧州市蒼梧縣六堡鄉(xiāng)而得名,生產(chǎn)歷史悠久,屬我國(guó)特有的茶類—黑茶,目前有關(guān)六堡茶對(duì)免疫功能的影響研究較少。單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)是機(jī)體重要的防御系統(tǒng),它具有強(qiáng)大而迅速的吞噬、廓清異物顆粒以及清除機(jī)體內(nèi)某些有害物質(zhì)。碳粒廓清法測(cè)定單核巨噬細(xì)胞功能是典型的一種觀察免疫系統(tǒng)功能的方法[6]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,六堡茶能明顯增加小鼠單核—巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù),說(shuō)明六堡茶能增強(qiáng)小鼠的非特異性免疫功能。NK細(xì)胞存在于機(jī)體的外周血、脾臟、淋巴結(jié)和骨髓細(xì)胞中,是一類無(wú)需抗原致敏,也不依賴抗體存在,對(duì)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞具有天然殺傷作用的淋巴細(xì)胞。NK細(xì)胞活性可反映機(jī)體的非特異性免疫功能狀況[3]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與正常對(duì)照組比較,六堡茶高劑量組小鼠的NK細(xì)胞活性明顯升高,說(shuō)明六堡茶能增強(qiáng)機(jī)體的非特異性免疫功能。
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