張曉方

(河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 藥學(xué)部，河南 鄭州 450000)

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車前子化學(xué)成分與藥理活性研究

張曉方

(河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 藥學(xué)部，河南 鄭州 450000)

車前子兼具藥用及食用價(jià)值，其保健作用得到了國(guó)家衛(wèi)生部的權(quán)威認(rèn)證。中醫(yī)中常以其入藥，發(fā)揮利尿、鎮(zhèn)咳、調(diào)節(jié)消化系統(tǒng)之功效。然而其副作用也較為明顯，可能導(dǎo)致服用者血壓升高，進(jìn)而威脅其生命安全，因此準(zhǔn)確探明其化學(xué)成分，對(duì)其進(jìn)行深入的藥理學(xué)研究具有一定的臨床價(jià)值。立足于此，試圖通過(guò)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)研究分析其化學(xué)成分，為合理用藥提供參考依據(jù)。

車前子；化學(xué)成分；藥理學(xué)；檢測(cè)

車前子為車前科植物平車前或車前的種子，外形主要以三角狀長(zhǎng)圓形或橢圓形為主，其含有的藥用活性成分較多，具有滲濕通淋、清熱利尿、明目祛痰的作用，常用于暑濕泄瀉、痰熱咳嗽、目赤腫痛以及水腫脹滿等病癥的治療[1]。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)的方法對(duì)車前子的主要化學(xué)成分以及藥理活性進(jìn)行研究，為提高車前子在臨床上的使用性能提供參考。

1 材料

1.1 原料與試劑

儀器主要包括紫外分光光度計(jì)、高效液相色譜儀、核磁共振波譜儀、空氣泵、空氣壓縮機(jī)、質(zhì)譜儀、蒸發(fā)光監(jiān)測(cè)器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、電子天平、紫外分析儀、干燥箱以及毛細(xì)管等。試劑主要包括三氯甲烷、甲醇、石油醚、冰乙酸、丙酮、去離子水、雙蒸水、柱層層析硅膠、硫酸顯色劑、反向板以及硅膠板。

1.2 樣品

準(zhǔn)確稱取2.0kg車前子置于20L燒瓶中，加入16L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇，采用電熱套加熱，回流提取2h，過(guò)濾后即得濾液A。將上述過(guò)程中產(chǎn)生的濾渣收集起來(lái)，向其中加入12L質(zhì)量分?jǐn)?shù)為60%的乙醇，回流提取1h后再次過(guò)濾，得到的濾液記為B。將濾液A、B混合起來(lái)，于65℃下濃縮至干。

1.3 操作原理[2]

1.3.1 分離與純化 本實(shí)驗(yàn)采用柱層析法對(duì)提取液進(jìn)行分離：首先將已溶解的樣品上樣于色譜柱中，使用洗脫劑淋洗。樣品中不同組分的吸附能力不同，因此經(jīng)過(guò)幾次吸附與解吸以后，色譜柱中就會(huì)出現(xiàn)不同的色帶，且含有不同成分的溶液會(huì)從色譜柱底端流出。

1.3.2 成分檢測(cè) 通過(guò)ODS柱層純化得到的晶體即為所需化學(xué)成分，由于結(jié)構(gòu)鑒定需要確保其為單一物質(zhì)，對(duì)純度的要求較高，因此需要通過(guò)一系列方法檢測(cè)其化學(xué)純度。一般通過(guò)液相檢測(cè)、反相板檢測(cè)、HPLC-ELSD以及HPLC-UV后，基本可以確定其為單一物質(zhì)。假如其不適合通過(guò)液相檢測(cè)，則需要使提取液反復(fù)通過(guò)兩個(gè)正向板以及一個(gè)反相板進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 鑒別方法

1.4.1 車前子結(jié)構(gòu)骨架與官能團(tuán)鑒定 車前子的結(jié)構(gòu)鑒定主要通過(guò)官能團(tuán)的顯色反應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)。首先，將樣品溶于1.0mL甲醇中，加入少量鎂粉混合，振蕩均勻后加入幾滴濃鹽酸，等待顯色。

1.4.2 車前子分子量與分子式確定 采用質(zhì)譜法測(cè)定車前子的分子式，將待測(cè)液置于質(zhì)譜儀的進(jìn)樣系統(tǒng)中，經(jīng)質(zhì)量分析、離子收集、檢測(cè)以及記錄等步驟后即可得到相應(yīng)數(shù)據(jù)。

1.4.3 車前子結(jié)構(gòu)確定 本次研究采用核磁共振法確定車前子的結(jié)構(gòu)，可根據(jù)化學(xué)位移等相關(guān)數(shù)據(jù)來(lái)判定物質(zhì)中氫原子的類型和所處的化學(xué)環(huán)境、峰位。而核磁共振法所得到的偶合常數(shù)可以體現(xiàn)核與核的關(guān)系以及質(zhì)子的數(shù)目。具體操作步驟如下：①區(qū)分溶劑峰與雜質(zhì)峰；②根據(jù)分子式計(jì)算物質(zhì)的不飽和度；③確定各峰組相對(duì)應(yīng)氫原子的數(shù)目，并進(jìn)行分配；④考慮分子的對(duì)稱性；⑤分析峰組的δ和J值；⑥分析可能出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)式；⑦對(duì)所推測(cè)的結(jié)構(gòu)式進(jìn)行確認(rèn)。

2 結(jié)果

2.1 車前子提取物相關(guān)性質(zhì)

