岳宗豪，樊鑫，趙歡，任洪偉，張旭峰，周一兵

(大連海洋大學(xué)遼寧省海洋生物資源恢復(fù)與生境修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連 116023）

雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD cDNA基因的克隆及序列分析

岳宗豪，樊鑫，趙歡，任洪偉，張旭峰，周一兵

(大連海洋大學(xué)遼寧省海洋生物資源恢復(fù)與生境修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連 116023）

根據(jù)已知多毛類Alitta succinea銅鋅超氧化物歧化酶 (Cu/Zn－SOD）基因序列設(shè)計(jì)引物，利用同源克隆及RACE方法首次從雙齒圍沙蠶Perinereis aibuhitensis中克隆得到Cu/Zn－SOD基因全長(zhǎng)cDNA序列。結(jié)果表明:雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因cDNA全長(zhǎng)870 bp，其中包括156 bp的5'端非編碼區(qū)，261 bp 3'端非翻譯區(qū)和453 bp開放閱讀框，編碼150個(gè)氨基酸;該蛋白序列具有典型的Cu2+和Zn2+結(jié)合位點(diǎn)，并具有兩處Cu/Zn－SOD蛋白家族標(biāo)簽序列。通過(guò)生物信息學(xué)分析表明，該蛋白屬于胞內(nèi)Cu/Zn－SOD，理論相對(duì)分子質(zhì)量為15 249 900，等電點(diǎn)為5.66，無(wú)信號(hào)肽和跨膜區(qū)，推測(cè)為親水性蛋白。同源性分析表明，雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD氨基酸序列與部分軟體動(dòng)物、魚類和昆蟲的Cu/Zn－SOD蛋白序列具有很高的相似性。該研究結(jié)果為后續(xù)研究Cu/Zn－SOD與環(huán)境污染物之間的劑量效應(yīng)關(guān)系奠定了基礎(chǔ)，為研究雙齒圍沙蠶機(jī)體的防御機(jī)制提供了基礎(chǔ)資料。

雙齒圍沙蠶;銅鋅超氧化物歧化酶;生物信息學(xué)分析;同源性分析

銅鋅超氧化物歧化酶 (copper－zinc superoxide dismutase，Cu/Zn－SOD）屬于超氧化物歧化酶家族，廣泛存在于真核和原核生物中。Cu/Zn－SOD一般是由2個(gè)基本相似的亞基組成的二聚體，且每個(gè)亞基含有1個(gè)銅原子和1個(gè)鋅原子［1］。其中銅與催化活性有關(guān)，銅的缺失將會(huì)導(dǎo)致其活性完全喪失，進(jìn)而危害人類和動(dòng)物體的健康，產(chǎn)生多種疾病［2－5］。Cu/Zn－SOD的主要功能是清除體內(nèi)多余的超氧陰離子自由基，保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷。由于Cu/Zn－SOD的存在，健康水生動(dòng)物體內(nèi)的活性氧自由基能夠維持在有利無(wú)害的較低水平［6］。此外，Cu/Zn－SOD還與免疫有關(guān)。Sook等［7］研究發(fā)現(xiàn)，注射脂多糖的螃蟹Callinectes sapidus體內(nèi)Cu/Zn－SOD被顯著誘導(dǎo)，表明Cu/Zn－SOD與免疫防御系統(tǒng)有關(guān)。Bao等［8］研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)海灣扇貝Argopecten irradians注射鰻弧菌后，其血細(xì)胞中Cu/Zn－SOD表達(dá)水平增加，表明Cu/Zn－SOD在對(duì)鰻弧菌的免疫反應(yīng)中可能起著重要作用。

