趙華　劉志梅　陳秀璦

[摘要] 槐米中蕓香苷的提取、精制及對(duì)其水解液中糖的紙色譜鑒別是我校中藥制藥技術(shù)及藥品質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)等專(zhuān)業(yè)的學(xué)生必做的化學(xué)實(shí)驗(yàn)。但多年來(lái)，采用徑向紙層析方法，以傳統(tǒng)的BAW上層展開(kāi)系統(tǒng)即正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上層）進(jìn)行展開(kāi)，易出現(xiàn)鼠李糖條帶嚴(yán)重?cái)U(kuò)散等問(wèn)題，效果不理想。本文對(duì)紙色譜展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，確定乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）為最佳展開(kāi)劑，葡萄糖及鼠李糖條帶清晰，顯色明顯，分離度良好，方法簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性良好，可用此法快速鑒別葡萄糖和鼠李糖。

[關(guān)鍵詞] 蕓香苷；葡萄糖；鼠李糖；徑向紙層析

[中圖分類(lèi)號(hào)] R284.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）02-98-02

蕓香苷，又名蘆丁，屬黃酮類(lèi)化合物，為中藥槐米的主要有效成分，有涼血止血，清肝瀉火，保護(hù)和恢復(fù)毛細(xì)血管彈性，減小毛細(xì)血管滲透性等功能。蕓香苷是由槲皮素的3位與一分子的蕓香糖即rhaα1→6glc連接而成，槐米中蕓香苷的含量不得少于15.0%[1]。

紙色譜法是分離、鑒定有機(jī)化合物的重要方法之一，按操作方法可分為垂直型和水平型兩種[2]。垂直型包括上行法和下行法，即將濾紙條垂直放置，使展開(kāi)劑借助毛細(xì)管效應(yīng)或重力作用向上或向下移動(dòng)[3]；水平型即為徑向紙色譜法，也稱(chēng)之為圓形紙色譜法，即將圓形濾紙水平放置，使展開(kāi)劑由中心向四周擴(kuò)散[4]。多年來(lái)，我校采用堿溶酸沉法從槐樹(shù)的花蕾中提取蕓香苷并精制后水解，水解液中糖的鑒定均采用徑向紙層析方法。但在中藥化學(xué)及天然藥物化學(xué)的實(shí)驗(yàn)課上，中藥制藥、藥物制劑等專(zhuān)業(yè)的多名同學(xué)采用傳統(tǒng)的BAW系統(tǒng)上層溶液即正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上層）[5]進(jìn)行展開(kāi)，出現(xiàn)了較多的問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)效果不理想，主要表現(xiàn)為：鼠李糖環(huán)帶出現(xiàn)嚴(yán)重?cái)U(kuò)散。此類(lèi)問(wèn)題的出現(xiàn)并不完全是由學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作水平引起的，另展開(kāi)系統(tǒng)中的采用的正丁醇具有特殊氣味，令人難以接受，且刺激呼吸系統(tǒng)和皮膚，具一定毒性。為此，筆者對(duì)葡萄糖和鼠李糖的紙層析展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，較大程度的解決了上述問(wèn)題。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試藥

WS70-1型紅外線快速干燥箱，培養(yǎng)皿（Φ16cm）兩個(gè)，毛細(xì)玻璃管（Φ0.5mm）；槐米購(gòu)自沈陽(yáng)市藥材公司，使用前粉碎成粗粉，過(guò)20目篩；葡萄糖（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；鼠李糖（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；定性濾紙（Φ18cm）；吡啶（天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心，分析純）；乙酸乙酯（天津市百世化工有限公司）；其他藥品均為國(guó)產(chǎn)分析純藥品，所用水為一次蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

1.2.1 對(duì)照品溶液及供試品溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備：取無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加蒸餾水制成每1mL含0.1mg的溶液，即得；取鼠李糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加蒸餾水制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

1.2.2 供試品溶液的制備 取精制后的蕓香苷0.5g，置于250mL的圓底燒瓶中，加2%H2SO4 50mL，回流40min，放冷抽濾。取濾液10mL，逐步加Ba（OH）2細(xì)粉（大約1～1.5g）中和至中性，過(guò)濾至坩堝中，濃縮至1mL左右，作為供試品溶液[6]。濃縮過(guò)程中注意避免炭化。

