馬清河

（河北農業(yè)大學中獸醫(yī)學院，河北 定州073000）

在畜禽疫病日趨復雜、不斷發(fā)展的今天，通過疫苗免疫來控制疾病的發(fā)生是非常重要而有效的手段，但是在養(yǎng)禽生產中普遍存在疫苗免疫接種預防效果不佳，以及用藥量逐漸加大而仍未達到理想的治療和預防效果的問題，甚至有些弱毒疫苗存在生物安全隱患，如弱毒疫苗經活體繼代，毒力增強等。因此，研究免疫增強劑提高家禽的內在免疫機能，增強其自身抗病能力，具有十分重要的意義。然而目前常用的免疫增強劑大多是化學合成類，這些化學藥物雖然在改變機體的免疫水平上有一定的效果，但是往往存在用藥時間長、療效持續(xù)時間短、藥物殘留、環(huán)境污染等缺點。在追求綠色、環(huán)保、生態(tài)的浪潮推動下，中藥以其在提高免疫功能方面的獨特優(yōu)勢，在畜禽業(yè)中得到了越來越普遍的推廣應用。因此，研究中藥免疫增強劑對動物免疫功能的影響，對于防治畜禽疾病，提高畜禽生產力，增加畜牧業(yè)經濟效益具有重要的現(xiàn)實意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗藥品和試劑 北芪五加顆粒（每1g含生藥1g），商丘愛己愛牧藥業(yè)有限公司提供，批號：20110203；黃芪多糖粉，北京生泰爾生物科技有限公司，批號：20111123；雞新城疫LaSota系凍干苗，瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司，批號：111229；肝素鈉注射液，天津生物化學制藥廠，批號：20110812；雞新城疫抗原，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.1.2 主要儀器設備 電熱鼓風干燥箱，北京市永光明醫(yī)療儀器廠；微量血凝板，上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠；恒溫培養(yǎng)振蕩器（ZHWY-103D），上海智城分析儀器制造有限公司；電子天平（MR200A），上海第二天平儀器廠；超凈工作臺（LGJ-10），北京四環(huán)科學儀器廠。

1.1.3 試驗動物 1日齡海塞克斯粉蛋公雛350只，2012年3月29日購自石家莊良人牧業(yè)。使用合格的雛雞飼料，按《中華人民共和國農業(yè)部頒布NY/T33-2004蛋雞飼養(yǎng)標準》飼養(yǎng)至7日齡。以活潑健康、體重均勻為標準，選擇出300只供試。

1.2 方法

1.2.1 試驗雞分組與管理 300只7日齡海塞克斯粉蛋公雛隨機分成5組，每組60只。北芪五加組（A、B、C組）于7～14日齡（7 d晚-14 d早上）兌水飲用北芪五加顆粒，低、中、高3個劑量分別為1.0 g/L、2.0 g/L、4.0 g/L飲水，每天2次，早晚各一次；黃芪多糖對照組（D組）同時段飲水添加黃芪多糖粉（200mg/L飲水）；空白對照組（E組）不添加任何藥物。各試驗組于7日齡經測定新城疫母源抗體滴度后，用LaSota活苗滴鼻、點眼免疫，免疫劑量為1.5羽份/只；兩周后采用LaSota活苗滴鼻、點眼二免，免疫劑量為2羽份/只。試驗期間采用籠養(yǎng)，雞自由采食和飲水，1～14日齡采用紅外線燈保溫，全日制光照。試驗動物分組及處理見表1。

1.2.2 測定指標及方法 雞新城疫（newcastle dis-ease,ND）抗體水平測定：將各組供試雛雞分別于7、14、21、28日齡各取15只心臟采血，分離血清，用微量血凝（HA）和血凝抑制試驗（HI）檢測雞新城疫抗體[3]。7日齡采血主要目的是檢測母源抗體水平，以判定是否可以進行新城疫疫苗免疫。

表1 試驗動物分組及處理

免疫器官指數(shù)測定：分別在14、21、28日齡每組隨機抽取15只，心臟采血后（用于分離血清測定抗體效價），剖殺采集腔上囊、胸腺、脾臟，濾紙吸干表面水分后，用電子天平稱重，根據(jù)免疫器官與體重之比計算腔上囊指數(shù)、胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。計算公式為：免疫器官指數(shù)=免疫器官重（mg）/體重（g）。

對生長性能的影響：分別于14、21、28日齡，各組隨機取15只稱重，觀察各階段雞體重增長情況。計算公式為：料重比=期末耗料量（g）/(期末體重-初始體重)（g）。

此外，試驗期間仔細觀察和記錄試驗雞只的精神、食欲、糞便及發(fā)病、死亡等臨床狀況。

1.3 統(tǒng)計方法 采用SPSS12.0統(tǒng)計軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2 結果與分析

2.1 新城疫抗體效價的動態(tài)變化 各組雛雞7日齡的新城疫抗體水平均在4 log2以下，且各組之間差異不顯著，所以可以進行新城疫的疫苗免疫。用藥各組的新城疫抗體效價與空白對照組相比均有提高，21日齡時B組與E組相比差異顯著(P＜0.05)，C組、D組與E組相比差異極顯著(P＜0.01)；28日齡時B組、C組和D組的抗體效價均明顯高于E組，差異極顯著(P＜0.01)。各用藥組之間，除B、C組間21日齡時差異顯著(P＜0.05)外，其余各時間段兩組間均無統(tǒng)計學意義，與D組無差異顯著性。見表2。