雙齒圍沙蠶Perinereis aibuhitensis隸屬于環(huán)節(jié)動(dòng)物門Annelida、多毛綱Polychaeta，是廣泛分布于中國(guó)沿海潮間帶及河口潮灘的優(yōu)勢(shì)底棲動(dòng)物，屬于重要的經(jīng)濟(jì)多毛類［9］。由于其生活在極易富集污染物的沉積質(zhì)中，更容易受到污染物的影響，所以雙齒圍沙蠶常作為污染物暴露的指示生物。目前，已經(jīng)在軟體動(dòng)物［10－12］、節(jié)肢動(dòng)物［13－14］、脊索動(dòng)物［15－16］等中獲得了 Cu/Zn－SOD 序列，但有關(guān)雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD序列的研究國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。

從分子水平深入開展沙蠶Cu/Zn－SOD基因克隆研究，有助于探索污染物在沙蠶體內(nèi)的代謝途徑及其解毒機(jī)理，并為進(jìn)一步研究雙齒圍沙蠶的生態(tài)毒理學(xué)提供基礎(chǔ)依據(jù)和新思路。本研究中，利用同源克隆及RACE方法首次從雙齒圍沙蠶體壁組織中克隆得到Cu/Zn－SOD基因，并對(duì)該基因進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用雙齒圍沙蠶采自遼寧省盤錦市雙臺(tái)子河口，挑選體質(zhì)量為1.5～2.5 g的個(gè)體，帶回遼寧省海洋生物資源恢復(fù)與生境修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)一周。暫養(yǎng)期間，每24 h更換一次海水，水溫保持在 (19±0.5）℃，鹽度為31～32，pH為8.25±0.10。試驗(yàn)海水中 Cu(Ⅱ）、Hg(Ⅱ）、Zn(Ⅱ）、Pb(Ⅱ）和Cd(Ⅱ）的背景濃度分別為0.38、0.01、75.00、0.27、0.06 μg/L。

1.2 方法

1.2.1 總RNA的提取 剪取0.1 g雙齒圍沙蠶體壁放入預(yù)冷滅菌研缽中，加入液氮將組織迅速研磨至粉末狀，按照RNAisoTMPlus(TaKaRa公司）說(shuō)明書中的相關(guān)步驟提取總RNA。將提取的總RNA溶于DEPC處理水中，于－80℃下保存?zhèn)溆?。?0 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)總RNA的完整性，使用超微量分光光度計(jì)測(cè)定其濃度。

1.2.2 cDNA第一鏈的合成 以提取的雙齒圍沙蠶總RNA為模板，按照Reverse Transcriptase MMLV(RNase Hˉ）反轉(zhuǎn)錄試劑盒 (TaKaRa公司）說(shuō)明書進(jìn)行第一鏈的合成。cDNA第一鏈合成反應(yīng)條件如下:70℃下反應(yīng)10 min，放到冰上急冷2 min，然后在42℃下反應(yīng)60 min，70℃下反應(yīng)15 min。

1.2.3 引物設(shè)計(jì) 依據(jù)已知多毛類Alitta succineaCu/Zn－SOD基因 (HM563679.1）CDS保守區(qū)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，利用同源克隆獲得雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因的特異性片斷。根據(jù)得到的Cu/Zn－SOD特異性片段設(shè)計(jì)3'RACE和5'RACE引物。UPM由Clontech SMARTTM RACE cDNA Amplification Kit試劑盒提供，其余引物利用Primer 5.0軟件設(shè)計(jì)，由TaKaRa公司合成。本試驗(yàn)中所用引物見(jiàn)表1。