2 方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

本實(shí)驗(yàn)采用徑向紙色譜法進(jìn)行展開(kāi)。取一張圓形色譜濾紙，在濾紙圓心處打一小孔。把濾紙從圓心處平均分成六等份，在距圓心處0.5cm處畫(huà)一圓圈，作為基線。吸取葡萄糖和鼠李糖對(duì)照品溶液及供試品溶液進(jìn)行點(diǎn)樣。點(diǎn)樣時(shí)毛細(xì)管以用鉛筆標(biāo)記的距圓心處的小圓為基線，即環(huán)式點(diǎn)樣，且相同的樣品應(yīng)以對(duì)角的兩個(gè)位置點(diǎn)樣。取長(zhǎng)10cm，寬1cm的濾紙條卷成筒狀，塞入濾紙圓心處的小孔當(dāng)中。取兩個(gè)相同大小的培養(yǎng)皿，并在其中一個(gè)的中心處放置一裝有乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）的小瓶蓋。取點(diǎn)樣后并塞入濾紙芯的圓形濾紙，把濾紙芯放入瓶蓋中，使其接觸展開(kāi)劑，迅速蓋好另一個(gè)培養(yǎng)皿，展開(kāi)。約半小時(shí)后取出，晾干，噴以苯胺-鄰苯二甲酸試劑，噴霧后于105℃烘10min或在紅外燈下加熱10～15min。

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

供試品色譜中，在于對(duì)照品相同的位置，顯現(xiàn)相同顏色的環(huán)帶，如圖1示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蕓香苷水解液中含葡萄糖和鼠李糖，即是蕓香苷為苷元與葡萄糖和鼠李糖連接而成。葡萄糖與鼠李糖條帶清晰，無(wú)拖尾，二者的Rf值分別為0.516和0.645，分離度良好。

3 討論

歷年來(lái)我校采用徑向紙層析鑒別蕓香苷水解液中的葡萄糖和鼠李糖，多以傳統(tǒng)的BAW系統(tǒng)的上層溶液展開(kāi)，多出現(xiàn)鼠李糖條帶嚴(yán)重?cái)U(kuò)散等問(wèn)題，且正丁醇具特殊氣味，并具一定毒性，另展開(kāi)過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)，葡萄糖和鼠李糖達(dá)到良好分離約需1h左右，綜合以上因素，對(duì)葡萄糖和鼠李糖的層析條件進(jìn)行優(yōu)化。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，葡萄糖可采用HSGF254硅膠薄層法鑒別[7]，但對(duì)蕓香苷水解液中的葡萄糖及鼠李糖卻分離不開(kāi)，且徑向紙層析法操作簡(jiǎn)單，展開(kāi)劑用量少，耗時(shí)短，故依然沿用此種方法。

筆者曾對(duì)文獻(xiàn)中報(bào)道的色譜法篩選葡萄糖和鼠李糖所用的展開(kāi)劑，如正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶1），乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶3），正丁醇-乙醇-水（4∶1∶2.2）等。結(jié)果表明，在展開(kāi)系統(tǒng)中，一定注意水的比例，否則葡萄糖條帶擴(kuò)散嚴(yán)重，即出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾現(xiàn)象，綜合以上考慮，最終確定乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）分離效果最好。

該條件下，葡萄糖和鼠李糖能有效分離，二者的Rf值分別為0.516和0.645，且條帶清晰，顯色明顯，方法簡(jiǎn)單，展開(kāi)過(guò)程約需半個(gè)小時(shí)即可，重現(xiàn)性良好，故可用此法快速鑒別葡萄糖和鼠李糖。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2010版）[S].一部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：333.

[2] 劉約權(quán)，李貴深.化學(xué)教學(xué)論[M].北京：高等教育出版社，2005：84-87.

[3] 孫毓慶.分析化學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：257.

[4] 張淑娜，石軍，張淑娟.采用圓形紙色譜法分離氨基酸[J].天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，15（1）：38-39.

[5] 楊紅.中藥化學(xué)實(shí)用技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：216.

[6] 吳劍鋒.天然藥物化學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：272.

