王 哲,康 嵐,朱鍵勛,肖井雷,姜大成

(長春中醫(yī)藥大學(xué)，長春 130117)

林蛙為脊索動(dòng)物門兩棲綱蛙科動(dòng)物，中國林蛙全身可入藥，特別是林蛙油，林蛙油的藥用部位屬動(dòng)物內(nèi)部器官的干燥輸卵管，其占中國林蛙雌蛙總重的15%[1]。林蛙油為滋補(bǔ)良藥，其性咸，味甘、平，歸肺、腎二經(jīng)，具有補(bǔ)腎益精、養(yǎng)陰潤肺、清熱解毒的功效，可用于治療陰虛體弱、病后失調(diào)、神疲乏力、心悸失眠、盜汗不止、癆嗽咳血、產(chǎn)后無乳等癥[2-3]。林蛙油中富含有蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素、脂肪酸、磷脂、甾體激素及一些微量元素，其中總蛋白含量占69.2%，糖類占9.8%，脂肪占4.1%，水分占16.1%，其他0.8%[4]。近些年來，越來越多的人們認(rèn)識(shí)到了哈蟆油的營養(yǎng)、保健價(jià)值，使其成為了一種馳名中外的名貴食療性中藥，并賦予了其滋補(bǔ)軟黃金的美譽(yù)。

1 林蛙油中雌激素成分的化學(xué)研究

1.1 放免法測定林蛙油中雌激素含量 放射免疫分析(RIA)是以放射性核素標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競爭性結(jié)合特異性抗體為基本原理來測定待測樣品中抗原量的一種分析方法，其具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，測量簡單，用血量少，成本低等優(yōu)點(diǎn)。王春霖[5]采用放射免疫分析方法對(duì)哈蟆油中甾體激素進(jìn)行定量分析，結(jié)果測得雌二醇、孕酮和睪酮的含量分別為(52.3±5.8)，(918 7.9±19.4)和(52.3±5.89) pg/100 mg；李成義等[6]利用放免法分析了哈士蟆卵油、哈士蟆卵及哈士蟆油中雌二醇和孕酮的含量,其中哈士蟆油中雌二醇和孕酮的含量分別為102 400 0.0 pmol/L和200.0 nmol/L。

1.2 液相法測定林蛙油中雌激素含量 高效液相色譜法(HPLC)廣泛用于復(fù)雜成分化合物的微量分析，具有分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高等特點(diǎn)。2010年劉娟等[7]應(yīng)用高效液相色譜法測定蛤蟆油中雌二醇的含量，雌二醇在0.001～0.016 μg(r=0.999 7)范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。2010年曹陽等[8]應(yīng)用RP-HPLC法測定林蛙卵中雌二醇的含量,雌二醇在4.24～50.9 μg/mL范圍內(nèi)相性關(guān)系良好(r=0.999)。

1.3 氣質(zhì)法測定林蛙油中激素類含量 氣質(zhì)聯(lián)用法(GC-MC)具有靈敏度高、速度快、時(shí)間短、精密度高及效能高等特點(diǎn)。2010年陳燕超等[9]利用氣質(zhì)法對(duì)林蛙油進(jìn)行了研究，測定出8種甾體類成分，其中測得膽固醇、膽甾-3-酮、膽甾-3,5二烯-7-酮、菜油甾醇、膽甾-4-烯-3-酮、膽甾-4，6-二烯-3-酮、豆甾醇-22，23-二氫及膽甾-8-烯-7-酮的相對(duì)含量分別為32.36%、0.925%、2.811%、0.611%、7.657%、1.395%、0.316%和0.768%。