1.2.4 特異性片段擴(kuò)增 按照TaKaRa Ex Taq?Hot Start Version試劑盒說(shuō)明書，利用設(shè)計(jì)的簡(jiǎn)并引物進(jìn)行特異性片段的擴(kuò)增。特異性片段PCR反應(yīng)體系共 25 μL，包含:TaKaRa Ex Taq(5 U/μL）0.2 μL，10 × Ex PCR Buffer(Mg2+plus）2.5 μL，dNTP Mixture(2.5 mmol/L）2.0 μL，引物各 0.5 μL，模板 2.0 μL，ddH2O 17.3 μL。反應(yīng)條件如下:94℃下預(yù)變性2 min;94℃下變性30 s，55℃下退火30 s，72℃下延伸30 s，共進(jìn)行35個(gè)循環(huán);最后在72℃下再延伸10 min。取4.0 μL PCR產(chǎn)物用10 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，用TIANgel Midi Purification Kit切膠回收試劑盒切膠回收目的條帶?；厥蘸蟮漠a(chǎn)物連接到pMDTM18－T Vector(TaKaRa公司）載體上，連接產(chǎn)物熱轉(zhuǎn)化至DH5α感受態(tài)細(xì)胞中，然后涂布于含有Amp(Ampicillin）的LB平板培養(yǎng)基上，37℃下倒置培養(yǎng)12～16 h。挑選獨(dú)立的較大白色單菌落至LB液體培養(yǎng)基 (含Amp）中，于37℃下培養(yǎng)4 h，取1.0 μL菌液進(jìn)行菌落PCR檢測(cè)，選取陽(yáng)性克隆送上海生物工程有限公司測(cè)序。

表1 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因全長(zhǎng)擴(kuò)增引物Tab.1 The primers used in the amplication of Cu/Zn－SOD in sandworm Perinereis aibuhitensis

1.2.5 RACE擴(kuò)增 按照Clontech SMARTTMRACE cDNA Amplification Kit說(shuō)明書進(jìn)行3'RACE和5'RACE擴(kuò)增。3'RACE和5'RACE PCR反應(yīng)體系共50 μL，包含:10 ×Adantage 2 PCR Buffer 5.0 μL，dNTP Mix 1.0 μL，50 × Adantage 2 Polymerase Mix 1.0 μL，3'RACE －Ready cDNA(或5'RACE －Ready cDNA）2.5 μL，3'RACE(或5'RACE）引物 1.0 μL，10 × UPM Mix 5.0 μL，ddH2O 34.5 μL。反應(yīng)條件如下:94℃下變性30 s，72℃下延伸3 min，共進(jìn)行5個(gè)循環(huán);94℃下變性30 s，70℃下退火30 s，72℃下延伸2 min，共進(jìn)行5個(gè)循環(huán);94℃下變性30 s，68℃下退火30 s，72℃下延伸2 min，共進(jìn)行25個(gè)循環(huán)。取4.0 μL PCR產(chǎn)物用10 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，利用“1.2.4”節(jié)的方法進(jìn)行切膠回收和轉(zhuǎn)化連接。挑取陽(yáng)性克隆送上海生物工程有限公司測(cè)序。利用DNAStar軟件對(duì)中間片段、3'RACE和5'RACE測(cè)序結(jié)果進(jìn)行拼接。

1.2.6 序列分析 應(yīng)用DNAStar軟件查找雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因開放閱讀框 (ORF），并將其翻譯成氨基酸序列;利用Conserved Domains軟件預(yù)測(cè)氨基酸序列保守區(qū)域，使用ScanProsite軟件分析氨基酸序列的潛在修飾位點(diǎn)，使用ProtParam工具預(yù)測(cè)氨基酸序列的理化性質(zhì)，使用PSORTⅡ軟件進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位預(yù)測(cè)，使用Signal P Server軟件進(jìn)行信號(hào)肽預(yù)測(cè)，使用TMHMM軟件進(jìn)行跨膜區(qū)分析，使用ProtScale工具進(jìn)行疏水性分析，使用SOPMA軟件和SWISS－MODEL軟件分別預(yù)測(cè)氨基酸序列的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu);使用Clustal 2.1進(jìn)行雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD多重序列比對(duì)，使用Mega 5.0軟件構(gòu)建同源關(guān)系進(jìn)化樹，自展檢測(cè)重復(fù)為1000次。