[7] 郭躍偉，程培元，陳玉俊，等.槐耳菌絲體多糖的分離和分析[J].中國(guó)生化藥物雜志，1993，（1）：56-60.

（收稿日期：2013-11-07）endprint

[摘要] 槐米中蕓香苷的提取、精制及對(duì)其水解液中糖的紙色譜鑒別是我校中藥制藥技術(shù)及藥品質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)等專(zhuān)業(yè)的學(xué)生必做的化學(xué)實(shí)驗(yàn)。但多年來(lái)，采用徑向紙層析方法，以傳統(tǒng)的BAW上層展開(kāi)系統(tǒng)即正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上層）進(jìn)行展開(kāi)，易出現(xiàn)鼠李糖條帶嚴(yán)重?cái)U(kuò)散等問(wèn)題，效果不理想。本文對(duì)紙色譜展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，確定乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）為最佳展開(kāi)劑，葡萄糖及鼠李糖條帶清晰，顯色明顯，分離度良好，方法簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性良好，可用此法快速鑒別葡萄糖和鼠李糖。

[關(guān)鍵詞] 蕓香苷；葡萄糖；鼠李糖；徑向紙層析

[中圖分類(lèi)號(hào)] R284.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）02-98-02

蕓香苷，又名蘆丁，屬黃酮類(lèi)化合物，為中藥槐米的主要有效成分，有涼血止血，清肝瀉火，保護(hù)和恢復(fù)毛細(xì)血管彈性，減小毛細(xì)血管滲透性等功能。蕓香苷是由槲皮素的3位與一分子的蕓香糖即rhaα1→6glc連接而成，槐米中蕓香苷的含量不得少于15.0%[1]。

紙色譜法是分離、鑒定有機(jī)化合物的重要方法之一，按操作方法可分為垂直型和水平型兩種[2]。垂直型包括上行法和下行法，即將濾紙條垂直放置，使展開(kāi)劑借助毛細(xì)管效應(yīng)或重力作用向上或向下移動(dòng)[3]；水平型即為徑向紙色譜法，也稱(chēng)之為圓形紙色譜法，即將圓形濾紙水平放置，使展開(kāi)劑由中心向四周擴(kuò)散[4]。多年來(lái)，我校采用堿溶酸沉法從槐樹(shù)的花蕾中提取蕓香苷并精制后水解，水解液中糖的鑒定均采用徑向紙層析方法。但在中藥化學(xué)及天然藥物化學(xué)的實(shí)驗(yàn)課上，中藥制藥、藥物制劑等專(zhuān)業(yè)的多名同學(xué)采用傳統(tǒng)的BAW系統(tǒng)上層溶液即正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上層）[5]進(jìn)行展開(kāi)，出現(xiàn)了較多的問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)效果不理想，主要表現(xiàn)為：鼠李糖環(huán)帶出現(xiàn)嚴(yán)重?cái)U(kuò)散。此類(lèi)問(wèn)題的出現(xiàn)并不完全是由學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作水平引起的，另展開(kāi)系統(tǒng)中的采用的正丁醇具有特殊氣味，令人難以接受，且刺激呼吸系統(tǒng)和皮膚，具一定毒性。為此，筆者對(duì)葡萄糖和鼠李糖的紙層析展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，較大程度的解決了上述問(wèn)題。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試藥

WS70-1型紅外線快速干燥箱，培養(yǎng)皿（Φ16cm）兩個(gè)，毛細(xì)玻璃管（Φ0.5mm）；槐米購(gòu)自沈陽(yáng)市藥材公司，使用前粉碎成粗粉，過(guò)20目篩；葡萄糖（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；鼠李糖（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；定性濾紙（Φ18cm）；吡啶（天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心，分析純）；乙酸乙酯（天津市百世化工有限公司）；其他藥品均為國(guó)產(chǎn)分析純藥品，所用水為一次蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

1.2.1 對(duì)照品溶液及供試品溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備：取無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加蒸餾水制成每1mL含0.1mg的溶液，即得；取鼠李糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加蒸餾水制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

1.2.2 供試品溶液的制備 取精制后的蕓香苷0.5g，置于250mL的圓底燒瓶中，加2%H2SO4 50mL，回流40min，放冷抽濾。取濾液10mL，逐步加Ba（OH）2細(xì)粉（大約1～1.5g）中和至中性，過(guò)濾至坩堝中，濃縮至1mL左右，作為供試品溶液[6]。濃縮過(guò)程中注意避免炭化。

