吳芳芳，許 紋，楊樂(lè)園

(1.上海建工醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海200083;2.上海市第一人民醫(yī)院寶山分院，上海200940)

尿路感染是臨床常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)疾病。及時(shí)了解病原菌的分布和耐藥性變遷對(duì)臨床合理使用抗菌藥物具有重要的意義[1]。我們通過(guò)對(duì)尿標(biāo)本中分離的菌株進(jìn)行分析，了解尿路感染患者致病菌分布及耐藥狀況，為臨床合理選用抗菌藥物提供依據(jù)。

材料和方法

一、標(biāo)本來(lái)源

收集2011年1月1日至2012年12月31日上海建工醫(yī)院尿標(biāo)本中的臨床分離菌株，剔除同一患者相同部位中的重復(fù)菌株，重復(fù)多次送檢取第一次陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)行分析。

二、儀器與試劑

采用ATB細(xì)菌鑒定儀進(jìn)行菌種鑒定和藥物敏感性試驗(yàn)，菌種鑒定和藥敏試驗(yàn)的試劑條，均購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。

三、方法

1.標(biāo)本的采集和培養(yǎng) 按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)要求進(jìn)行。

2.細(xì)菌鑒定 采用ATB細(xì)菌鑒定儀及配套細(xì)菌鑒定試劑條進(jìn)行菌種鑒定。

3.藥物敏感性試驗(yàn) 采用ATB細(xì)菌鑒定儀及配套藥敏試劑條進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)。判定標(biāo)準(zhǔn)按美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)2012年版的規(guī)定[2]。質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC 29213)、大腸埃希菌(ATCC25922、ATCC35218)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、糞腸球菌(ATCC29212)由上海市臨床檢驗(yàn)中心提供。

4.超廣譜 β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè) 按CLSI推薦的紙片篩選法和酶抑制劑增強(qiáng)確證試驗(yàn)檢測(cè)大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌和奇異變形桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用WHONET 5.4軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

結(jié) 果

一、病原菌分布

尿標(biāo)本中共分離致病菌962株，其中革蘭陽(yáng)性菌 261株(27.1%)、革蘭陰性菌 701株(72.9%)。以大腸埃希菌分離數(shù)最多，為429株(44.6%)，其次為腸球菌屬 228 株(23.7%)、肺炎克雷伯菌83株(8.6%)。大腸埃希菌ESBLs陽(yáng)性率為63.2%，肺炎克雷伯菌ESBLs陽(yáng)性率為56.6%。見(jiàn)表 1。

表1 962株病原菌分離構(gòu)成比

二、大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

未檢出對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物耐藥的大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物的耐藥率僅為4.8%。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)第3代和第4代頭孢菌素的耐藥率分別在60%和55%左右;大腸埃希菌對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物的耐藥率為77.9%，肺炎克雷伯菌則為47.0%。見(jiàn)表2。

三、腸球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

腸球菌屬共228株，其中糞腸球菌129株，占革蘭陽(yáng)性菌的49.4%;屎腸球菌76株，占革蘭陽(yáng)性菌的29.1%。耐藥情況見(jiàn)表3。

表2 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 (%)

表3 腸球菌屬細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 (%)

四、銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性

銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為14.1%，對(duì)阿米卡星的耐藥率僅為3.1%。鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥情況較嚴(yán)重，對(duì)常用藥物的耐藥率均在40%以上。見(jiàn)表4。

表4 銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率 (%)

討 論

隨著抗菌藥物、免疫抑制劑、激素及介入性診療措施的增多，尿路感染發(fā)生率明顯升高。本研究結(jié)果顯示，泌尿道感染致病菌為革蘭陰性桿菌為主(72.9%)，主要致病菌為大腸埃希菌，占44.6%，與文獻(xiàn)報(bào)道[3-4]一致。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中 ESBLs陽(yáng)性率分別為 63.2%和56.6%，與文獻(xiàn)報(bào)道[4-5]一致。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)第3代、第4代頭孢菌素的耐藥率在53.1% ～62.9%之間，對(duì)阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦的耐藥率較低(均＜10%)。提示頭孢菌素已成為嚴(yán)重耐藥的藥物，臨床治療尿路感染應(yīng)慎重使用第3代、第4代頭孢菌素[5]。本研究結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物的耐藥率分別為77.9%、47.0%，而糞腸球菌、屎腸球菌的耐藥率分別為 72.9%和 93.3%，與文獻(xiàn)報(bào)道[7]一致。這可能與臨床經(jīng)驗(yàn)性治療首選喹諾酮類(lèi)藥物有關(guān)。因此，將喹諾酮類(lèi)藥物作為臨床治療尿路感染的一線藥物可能已不太合適。但各種藥物主要經(jīng)腎臟排泄，尿液中藥物濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)菌的最低抑菌濃度，能否應(yīng)用奎諾酮類(lèi)藥物治療泌尿系統(tǒng)感染仍需進(jìn)一步研究[8]。銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為14.1%，是除黏菌素外最敏感的藥物。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南的耐藥率為42.3%。

綜上所述，尿培養(yǎng)陽(yáng)性的致病菌以大腸埃希菌、腸球菌菌屬和肺炎克雷伯菌最為多見(jiàn)。致病菌對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物及第3代、第4代頭孢菌素耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。臨床需要密切關(guān)注細(xì)菌耐藥性變化趨勢(shì)，應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物，減少耐藥菌的產(chǎn)生。

[1]楊 青，陳 曉，孔海深，等.Mohnarin2011年度報(bào)告:尿標(biāo)本細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(24):5503-5507.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standard for antimicrobial susceptibility testing[S].M100-S22，CLSI，2010.

[3]楊 青，陳 曉，孔海深，等.Mohnarin 2010年度報(bào)告:尿標(biāo)本細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(3):476-480.

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