曾 斌，江翠華綜述，張吉翔審校

0 引 言

免疫球蛋白超家族補(bǔ)體受體(complement receptor of the immunoglobulin superfamily，CRIg)可與補(bǔ)體成分C3b、iC3b結(jié)合，清除C3凋理的病原微生物，抑制T細(xì)胞活化，調(diào)節(jié)免疫相關(guān)性疾病。免疫相關(guān)性疾病的發(fā)病機(jī)制之一是免疫應(yīng)答及免疫調(diào)節(jié)異常，近年來越來越多的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)CRIg參與疾病的發(fā)生、發(fā)展，并起著重要作用，現(xiàn)將某些疾病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中CRIg參與疾病發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展綜述如下。

1 CRIg的分子生物學(xué)特點(diǎn)

人和鼠的CRIg基因都位于X染色體的Xq12［1］。人 CRIg分子由長(zhǎng)鏈人 CRIg和短鏈人CRIg交替剪接形式組成。長(zhǎng)鏈人CRIg編碼區(qū)全長(zhǎng)1200bp，編碼有399個(gè)氨基酸的跨膜糖蛋白，細(xì)胞質(zhì)區(qū)含有YARL、DSQALI等結(jié)構(gòu)區(qū)和激活蛋白因子2內(nèi)化基序以及蛋白激酶C的磷酸化位點(diǎn)和環(huán)腺苷酸/環(huán)磷酸鳥苷依賴的磷酸激酶位點(diǎn)，其細(xì)胞外區(qū)包括IgC和IgV結(jié)構(gòu)域。短鏈人CRIg編碼區(qū)長(zhǎng)918 bp，編碼有305個(gè)氨基酸，細(xì)胞外區(qū)只有IgV結(jié)構(gòu)域，其他區(qū)域則與長(zhǎng)鏈人 CRIg完全相同。小鼠CRIg只有1種剪接形式，細(xì)胞外區(qū)僅編碼IgV結(jié)構(gòu)域［2－3］。

B7分子家族是一組共刺激分子，屬于50000～70000 U免疫球蛋白超家族的跨膜蛋白，提供T淋巴細(xì)胞活化的第二信號(hào)，此信號(hào)是T細(xì)胞抗原特異性激活所必需。目前已證實(shí)B7家族包括7個(gè)成員:B7-1(CD80)、B7-2(CD86)、B7-Dc(PD-L2)、B7-H1(PD-L1)、B7h(ICOS-L)、B7-H3 和 B7-H4(B7x、B7S1)。CRIg有典型的B7家族的特征，屬于B7家族相關(guān)蛋白，CRIg與B7家族成員均能從抗原提呈細(xì)胞傳遞信號(hào)給T細(xì)胞，抑制T細(xì)胞的增殖、活化及細(xì)胞因子的分泌，參與疾病發(fā)生［4］。

2 免疫性肝損傷(immunological live injury，ILI)

多種自身免疫疾病可導(dǎo)致以肝細(xì)胞為靶抗原的ILI。乙型和丙型肝炎病毒感染亦可誘發(fā)ILI。在ILI中會(huì)產(chǎn)生多種細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)、干擾素(interferon gamma，IFN)、白細(xì)胞介素(interleukin，IL)、粒細(xì)胞集落刺激因子等，引起細(xì)胞和組織損害，參與清除病原體。