2 方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

本實(shí)驗(yàn)采用徑向紙色譜法進(jìn)行展開(kāi)。取一張圓形色譜濾紙，在濾紙圓心處打一小孔。把濾紙從圓心處平均分成六等份，在距圓心處0.5cm處畫(huà)一圓圈，作為基線。吸取葡萄糖和鼠李糖對(duì)照品溶液及供試品溶液進(jìn)行點(diǎn)樣。點(diǎn)樣時(shí)毛細(xì)管以用鉛筆標(biāo)記的距圓心處的小圓為基線，即環(huán)式點(diǎn)樣，且相同的樣品應(yīng)以對(duì)角的兩個(gè)位置點(diǎn)樣。取長(zhǎng)10cm，寬1cm的濾紙條卷成筒狀，塞入濾紙圓心處的小孔當(dāng)中。取兩個(gè)相同大小的培養(yǎng)皿，并在其中一個(gè)的中心處放置一裝有乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）的小瓶蓋。取點(diǎn)樣后并塞入濾紙芯的圓形濾紙，把濾紙芯放入瓶蓋中，使其接觸展開(kāi)劑，迅速蓋好另一個(gè)培養(yǎng)皿，展開(kāi)。約半小時(shí)后取出，晾干，噴以苯胺-鄰苯二甲酸試劑，噴霧后于105℃烘10min或在紅外燈下加熱10～15min。

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

供試品色譜中，在于對(duì)照品相同的位置，顯現(xiàn)相同顏色的環(huán)帶，如圖1示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蕓香苷水解液中含葡萄糖和鼠李糖，即是蕓香苷為苷元與葡萄糖和鼠李糖連接而成。葡萄糖與鼠李糖條帶清晰，無(wú)拖尾，二者的Rf值分別為0.516和0.645，分離度良好。

3 討論

歷年來(lái)我校采用徑向紙層析鑒別蕓香苷水解液中的葡萄糖和鼠李糖，多以傳統(tǒng)的BAW系統(tǒng)的上層溶液展開(kāi)，多出現(xiàn)鼠李糖條帶嚴(yán)重?cái)U(kuò)散等問(wèn)題，且正丁醇具特殊氣味，并具一定毒性，另展開(kāi)過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)，葡萄糖和鼠李糖達(dá)到良好分離約需1h左右，綜合以上因素，對(duì)葡萄糖和鼠李糖的層析條件進(jìn)行優(yōu)化。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，葡萄糖可采用HSGF254硅膠薄層法鑒別[7]，但對(duì)蕓香苷水解液中的葡萄糖及鼠李糖卻分離不開(kāi)，且徑向紙層析法操作簡(jiǎn)單，展開(kāi)劑用量少，耗時(shí)短，故依然沿用此種方法。

筆者曾對(duì)文獻(xiàn)中報(bào)道的色譜法篩選葡萄糖和鼠李糖所用的展開(kāi)劑，如正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶1），乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶3），正丁醇-乙醇-水（4∶1∶2.2）等。結(jié)果表明，在展開(kāi)系統(tǒng)中，一定注意水的比例，否則葡萄糖條帶擴(kuò)散嚴(yán)重，即出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾現(xiàn)象，綜合以上考慮，最終確定乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）分離效果最好。

該條件下，葡萄糖和鼠李糖能有效分離，二者的Rf值分別為0.516和0.645，且條帶清晰，顯色明顯，方法簡(jiǎn)單，展開(kāi)過(guò)程約需半個(gè)小時(shí)即可，重現(xiàn)性良好，故可用此法快速鑒別葡萄糖和鼠李糖。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（2010版）[S].一部.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：333.

[2] 劉約權(quán)，李貴深.化學(xué)教學(xué)論[M].北京：高等教育出版社，2005：84-87.

[3] 孫毓慶.分析化學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1997：257.

[4] 張淑娜，石軍，張淑娟.采用圓形紙色譜法分離氨基酸[J].天津農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，15（1）：38-39.

[5] 楊紅.中藥化學(xué)實(shí)用技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2013：216.

