王 淼，黃寶明，王 龍

(神木縣林業(yè)局， 陜西 神木 719300)

假臭草又名貓腥菊，拉丁名為[Praxelisclematidea(Griseb.)R. M. King and H.Robinson]屬菊科(Compositae)假臭草屬(Praxelis)植物[1-2]。假臭草原產(chǎn)南美洲，主要分布于阿根廷、巴西以及南美其他一些國家，現(xiàn)散布于東半球熱帶地區(qū)[3]。海南于2004 年首次記錄假臭草， 但之前可能已經(jīng)生長并開始蔓延。由于假臭草對土壤養(yǎng)分、水等生態(tài)因子的吸收力強， 對土壤的破壞力極大，在部分農(nóng)田、人工草地、果園、幼齡椰子園及幼齡膠園造成較嚴重的危害， 不但在經(jīng)濟上造成損失，更為嚴重的是對當?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)生物多樣性存在巨大的潛在威脅[4-5]。另外假臭草還能分泌他感物質(zhì)影響家畜覓食，從而影響入侵地區(qū)本地物種的生物多樣性，并影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和人類健康，造成巨大損失。

近年來，植物源農(nóng)藥的研究備受重視，并有了很大進展。目前，已發(fā)現(xiàn)具有農(nóng)藥活性成分的植物約4 000余種，其中具有殺蟲活性的植物達2 000余種，具有殺菌活性的植物約1 400 余種。通過野外調(diào)查發(fā)現(xiàn)假臭草群落生長茂盛，很少有被蟲啃食的痕跡，推測其對害蟲具有一定的拒食活性。因此通過研究該種植物的殺蟲活性及其作用方式，進一步填補國內(nèi)外在此方面的研究空白，研究結果將為利用該種植物研制開發(fā)新型安全、高效植物源殺蟲劑提供理論依據(jù)，對于科技成果創(chuàng)新具有十分重要的現(xiàn)實意義。

1 材料和方法

1.1 供試植物材料

2012年10月份采集假臭草的根、莖、葉，45 ℃干燥。

1.2 供試害蟲的飼養(yǎng)

菜青蟲(Pierisrapae)采自爾林兔林場試驗田，樣蟲為高齡幼蟲，使其在培養(yǎng)瓶中化蛹，將羽化后的成蟲移入養(yǎng)蟲室，室內(nèi)放入盆栽甘藍，并在室內(nèi)用棉花浸漬8%的蜜糖液，供成蟲補充營養(yǎng)。讓成蟲在甘藍上產(chǎn)卵，2天后取出，換上新的盆栽甘藍，幼蟲在培養(yǎng)室內(nèi)孵化，待孵化成幼蟲后將一批幼蟲收集于大玻璃缸中，用甘藍飼喂，控制最適溫度為25 ℃，濕度75%。試蟲在培養(yǎng)室內(nèi)繁殖3代以上后，取3齡幼蟲用于試驗。

1.3 粗提物的制備

假臭草粗提物采用冷浸漬法提取。先將干燥的假臭草根粉碎并過50目篩，稱取50 g粉末置于2 L的棕色廣口瓶中，用1 500 mL甲醇提取3次，每次500 mL，每次24 h，合并3次濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至膏狀，用甲醇+水(1+1)溶解，同時加入1.5%的表面活性劑(吐溫-80)，并定容到50 mL，相當于干樣品1 g/mL的質(zhì)量濃度，在4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 觸殺作用的測定

采用蟲體浸漬法：粗提取物用水稀釋成0.5 g/mL、0.25 g/mL 和母液組成3個濃度，分別挑選大小一致的3齡供試幼蟲，放入浸蟲器皿中，在藥液中浸3～5 s，取出后用吸水紙吸去多余藥液，然后放入鋪有濾紙保濕的直徑為12 cm的培養(yǎng)皿中，飼喂新鮮甘藍葉片。每個處理100頭試蟲，重復3次，對照用蒸餾水處理，將處理后的培養(yǎng)皿放入光照培養(yǎng)箱，保持溫度(25±1)℃、濕度75%～80%、光照L ∶D=14 ∶10，分別于處理后24、48 h記錄死亡數(shù)，計算死亡率。

1.5 拒食作用的測定

采用葉碟法：在直徑9 cm的培養(yǎng)皿底部鋪一層濾紙，并加水保濕。挑選健壯、大小一致饑餓4 h的菜青蟲，每培養(yǎng)皿放1頭，每處理20頭試蟲，重復3次。將待測樣品稀釋成0.5 g/mL、0.25 g/mL 和母液組成3個濃度，從未施過藥的甘藍菜地采回新鮮甘藍葉片，甘藍葉片用打孔器打成直徑為2 cm的葉碟，在配好的藥液中浸2 s，自然晾干，以蒸餾水處理作為對照。每皿中放入1片葉碟，將處理后的培養(yǎng)皿放入光照培養(yǎng)箱，保持溫度(25±1)℃、濕度75%～80%、光照L∶D=14∶10，待試蟲吃完后再加1片新鮮浸藥葉碟。夜間視試蟲取食情況可多加幾片葉蝶。記錄取食的葉碟數(shù)量，48 h后統(tǒng)計取食量(用坐標紙法測定剩余葉面積)，計算拒食率：拒食率(%)=[(對照平均取食量-處理平均取食量)/對照平均取食量]×100，48 h后換用新鮮無毒葉片繼續(xù)飼養(yǎng)，觀察試蟲的反應。