Jung等［5］發(fā)現(xiàn)在肝損傷模型中CRIg能通過T細(xì)胞和自然殺傷T細(xì)胞(natural killer T cell，NKT)來保護(hù)肝細(xì)胞。將刀豆蛋白A通過靜脈注入野生型CRIg小鼠和敲除CRIg基因的小鼠制作ILI模型，經(jīng)脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記技術(shù)分析的2種模型小鼠的肝細(xì)胞凋亡率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在注入了刀豆蛋白A 24 h后，敲除小鼠死亡率比野生型小鼠高，證實(shí)CRIg具有一定的保護(hù)作用。這種ILI引起急性肝炎的主要機(jī)制是T細(xì)胞和NKT細(xì)胞激活產(chǎn)生的大量細(xì)胞因子如TNF-α和IFN-γ等［6］。敲除小鼠急性損傷后激活細(xì)胞內(nèi)的因子如TNF-γ及IFN-γ明顯比野生型小鼠多，在注入刀豆蛋白A前2 h注入CRIg的野生型小鼠比對(duì)照組分泌細(xì)胞因子明顯減少。利用α-半乳糖神經(jīng)鞘胺醇介導(dǎo)的方式激活NKT細(xì)胞模型分泌細(xì)胞因子，結(jié)果顯示CRIg對(duì)NKT細(xì)胞的激活有抑制作用［7］。將CRIg注入野生型小鼠中，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)到S期T細(xì)胞明顯減少，G0/G1期明顯增加，提示CRIg能通過抑制T細(xì)胞分裂使其細(xì)胞周期停在G0/G1期，但流式結(jié)果提示其無誘導(dǎo)凋亡。以上研究表明，CRIg能通過抑制T細(xì)胞和NKT細(xì)胞的激活對(duì)ILI的發(fā)生和發(fā)展起著重要作用。

3 腸缺血再灌注損傷(intestines ischemia-reperfusion injury，I/R)

I/R是在腸缺血基礎(chǔ)上恢復(fù)血流后腸損傷加重，甚至發(fā)生不可逆性損傷的狀態(tài)。I/R時(shí)腸黏膜的吸收功能障礙，營(yíng)養(yǎng)不足，腸道細(xì)菌移位，可能引起全身炎癥反應(yīng)綜合征，甚至發(fā)展成多器官功能障礙綜合征［8］。補(bǔ)體激活的3條途徑即經(jīng)典途徑、甘露糖結(jié)合凝集素途徑和旁路途徑對(duì)I/R均有不同程度的作用［9］。

Chen等［10］將CRIg的Fc片段和對(duì)照片段注入腸缺血8周的小鼠模型中，當(dāng)血流恢復(fù)后，發(fā)現(xiàn)炎癥散布至全身，致遠(yuǎn)端的器官如肺、腎等受損，而注入CRIg組的小鼠肺損傷明顯減輕，再分別對(duì)2組的肺、腸組織進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)CRIg阻礙C3的沉積，因此認(rèn)為是CRIg抑制了補(bǔ)體旁路途徑和經(jīng)典途徑來調(diào)控I/R引起的炎癥反應(yīng)。同類實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)在注入CRIg組小鼠恢復(fù)血供后，肺和腸組織中嗜中性粒細(xì)胞明顯減少［11］。嗜中性粒細(xì)胞是I/R中關(guān)鍵的介質(zhì)，在再灌注的早期，嗜中性粒細(xì)胞會(huì)通過滲透增加，C5a增加，補(bǔ)體途徑激活，補(bǔ)體活化發(fā)生炎癥反應(yīng)，因而CRIg還可能通過抑制嗜中性粒細(xì)胞來減少缺血性再灌注損傷。針對(duì)I/R治療困難、預(yù)后差的難題，CRIg有可能成為新的治療手段。

4 Ⅰ型糖尿病(type 1 diabetes，TID)

TID是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的器官特異性的自身免疫性疾病，由于自身抗原耐受破壞而導(dǎo)致胰島細(xì)胞破壞和功能衰竭，即胰島素絕對(duì)缺乏引起血糖升高。免疫、氧化應(yīng)激、遺傳、飲食和環(huán)境等因素參與其發(fā)病機(jī)制［12］。

Fu等［13］發(fā)現(xiàn)控制CRIg能控制TID的發(fā)病或疾病的進(jìn)展。將CRIg的Fc片段和對(duì)照片段注入同齡的雌性非肥胖性糖尿病小鼠模型(一種被廣泛應(yīng)用的自身免疫性TID的模型)，然后利用磁性毫微粒核磁共振成像觀察胰島炎的發(fā)展［14］。發(fā)現(xiàn)注入CRIg的FC片段的小鼠糖尿病較對(duì)照組遲發(fā)或是發(fā)生頻率降低約50%。主要機(jī)制是CRIg或含CRIg巨噬細(xì)胞抑制雌性非肥胖性糖尿病小鼠的T細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性。另外CRIg抑制旁路途徑中C3轉(zhuǎn)化酶及C5轉(zhuǎn)化酶的活性，但不抑制經(jīng)典途徑中轉(zhuǎn)化酶的活性，從而抑制胰島炎癥的進(jìn)展。調(diào)節(jié)CRIg的表達(dá)可能用于控制TID。