[6] 吳劍鋒.天然藥物化學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：272.

[7] 郭躍偉，程培元，陳玉俊，等.槐耳菌絲體多糖的分離和分析[J].中國(guó)生化藥物雜志，1993，（1）：56-60.

（收稿日期：2013-11-07）endprint

[摘要] 槐米中蕓香苷的提取、精制及對(duì)其水解液中糖的紙色譜鑒別是我校中藥制藥技術(shù)及藥品質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)等專(zhuān)業(yè)的學(xué)生必做的化學(xué)實(shí)驗(yàn)。但多年來(lái)，采用徑向紙層析方法，以傳統(tǒng)的BAW上層展開(kāi)系統(tǒng)即正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上層）進(jìn)行展開(kāi)，易出現(xiàn)鼠李糖條帶嚴(yán)重?cái)U(kuò)散等問(wèn)題，效果不理想。本文對(duì)紙色譜展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，確定乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）為最佳展開(kāi)劑，葡萄糖及鼠李糖條帶清晰，顯色明顯，分離度良好，方法簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性良好，可用此法快速鑒別葡萄糖和鼠李糖。

[關(guān)鍵詞] 蕓香苷；葡萄糖；鼠李糖；徑向紙層析

[中圖分類(lèi)號(hào)] R284.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 2095-0616（2014）02-98-02

蕓香苷，又名蘆丁，屬黃酮類(lèi)化合物，為中藥槐米的主要有效成分，有涼血止血，清肝瀉火，保護(hù)和恢復(fù)毛細(xì)血管彈性，減小毛細(xì)血管滲透性等功能。蕓香苷是由槲皮素的3位與一分子的蕓香糖即rhaα1→6glc連接而成，槐米中蕓香苷的含量不得少于15.0%[1]。

紙色譜法是分離、鑒定有機(jī)化合物的重要方法之一，按操作方法可分為垂直型和水平型兩種[2]。垂直型包括上行法和下行法，即將濾紙條垂直放置，使展開(kāi)劑借助毛細(xì)管效應(yīng)或重力作用向上或向下移動(dòng)[3]；水平型即為徑向紙色譜法，也稱(chēng)之為圓形紙色譜法，即將圓形濾紙水平放置，使展開(kāi)劑由中心向四周擴(kuò)散[4]。多年來(lái)，我校采用堿溶酸沉法從槐樹(shù)的花蕾中提取蕓香苷并精制后水解，水解液中糖的鑒定均采用徑向紙層析方法。但在中藥化學(xué)及天然藥物化學(xué)的實(shí)驗(yàn)課上，中藥制藥、藥物制劑等專(zhuān)業(yè)的多名同學(xué)采用傳統(tǒng)的BAW系統(tǒng)上層溶液即正丁醇-醋酸-水（4∶1∶5，上層）[5]進(jìn)行展開(kāi)，出現(xiàn)了較多的問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)效果不理想，主要表現(xiàn)為：鼠李糖環(huán)帶出現(xiàn)嚴(yán)重?cái)U(kuò)散。此類(lèi)問(wèn)題的出現(xiàn)并不完全是由學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作水平引起的，另展開(kāi)系統(tǒng)中的采用的正丁醇具有特殊氣味，令人難以接受，且刺激呼吸系統(tǒng)和皮膚，具一定毒性。為此，筆者對(duì)葡萄糖和鼠李糖的紙層析展開(kāi)條件進(jìn)行了改進(jìn)，較大程度的解決了上述問(wèn)題。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試藥

WS70-1型紅外線快速干燥箱，培養(yǎng)皿（Φ16cm）兩個(gè)，毛細(xì)玻璃管（Φ0.5mm）；槐米購(gòu)自沈陽(yáng)市藥材公司，使用前粉碎成粗粉，過(guò)20目篩；葡萄糖（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；鼠李糖（中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；定性濾紙（Φ18cm）；吡啶（天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心，分析純）；乙酸乙酯（天津市百世化工有限公司）；其他藥品均為國(guó)產(chǎn)分析純藥品，所用水為一次蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

1.2.1 對(duì)照品溶液及供試品溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備：取無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加蒸餾水制成每1mL含0.1mg的溶液，即得；取鼠李糖對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加蒸餾水制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