1.6 胃毒作用的測定

采用夾毒葉片法：供試藥劑稀釋成1 g/mL 、0.5 g/mL和0.25 g/mL，將甘藍葉做成直徑為2.5 cm的葉碟，用微量進樣器吸取藥液2 μL點滴于新鮮甘藍葉蝶上，待溶劑揮發(fā)后，用自制的淀粉漿糊粘上另1片同樣大小的葉蝶，制成夾毒葉片。然后放入墊有保濕濾紙的直徑9 cm培養(yǎng)皿中，每皿放1頭饑餓4 h并稱重的3齡菜青蟲幼蟲，待其取食完夾毒葉片后，更換新鮮的夾毒葉片；以蒸餾水處理作為對照。每個處理15頭試蟲，重復3次。4日后觀察記載死亡數(shù)，并計算死亡率和校正死亡率。

2 結果分析

2.1 假臭草提取物對菜青蟲觸殺活性

如表1所示，測定假臭草的甲醇粗提液對菜青蟲的觸殺活性，結果表明試驗中處理試蟲和對照試蟲相比較無顯著差異，說明假臭草各部位甲醇提取物對菜青蟲觸殺活性極低。

表1 假臭草的甲醇粗提液對菜青蟲的觸殺作用測定結果

2.2 假臭草提取物對菜青蟲拒食活性

如表1所示，通過記錄菜青蟲48 h內(nèi)的取食情況，測定假臭草的根、莖、葉甲醇粗提液對菜青蟲的拒食活性，結果表明假臭草根、莖、葉甲醇提取液均對菜青蟲具有一定的拒食活性，拒食活性與提取液濃度呈正相關，即提取液濃度越高拒食活性越強。從假臭草不同提取部位來看，拒食活性強弱依次為葉>莖>根，1 g/mL時拒食率分別為36.51%、63.34%和79.33%。

表2 假臭草甲醇粗提物對菜青蟲拒食作用的測定結果

2.3 假臭草提取物對菜青蟲毒胃作用測定

由試驗結果可知，假臭草不同部位提取物對菜青蟲的胃毒活性不同。如表3所示，假臭草根部甲醇提取液對菜青蟲無毒胃作用，假臭草莖和葉的甲醇提取液對菜青蟲有一定的毒胃作用，在濃度為1 g/mL時，假臭草葉和莖甲醇提取液對菜青蟲的毒胃活性分別為66.67%和33.33%，相比較而言，假臭草葉子的毒胃活性更高一些，有一定的應用價值。

表3 假臭草甲醇粗提物對菜青蟲毒胃作用的測定結果

3 討論與結論

植物源農(nóng)藥中的殺蟲活性成分主要是次生代謝物質(zhì)，其中許多種次生代謝物質(zhì)對昆蟲表現(xiàn)為毒殺、行為干擾和生物發(fā)育調(diào)節(jié)作用。由于次生代謝物質(zhì)是植物自身防御與昆蟲的適應演變協(xié)同進化的結果，昆蟲對其不易產(chǎn)生抗藥性，植物源農(nóng)藥對害蟲的作用獨特，作用方式多樣化，作用機理比較復雜[6-7]。本研究通過測定了假臭草根、莖、葉的甲醇提取液對菜青蟲的生物活性，進一步探討其作為植物源農(nóng)藥的發(fā)展?jié)撡|(zhì)。結果表明假臭草根部甲醇提取液對菜青蟲的生物活性最低，其次是莖，活性最高的部位是葉部。從作用方式上看，假臭草甲醇提取液對菜青蟲拒食活性最高，其次是毒胃作用和觸殺活性。因此在拒食活性方面，假臭草提取液具有較好的研究前景。在未來的研究中有必要對假臭草粗提物進行殺蟲生物活性追蹤試驗，進一步明確其對農(nóng)業(yè)害蟲的殺蟲活性及其應用價值。

參考文獻：

[1] King R M, Robinson H. Studies in the Eupatorieae(Compositae), XXVIII. The genus Praxelis[J]. Phytologia，1970,20:193-195.

[2] Chen Y S, Hind D J N. Flora of China Vol. 21[M]. Beijing: Sciences Press; St. Louis: Missouri Botanical Garden Press,2011.

[3] Corlett T R, Shaw. Praxelis clematidea yesterday South America, today Hong Kong, tomorrow the world Memoirs of the Hong Kong[J]. Natural History Society，1995,20:235-236.

[4] 王真輝，陳文慶，楊禮富，等.假臭草水浸提液化感作用研究[J].熱帶作物學報，2011,32(1):55-60.

[5] 程漢亭，范志偉，沈奕德，等.外來入侵植物假臭草的研究進展[J].雜草科學，2010(3):1-4.

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