2 結(jié)果與分析

2.1 特異性片段擴(kuò)增及RACE擴(kuò)增

依據(jù)已知多毛類Alitta succineaCDS保守區(qū)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，同源克隆得到326 bp的特異性片段。3'RACE擴(kuò)增獲得一條512 bp的條帶，5'RACE PCR產(chǎn)物經(jīng)切膠回收測(cè)序?yàn)?53 bp。使用DNAStar軟件進(jìn)行序列拼接，得到870 bp的雙齒圍沙蠶cDNA全序列，提交至 GenBank，登錄號(hào)為KF199864。

圖1 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD特異性片段擴(kuò)增及RACE擴(kuò)增結(jié)果Fig.1 RACE amplification product of Cu/Zn－SOD fragment from sandworm Perinereis aibuhitensis

2.2 生物信息學(xué)分析

2.2.1 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基本理化信息分析 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD cDNA基因全長(zhǎng)870 bp，其中5'端非翻譯區(qū) (5'UTR）為156 bp，3'端非翻譯區(qū) (3'UTR）為261 bp，開放閱讀框(ORF）為453 bp，編碼一個(gè)由150個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì) (圖2）。使用ProtParam工具推測(cè)Cu/Zn－SOD氨基酸序列分子式為C655H1043N195O217S4，原子數(shù)為2114，理論相對(duì)分子質(zhì)量為15 249 900，等電點(diǎn)為5.66，氨基酸序列中帶負(fù)電荷的氨基酸(Asp+Glu）17個(gè)，占11.33%，帶正電荷的氨基酸 (Arg+Lys）11個(gè)，占7.33%。根據(jù)ProtScale預(yù)測(cè)結(jié)果，Cu/Zn－SOD氨基酸疏水性最大值為2.200，最小值為－2.644，整個(gè)多肽鏈中親水性氨基酸多于疏水性氨基酸，推斷該蛋白為親水性蛋白。

2.2.2 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD亞細(xì)胞定位分析預(yù)測(cè)結(jié)果顯示，該蛋白位于細(xì)胞質(zhì)中的可能性為65.2%，位于細(xì)胞核內(nèi)的可能性為21.7%，在其他細(xì)胞器中的可能性較小。對(duì)Cu/Zn－SOD蛋白進(jìn)行信號(hào)肽的預(yù)測(cè)，未發(fā)現(xiàn)明顯的信號(hào)肽位點(diǎn)，也未發(fā)現(xiàn)該蛋白有跨膜區(qū)，表明Cu/Zn－SOD蛋白既不是跨膜蛋白也不是分泌蛋白。

2.2.3 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD功能區(qū)預(yù)測(cè) 通過(guò)Conserved Domains預(yù)測(cè)氨基酸序列保守區(qū)域發(fā)現(xiàn)，該蛋白具有典型的Cu2+結(jié)合位點(diǎn) His－43、His－45、His－59和His－117，以及Zn2+結(jié)合位點(diǎn)His－59、His－68、His－77和 Asp－80(圖 2）。此外，該氨基酸序列還含有兩處 Cu/Zn－SOD蛋白家族標(biāo)簽序列:GFHVHQFGDNT(41～51）和GNAGGRLACGVI(135～146）(圖2）。

2.2.4 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè) 對(duì)雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因編碼的蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測(cè)，結(jié)果顯示:α－螺旋 (Alpha helix）占整個(gè)蛋白質(zhì)的4.67%，無(wú)規(guī)則卷曲(Random coil）占54.67%，延伸鏈 (Extended strand）占32.00%，而β－轉(zhuǎn)角 (Beta turn）占8.67%。Cu/Zn－SOD三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖3。

2.2.5 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD同源序列比對(duì)及系統(tǒng)進(jìn)化分析 同源性比較結(jié)果表明，雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD與琥珀刺沙蠶Alitta succinea同源性最高，達(dá)79%，與部分軟體動(dòng)物、魚類和昆蟲也具有較高的同源性，同源性為71%～78%。其中與太平洋牡蠣Crassostrea gigas同源性為78%，與日本盤鮑Haliotis discus discus同源性為76%，與龐貝蠕蟲Alvinella pompejana同源性為75%，與日本鰻鱺Anguilla japonica同源性為72%，與煙粉虱Bemisia tabaci同源性為71%(圖4）。系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果表明，雙齒圍沙蠶和琥珀刺沙蠶首先聚為一簇，表明其親緣關(guān)系較近 (圖5）。