1.2.2 供試品溶液的制備 取精制后的蕓香苷0.5g，置于250mL的圓底燒瓶中，加2%H2SO4 50mL，回流40min，放冷抽濾。取濾液10mL，逐步加Ba（OH）2細(xì)粉（大約1～1.5g）中和至中性，過(guò)濾至坩堝中，濃縮至1mL左右，作為供試品溶液[6]。濃縮過(guò)程中注意避免炭化。

2 方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

本實(shí)驗(yàn)采用徑向紙色譜法進(jìn)行展開(kāi)。取一張圓形色譜濾紙，在濾紙圓心處打一小孔。把濾紙從圓心處平均分成六等份，在距圓心處0.5cm處畫(huà)一圓圈，作為基線。吸取葡萄糖和鼠李糖對(duì)照品溶液及供試品溶液進(jìn)行點(diǎn)樣。點(diǎn)樣時(shí)毛細(xì)管以用鉛筆標(biāo)記的距圓心處的小圓為基線，即環(huán)式點(diǎn)樣，且相同的樣品應(yīng)以對(duì)角的兩個(gè)位置點(diǎn)樣。取長(zhǎng)10cm，寬1cm的濾紙條卷成筒狀，塞入濾紙圓心處的小孔當(dāng)中。取兩個(gè)相同大小的培養(yǎng)皿，并在其中一個(gè)的中心處放置一裝有乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）的小瓶蓋。取點(diǎn)樣后并塞入濾紙芯的圓形濾紙，把濾紙芯放入瓶蓋中，使其接觸展開(kāi)劑，迅速蓋好另一個(gè)培養(yǎng)皿，展開(kāi)。約半小時(shí)后取出，晾干，噴以苯胺-鄰苯二甲酸試劑，噴霧后于105℃烘10min或在紅外燈下加熱10～15min。

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

供試品色譜中，在于對(duì)照品相同的位置，顯現(xiàn)相同顏色的環(huán)帶，如圖1示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，蕓香苷水解液中含葡萄糖和鼠李糖，即是蕓香苷為苷元與葡萄糖和鼠李糖連接而成。葡萄糖與鼠李糖條帶清晰，無(wú)拖尾，二者的Rf值分別為0.516和0.645，分離度良好。

3 討論

歷年來(lái)我校采用徑向紙層析鑒別蕓香苷水解液中的葡萄糖和鼠李糖，多以傳統(tǒng)的BAW系統(tǒng)的上層溶液展開(kāi)，多出現(xiàn)鼠李糖條帶嚴(yán)重?cái)U(kuò)散等問(wèn)題，且正丁醇具特殊氣味，并具一定毒性，另展開(kāi)過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)，葡萄糖和鼠李糖達(dá)到良好分離約需1h左右，綜合以上因素，對(duì)葡萄糖和鼠李糖的層析條件進(jìn)行優(yōu)化。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道，葡萄糖可采用HSGF254硅膠薄層法鑒別[7]，但對(duì)蕓香苷水解液中的葡萄糖及鼠李糖卻分離不開(kāi)，且徑向紙層析法操作簡(jiǎn)單，展開(kāi)劑用量少，耗時(shí)短，故依然沿用此種方法。

筆者曾對(duì)文獻(xiàn)中報(bào)道的色譜法篩選葡萄糖和鼠李糖所用的展開(kāi)劑，如正丁醇-冰醋酸-水（4∶1∶1），乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶3），正丁醇-乙醇-水（4∶1∶2.2）等。結(jié)果表明，在展開(kāi)系統(tǒng)中，一定注意水的比例，否則葡萄糖條帶擴(kuò)散嚴(yán)重，即出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾現(xiàn)象，綜合以上考慮，最終確定乙酸乙酯-吡啶-水（10∶4∶0.5）分離效果最好。

該條件下，葡萄糖和鼠李糖能有效分離，二者的Rf值分別為0.516和0.645，且條帶清晰，顯色明顯，方法簡(jiǎn)單，展開(kāi)過(guò)程約需半個(gè)小時(shí)即可，重現(xiàn)性良好，故可用此法快速鑒別葡萄糖和鼠李糖。

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（收稿日期：2013-11-07）endprint