表2 不同試驗組ND抗體效價 （log2）（n=15）

2.2 對免疫器官指數(shù)的影響

2.2.1 對胸腺指數(shù)的影響 整個試驗過程中，雛雞的胸腺、脾臟、腔上囊等免疫器官均未見明顯眼觀變化。14日齡胸腺指數(shù)C組高于A組和E組，差異顯著（P＜0.05），其余各組間差異不顯著（P＞0.05）；21、28日齡時除A組外，其余各用藥組與E組相比均有明顯提高，差異達到極顯著（P＜0.01）。各用藥組之間，除28日齡C、A組間差異顯著外，其余各組間差異不顯著（P＞0.05），無統(tǒng)計學意義。見表3。

表3 不同試驗組的胸腺指數(shù) （n=15）

2.2.2 對腔上囊指數(shù)的影響 北芪五加顆粒各劑量組的腔上囊指數(shù)與空白對照組相比均有提高。C組與E組相比，在21日齡達到顯著水平（P＜0.05），28日齡差異極顯著（P＜0.01）；B組在28日齡與E組相比差異顯著（P＜0.05），B、C組之間差異不顯著（P＞0.05）。見表4。

表4 不同試驗組的腔上囊指數(shù) （n=15）

2.2.3 對脾指數(shù)的影響 在14日齡各用藥組與空白對照組相比較無顯著差異（P＞0.05）；21日齡時B、C、D組與E組差異顯著（P＜0.05）；28日齡時B、C、D組的脾指數(shù)明顯升高，與E組相比差異極顯著（P＜0.01）。但B、C兩組之間差異不顯著。見表5。

表5 不同試驗組的脾指數(shù) （n=15）

2.3 對增重和料重比的影響 試驗期間，各組雞精神狀態(tài)良好，食欲、糞便正常，無異常表現(xiàn)。14、21日齡，各組平均體重相近，差異不顯著(P＞0.05)；28日齡，B、C組平均體重高于對照組，差異顯著(P＜0.05)，在28 d料重比中，以B、C組最低，表明北芪五加顆粒高、中劑量添加飲用能促進雛雞的生長發(fā)育，提高日增重。見表6。

表6試驗雛雞生產性能的測定 （n=15）

3 討論

3.1 北芪五加顆粒對雛雞新城疫抗體水平的影響 體液免疫是由B淋巴細胞介導的一種重要的特異性免疫反應，是機體抗御傳染病的主要因素之一[1]。禽類機體外周血液中的抗體在體內可發(fā)揮多種免疫功能，是衡量體液免疫功能的重要標志。

本試驗證實高、中劑量的北芪五加顆粒對雛雞新城疫抗體水平有明顯的促進作用。在給藥后7天（14日齡）北芪五加顆粒高、中劑量組的抗體效價與對照組相比差異不顯著，隨著飼養(yǎng)時間增加，到第21日齡達到差異顯著水平，28日齡達到試驗期間最大值（平均7.4 Log2），說明北芪五加顆粒作用于機體免疫器官、提高抗體水平需要一定的時間和過程。

3.2 北芪五加顆粒對雛雞免疫器官指數(shù)的影響胸腺是雞的一級免疫器官，是雛雞血液中淋巴細胞的來源[2]；腔上囊是禽類特有的體液免疫中樞器官，是B細胞分化發(fā)育的主要場所[3]；脾臟屬外周免疫器官，它是T、B淋巴細胞定居和對抗原刺激進行免疫應答的場所之一，富含捕獲和提呈抗原的巨噬細胞、樹狀突細胞和郎罕氏細胞[4]。研究認為胸腺、腔上囊及脾臟的重量可用于評價雛雞的免疫狀態(tài)，其絕對重量和相對重量的增加，說明機體的細胞免疫和體液免疫機能增強[5]。

本試驗結果表明，北芪五加顆粒各試驗組的免疫器官指數(shù)大多顯著高于對照組，說明北芪五加顆粒能夠促進雛雞胸腺、脾臟、腔上囊的發(fā)育，進而影響機體的免疫機能。因而有上述新城疫抗體效價顯著高于對照組現(xiàn)象。這與王德云[6]等將中藥成分與IL-2聯(lián)用可以促進雞免疫器官發(fā)育、李宏全[7]等研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖有對雞新城疫和腔上囊疫苗免疫促進作用、高桂生[8]等利用中藥“疫佳靈”可以增加雞免疫器官的相對質量、胡松華[9]等利用中藥復方促進雞免疫器官的發(fā)育以及王福傳[10]等研究中藥復方對雞的脾質量、腔上囊質量有顯著影響等報道相一致?？梢?，中藥是通過促進動物免疫器官發(fā)育從而發(fā)揮提高動物機體免疫力的作用。

3.3 北芪五加顆粒對雛雞增重和料重比的影響

試驗結果表明，北芪五加顆粒中、高劑量組平均體重均高于對照組，料重比高于對照組，說明北芪五加顆粒夠促進機體組織的生長發(fā)育，提高增重率。

北芪五加顆粒采用飲水給藥，這種給藥方式比混料方便，而且雞發(fā)病時往往引起采食量下降，但飲水量下降不明顯，因而飲水給藥能保證雞體內藥物的有效濃度，從而達到較好的療效。

4 結論

北芪五加顆粒對雛雞具有促進免疫器官發(fā)育、提高增重，增強新城疫疫苗免疫效果的作用。給藥方式為：混飲；劑量為：2.0 g/L飲水，連續(xù)用藥7 d。

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