3 討論

圖2 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD cDNA基因序列及推導(dǎo)的氨基酸序列Fig.2 Nucleotide and deduced amino acid sequence of Cu/Zn－SOD cDNA in sandworm Perinereis aibuhitensis

圖3 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)圖Fig.3 Predication of the tertiary structure of Cu/Zn SOD from sandworm Perinereis aibuhitensis

圖4 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD的氨基酸序列與其他物種蛋白氨基酸序列的比對(duì)Fig.4 Comparison of deduced amino acid sequence alignment of Cu/Zn－SOD in the sandworm with that in the other species

圖5 雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD的系統(tǒng)進(jìn)化樹Fig.5 Phylogenetic tree of Cu/Zn－SOD from sandworm Perinereis aibuhitensis

本研究中，首次報(bào)道了雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因的cDNA序列全長(zhǎng)。序列分析結(jié)果顯示，雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD cDNA全長(zhǎng)870 bp，包括156 bp的5'端非翻譯區(qū)，261 bp的3'端非翻譯區(qū)和453 bp的閱讀框，編碼150個(gè)氨基酸。Rhee等［17］克隆并分析琥珀刺沙蠶Cu/Zn－SOD序列時(shí)發(fā)現(xiàn)，該序列包含4個(gè)Cu2+結(jié)合位點(diǎn) (His－45、His－47、His－62和 His－119）和4個(gè) Zn2+結(jié)合位點(diǎn) (His－62、His－70、His－79和 Asp－82），同時(shí)還具有兩個(gè)Cu/Zn－SOD特征序列 (GFHVHEFGDNT、GNAGGRLACGVI）。Wang 等［18］在紫貽貝Mytilus galloprovincialisCu/Zn－SOD蛋白序列中也發(fā)現(xiàn)，具有Cu2+、Zn2+結(jié)合位點(diǎn)和特征序列。本研究中，在獲得的雙齒圍沙蠶SOD序列中亦發(fā)現(xiàn)了4個(gè)Cu2+結(jié)合位點(diǎn) (His－43、His－45、His－59和His－117）和4個(gè) Zn2+結(jié)合位點(diǎn) (His－59、His－68、His－77和 Asp－80），并確定具有兩處Cu/Zn－SOD蛋白家族標(biāo)簽序列 (41～51，135～146）。因此，推斷該序列為雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD序列。此外，Cu/Zn－SOD氨基酸序列具有色氨酸和酪氨酸缺乏，甘氨酸含量較高的特點(diǎn)［19－20］。對(duì)獲得的序列進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，不存在色氨酸和酪氨酸，而甘氨酸的比例達(dá)到16.7%，這進(jìn)一步表明獲得的序列為雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD。

生物體內(nèi)含有胞外和胞內(nèi)兩種Cu/Zn－SOD序列，其中胞外Cu/Zn－SOD通常含176～251個(gè)氨基酸殘基，N端具有信號(hào)肽序列;而胞內(nèi)Cu/Zn－SOD含147～167個(gè)氨基酸殘基，N端無(wú)信號(hào)肽序列［21－22］。本研究中獲得的雙齒圍沙蠶 Cu/Zn －SOD蛋白質(zhì)序列包含150個(gè)氨基酸，且N端無(wú)信號(hào)肽，細(xì)胞定位預(yù)測(cè)其存在于細(xì)胞質(zhì)中的可能性為65.2%，故推測(cè)其為胞內(nèi)Cu/Zn－SOD序列。