2 林蛙油中雌激素成分的藥理研究

2.1 林蛙油對(duì)機(jī)體生長及性器官的影響 2008年吳朝霞等[10]探討了林蛙油對(duì)去勢大鼠血清中雌二醇、孕酮、睪酮及白介素2有升高作用,但對(duì)促黃體生成素及促卵泡素有明顯抑制作用。張蔚君等[11]報(bào)道林蛙油對(duì)正常小鼠體質(zhì)量作用不明顯，但可顯著抑制體虛小鼠體質(zhì)量的減輕，并對(duì)雌性幼年小鼠有顯著促性成熟作用，可使去勢幼年大鼠前列腺及睪丸生長。

2.2 林蛙油的抗衰老研究 2012年葉豆丹等[12]報(bào)道林蛙油可使免疫力低下的小鼠體內(nèi)不飽和脂肪酸含量增加，從而達(dá)到抗氧化的作用，延緩小鼠衰老。張煒煜等[13]在2012年研究了林蛙油對(duì)正常小鼠和衰老模型小鼠體內(nèi)雌二醇含量及血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)的分析，得到服用林蛙油對(duì)機(jī)體的雌二醇含量沒有明顯作用，但對(duì)機(jī)體的免疫低下和抗衰老有一定作用[14]。

3 結(jié)語

隨著世界各國對(duì)林蛙油的需求量不斷加大，林蛙油作為食品、保健品的安全性也成為了焦點(diǎn)。從而闡明林蛙油所含雌性激素的種類、含量及對(duì)人體的影響程度，揭示其營養(yǎng)保健價(jià)值和藥理作用，為名貴中藥材林蛙油的合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，為林蛙產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展及促進(jìn)其地方產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展具有重要意義[15]。

[1]姜大成.中國林蛙與哈蟆油[M].長春:吉林科學(xué)技術(shù)出版社,2010:219.

[2]姜大成,肖井雷.18份東北不同產(chǎn)地哈蟆油的質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].中藥材,2007,30(10):1212.

[3]田春雨,薄建柱,薄海美,等.10份不同產(chǎn)地哈蟆油營養(yǎng)保健價(jià)值的評(píng)價(jià)研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2009,36(7):1186-1188.

[4]崔桂友.哈蟆油的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察和化學(xué)成分測定[J].生物學(xué)雜志,2000,17(l):27-29.

[5]王春霖.哈士蟆油甾體激素定量分析及藥理作用[J].中藥通報(bào),1985,10(2):44.

[6]李成義,孫文偉,姜熙羅,等.蛤士蟆卵油化學(xué)成分的分析[J].中國藥學(xué)雜志,1994,29(12):712.

[7]劉娟,劉爽,劉程誠.高效液相色譜法測定蛤蟆油中雌二醇的含量[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,38(1):138-139.

[8]曹陽,張若文,錢忠直,等.RP-HPLC測定林蛙卵中的雌二醇的含量[J].中藥新藥與臨床藥理,2010,21(5):540-542.

[9]陳燕超,胡巖,錢忠直,等.GC-MS法對(duì)哈蟆油中甾體類化合物的分析[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,26(5):660-661.

[10]吳朝霞,王曉華,劉樺,等.莪術(shù)、哈蟆油對(duì)去勢后大鼠雌激素水平及受體表達(dá)的影響[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,28(5):746-749.

[11]張蔚君,任昕,錢立,等.哈蟆油對(duì)生長及性器官的影響[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1998,15(02):136-137.

[12]葉豆丹,王化宇,李星,等.哈蟆油延緩衰老的作用機(jī)制研究[J].中國藥房,2012,23(47):4419-4421.

[13]張煒煜,李霞,王化宇,等.哈蟆油對(duì)小鼠體內(nèi)雌二醇含量及血常規(guī)影響的研究[J].中藥材,2012,35(10):1553-1556.

[14]徐英江,田秀慧,張秀珍,等.超高液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)水產(chǎn)品8種雌激素的測定[J].分析測試學(xué)報(bào),2010,29(2):152-156.

[15]王玉飛,周凱,李繼革.GC/MS/MS法同時(shí)測定海產(chǎn)品中四種雌激素殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2006,26(1):21-23.