本試驗(yàn)共得到車前子提取物15L，濃縮后的體積大約為4.1L，使用糖度計(jì)測(cè)定得到車前子粗提取液的糖度為5。

2.2 車前子主要成分

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，車前子主要含有黃酮類化合物、三萜類化合物、揮發(fā)油、多糖成分等。其中黃酮類化合物主要包括高車前苷、木犀草素以及車前甙等[3]；三萜類化合物主要有齊墩果酸和熊果酸等；揮發(fā)油主要有3-叔丁基-4-羥基茴香醚和2,6-二叔丁基對(duì)甲酚。車前子中含有大量車前子膠，其屬于糖類物質(zhì)，另含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為28%的D-半乳糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-葡萄糖、D-葡萄糖酸、半乳糖以及少量的炭藻糖和D-木糖。除以上四類以外，車前子中還含有氨基酸、蛋白質(zhì)、生物堿以及環(huán)烯醚苷類物質(zhì)，包括京尼平甙酸、桃葉珊瑚甙、固醇、脂肪酸、微量元素以及酚酸等[4]。此外，有研究證實(shí)，車前子中含有豐富的鐵、鋁、鋅、鎂等元素，其中鎂元素含量最高。

2.3 車前子藥理活性分析

車前苷可作用于人體的呼吸中樞，發(fā)揮減緩呼吸頻率的作用，可促進(jìn)支氣管及消化道分泌相關(guān)物質(zhì)，將其應(yīng)用于慢性支氣管炎的臨床治療會(huì)有不錯(cuò)的效果。由此可知，車前子在平喘、祛痰以及鎮(zhèn)咳方面均具有較高的應(yīng)用價(jià)值；其所含的桃葉珊瑚可以促進(jìn)膽汁分泌，具有明顯的抗肝臟毒性作用，可護(hù)肝利膽；車前子中含有的黏液質(zhì)——車前子膠具有良好的調(diào)節(jié)血糖、降低血脂作用，可以預(yù)防由脂質(zhì)代謝紊亂所引起的脂質(zhì)過(guò)氧化問(wèn)題，同時(shí)還可以防治冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化[5]。此外，其還含有發(fā)酵性膳食纖維，可以發(fā)揮整腸通便的作用；環(huán)烯醚菇類物質(zhì)則具有抗氧化作用；黃酮類物質(zhì)車前苷、木犀草素等可以作用于人體的心血管系統(tǒng)，有效發(fā)揮解痙作用[6]。

3 結(jié)語(yǔ)

近幾年來(lái)，車前子的藥用價(jià)值不斷得到挖掘，國(guó)內(nèi)關(guān)于車前子形態(tài)、藥理活性以及藥用價(jià)值的研究非常多，已從動(dòng)物模型以及臨床應(yīng)用等多個(gè)角度對(duì)車前子進(jìn)行了研究。但是目前的研究成果并沒(méi)有達(dá)到預(yù)期效果，其在臨床上的應(yīng)用還是以粗提取物為主，對(duì)其主要化學(xué)成分的研究也局限在多糖范圍內(nèi)。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了車前子的主要化學(xué)成分，并以此為基礎(chǔ)對(duì)車前子的藥理活性進(jìn)行了分析。研究證實(shí)，車前子所含的車前苷、桃葉珊瑚、黏液質(zhì)以及木犀草素、車前甙等黃酮類物質(zhì)均具有藥用價(jià)值。這些主要成分即為車前子發(fā)揮降脂、降壓、護(hù)肝利膽、止咳祛痰平喘、抗氧化、利尿及預(yù)防腎結(jié)石形成、抗衰老、抗菌、抗癌、抗病毒、通便、免疫調(diào)節(jié)、止痛、明目、抗發(fā)炎以及調(diào)節(jié)胃腸道等多種功效的基礎(chǔ)[7]。綜上所述，車前子含有多種有效成分，可發(fā)揮多種藥理作用，在臨床上具有較大的應(yīng)用價(jià)值，值得大力推廣開(kāi)發(fā)。

[1] 張杰,李興琴,王素敏,等. 車前子對(duì)高脂血癥大鼠血脂水平及抗氧化作用的影響[J]. 中國(guó)新藥雜志,2005(3):299-301.

[2] 回瑞華,侯冬巖,李鐵純,等.中國(guó)車前草揮發(fā)性化學(xué)成分分析[J]. 分析試驗(yàn)室,2004(8):85-87.

[3] 唐永富,黃丹菲,殷軍藝,等. 車前子多糖對(duì)骨髓來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞表型和吞噬功能的影響[J]. 食品科學(xué),2007(10):517-520.

[4] 王勇,祁明信,黃秀榕,等. 車前子對(duì)晶狀體氧化損傷所致LEC凋亡抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 現(xiàn)代診斷與治療,2003(4):199-202.

[5] 劉強(qiáng),牟洪波,劉元祿. 中藥車前子對(duì)小鼠氣囊滑膜炎細(xì)胞因子TNF-α及IL-12影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2007(4):816-818.

[6] 謝小梅,付志紅.車前子多糖對(duì)小鼠陰道菌群失調(diào)的調(diào)整作用[J]. 遼寧中醫(yī)雜志,2006(2):241-242.

[7] 付志紅,謝明勇,聶少平. 微波技術(shù)用于車前子多糖的提取[J]. 食品科學(xué),2005(3):151-154.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2014-03-18

張曉方(1985-)，女，河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部藥師，研究方向?yàn)樗幏空{(diào)劑。

R284;R285

A

1673-2197(2014)12-0033-02