5 自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis，EAU)

葡萄膜炎是常見的炎癥性疾病，目前認(rèn)為自身免疫反應(yīng)是其最為常見的病因。實(shí)驗(yàn)性EAU動(dòng)物模型與人類葡萄膜炎的發(fā)病過程及臨床表現(xiàn)極其相似。目前多數(shù)研究認(rèn)為Th1和Th17是參與EAU發(fā)病的主要致炎細(xì)胞。

Chen等［15］發(fā)現(xiàn)CRIg抑制補(bǔ)體旁路途徑會(huì)減少EAU的炎癥。正常小鼠非炎癥的視網(wǎng)膜Bruch膜中C3d表達(dá)很少，而在EAU小鼠的在睫狀體、節(jié)細(xì)胞層、脈絡(luò)膜中測(cè)到有大量的C3d沉積。在18 d的EAU小鼠視網(wǎng)膜色素上皮層細(xì)胞補(bǔ)體因子顯著增加，隨著疾病的進(jìn)展光感受器細(xì)胞補(bǔ)體因子也明顯增加，提示在EAU小鼠的補(bǔ)體旁路途徑激活。

在實(shí)驗(yàn)中觀察到CRIg在炎癥最高峰時(shí)表達(dá)最少，可能是由于CRIg過度消耗。其機(jī)制可能是T細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子及一氧化氮的產(chǎn)生受到抑制。CRIg的片段處理過的EAU小鼠視網(wǎng)膜中只能見到輕微的病灶浸潤(rùn)，大量結(jié)構(gòu)保存完整，而對(duì)照組小鼠則可見到大量炎性細(xì)胞和被破壞的視網(wǎng)膜組織。經(jīng)過CRIg片段處理的EAU小鼠淋巴細(xì)胞的增殖明顯低于對(duì)照組，且呈劑量依賴型。體外光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白刺激淋巴細(xì)胞在炎癥高峰時(shí)產(chǎn)生大量細(xì)胞因子 IFN-γ、，IL-6、IL-17A、TNF-α 及少量的 IL-4、IL-10、IL-12和IL-21。經(jīng)CRIg處理后上述細(xì)胞因子明顯減少。浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮可能是EAU視網(wǎng)膜損傷的媒介，經(jīng)CRIg處理后iNOS基因的表達(dá)受到抑制，一氧化氮的產(chǎn)生減少［16］。CRIg對(duì)EAU小鼠的研究為人類EAU的臨床診治提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

6 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)

RA是以軟骨破壞和骨侵蝕為主要表現(xiàn)的自身免疫性疾病。T細(xì)胞亞群如Th17、CD4+T、CD8+T等能直接或間接控制效應(yīng)性T細(xì)胞反應(yīng)及分泌細(xì)胞因子，對(duì)RA的發(fā)生發(fā)展起重要起作用［17－20］。

Katschke等［21］發(fā)現(xiàn)CRIg能抑制RA炎癥和關(guān)節(jié)的破壞。用膠原誘導(dǎo)的小鼠RA模型研究發(fā)現(xiàn)CRIg片段處理后的小鼠，炎癥的程度、骨骼的破壞和臨床評(píng)分都明顯的減少。CRIg主要是通過調(diào)節(jié)IL-1β和IL-6等細(xì)胞因子參與抑制炎癥，對(duì)抗膠原抗體無作用。Chen等［22］近來發(fā)現(xiàn)與CRIg結(jié)構(gòu)相似的B7家族的抑制性共刺激分子B7-H3在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎組織中發(fā)生異常表達(dá)，提示B7家族與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生、發(fā)展存在一定聯(lián)系。

7 結(jié) 語(yǔ)

CRIg作為一種新發(fā)現(xiàn)的分子，在作為補(bǔ)體受體的同時(shí)，也具有強(qiáng)烈的抑制T細(xì)胞活化的作用。對(duì)CRIg與補(bǔ)體激活、T細(xì)胞活化、細(xì)胞因子等的關(guān)系深入研究，將為疾病早期診斷、預(yù)后判斷、臨床治療提供新的途徑。

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