多序列同源比對(duì)分析結(jié)果，通過(guò)NJ法進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹分析。結(jié)果顯示，多毛類雙齒圍沙蠶和琥珀刺沙蠶首先聚為一簇，然后與東方螻蛄、肩突硬蜱、桔小實(shí)蠅等昆蟲綱聚為一簇，再與軟體動(dòng)物、脊椎動(dòng)物哺乳類和魚類聚在一起。這說(shuō)明Cu/Zn－SOD基因在物種中具有高度保守性，并且在一定程度上是按照該基因所屬物種的進(jìn)化而進(jìn)化的。但是，姜冰等［6］和朱丹等［23］的研究表明，Cu/Zn－SOD的系統(tǒng)進(jìn)化并不嚴(yán)格按照該基因所屬物種的進(jìn)化而進(jìn)化。這可能是由于物種差異造成的，有的物種中Cu/Zn－SOD是以物種進(jìn)化而進(jìn)化的，而有的則不是。

趙雙菁等［24］研究表明，2.000 ～ 8.653 μL/L Pb2+能夠上調(diào)水絲蚓Limnodilus claparedianuSOD酶活性，12.481 μL/L Pb2+則顯著抑制 SOD酶活性。據(jù)Kim 等［25］報(bào)道，1 μg/L 4－ 壬基酚 (4－NP）能夠上調(diào)日本虎斑猛水蚤Tigriopus japonicusCu/Zn－SOD和 Mn－SOD mRNA的表達(dá)。鑒于SOD對(duì)環(huán)境污染物的敏感性，利用SOD作為分子生物標(biāo)記已經(jīng)成為了近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因的克隆目前尚屬首次，雙齒圍沙蠶Cu/Zn－SOD基因的獲得及對(duì)該序列的分析，為研究其體內(nèi)免疫和機(jī)體防御機(jī)制提供了基礎(chǔ)資料，也為Cu/Zn－SOD作為生物標(biāo)志物指示和監(jiān)測(cè)環(huán)境污染奠定了基礎(chǔ)。

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Cloning and sequence analysis of Cu/Zn－SOD cDNA from sandworm Perinereis aibuhitensis

YUE Zong－h(huán)ao，F(xiàn)AN Xin，ZHAO Huan，REN Hong－wei，ZHANG Xu－feng，ZHOU Yi－bing
(Key Laboratory of Marine Bio－resources Restoration and Habitat Reparation in Liaoning Province，Dalian Ocean University，Dalian 116023，China）

A full length cDNA of Cu/Zn－SOD was firstly cloned in sandwormPerinereis aibuhitensisby homology cloning and RACE techniques based on the partial copper－zinc superoxide dismutase(Cu/Zn－SOD）gene from polychaeteAlitta succinea.The full length of the cDNA was found to be 870 bp including a 156 bp 5'untranslated region，a 261 bp 3'untranslated region and 453 bp open reading frame encoding 150 amino acids.There were typical Cu2+and Zn2+binding sites as well as two Cu/Zn－SOD protein family tag sequences in the deduced protein which was within the intracellular Cu/Zn－SOD with relative molecular mass of 15 249 900 and the isoelectric point of 5.66 by bioinformatic analysis.No signal peptide and transmembrane domain were observed in the deduced protein，indicating that it belonged to the hydrophilic protein.Multiple sequences alignment analysis revealed that the deduced amino acids had high homology to the proteins of partial molluscs，fishes and insects.The findings will provide basis for research of dose－response between gene expression and environmental pollutants，and defense mechanism of the sandworm.

Perinereis aibuhitensis;Cu/Zn－SOD;bioinformatic analysis;homology analysis

Q78;S917

A

10.3969/J.ISSN.2095－1388.2014.04.006

2095－1388(2014）04－0354－06

2013－12－03

國(guó)家海洋公益性行業(yè)科研專項(xiàng) (201305002，201305043）;國(guó)家海洋局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金資助項(xiàng)目 (201217）;國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目 (41306138）

岳宗豪 (1989—），男，碩士研究生。E－mail:yzh642324521@163.com

周一兵 (1957—），男，教授。E－mail:ybzhou@dlou.edu.cn