周 利，葛 方，楊中林

(中國(guó)藥科大學(xué) 現(xiàn)代中藥教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210009)

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高良姜水提和醇提樣品液解酒效果比較研究

周 利，葛 方，楊中林*

(中國(guó)藥科大學(xué) 現(xiàn)代中藥教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210009)

目的：比較研究高良姜水提樣品液和醇提樣品液的解酒效果及對(duì)酒精性肝損傷的保護(hù)作用。方法：第1天小鼠均用52℃紅星二鍋頭白酒0.14mL/10g體重灌胃，造成小鼠急性酒精中毒，灌酒30min后，模型組給予蒸餾水，其余各組給予相應(yīng)的藥物，灌胃體積為0.2mL/10g體重，檢測(cè)指標(biāo)為小鼠在金屬網(wǎng)上的攀附時(shí)間，研究藥物的解酒作用。第2天至第6天小鼠給酒造模3h后給藥，造成小鼠酒精性肝損傷模型，檢測(cè)指標(biāo)為血清中GPT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)的活性，研究藥物的保肝作用。結(jié)果：高良姜水提樣品液和醇提樣品液都能延長(zhǎng)小鼠在金屬網(wǎng)上的攀附時(shí)間，并降低酒精性肝損傷小鼠血清中GPT的活性。結(jié)論：水提高良姜的解酒效果和保肝效果均優(yōu)于醇提高良姜。

高良姜；解酒作用；酒精性肝損傷

隨著人們物質(zhì)生活水平的不斷提高，飲酒過(guò)量已成為一種普遍現(xiàn)象。飲酒過(guò)量可導(dǎo)致中毒，引起機(jī)體生理功能紊亂，嚴(yán)重時(shí)可因呼吸肌麻痹而致死。目前，西藥并無(wú)特效解酒藥物，而中藥在解酒方面卻有較好效果。因此，為了人們的身心健康，提高人們的健康水平，根據(jù)解酒產(chǎn)品的需求及現(xiàn)狀，有必要對(duì)解酒藥物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

高良姜性味辛熱，有散寒止痛、溫中止嘔之功，可用于解酒毒。藥理學(xué)研究表明，其具有抗?jié)?、抗腹瀉、鎮(zhèn)痛抗炎、抗血栓形成、抗氧化、抗菌等藥理活性[1-2]。有研究表明，高良姜對(duì)酒精性肝損傷具有保護(hù)作用[3]。目前還未見(jiàn)有關(guān)高良姜解酒作用的研究報(bào)道。本文通過(guò)建立小鼠急性酒精中毒和酒精性肝損傷模型，研究高良姜的解酒作用和對(duì)小鼠急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器

BS124S型萬(wàn)分之一電子天平[賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司]，80-2型低速離心機(jī)(江蘇金壇市金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠)，96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Costar公司)，DG5033A型酶標(biāo)儀(華東電子)，10μL、50μL、200μL和1 000μL移液器[大龍醫(yī)療器設(shè)備(上海)有限公司]，垂直金屬網(wǎng)(0.6cm×0.6cm孔徑，50cm×50cm長(zhǎng)寬)。

1.2 試劑與試藥

高良姜(產(chǎn)地:廣西，批號(hào):130427，購(gòu)自南京上元堂天景山藥房，經(jīng)中國(guó)藥科大學(xué)楊中林教授鑒定為姜科植物高良姜(AlpiniaofficinarumHance)的干燥根莖)，52℃紅星二鍋頭白酒(北京紅星股份有限公司)，GPT測(cè)試盒(批號(hào)：20130926，南京建成生物工程研究所)，海王金樽(深圳市海王健康科技發(fā)展有限公司)。

1.3 動(dòng)物

ICR小鼠，雄性，體重23～30g，55只，購(gòu)自揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心。

2 實(shí)驗(yàn)樣品液制備

2.1 水提高良姜實(shí)驗(yàn)樣品液制備

精密稱取高良姜6.75g，加10倍量水(67.5mL)浸泡2h，分別以10倍、8倍、8倍量的水，各直火加熱提取一次，時(shí)間分別為2h、2h、1h，合并三次續(xù)濾液，減壓回收，加蒸餾水定容至100mL，得到的藥液濃度為0.067 5g/mL，備用。

2.2 醇提高良姜實(shí)驗(yàn)樣品液制備

精密稱取高良姜6.75g，加10倍量70%的乙醇(67.5mL)浸泡2h，分別以10倍、8倍、8倍量的70%的乙醇，各回流加熱提取一次，時(shí)間分別為2h、2h、1h，合并三次續(xù)濾液，減壓回收至無(wú)醇味，加蒸餾水定容至100mL，得到的藥液濃度為0.067 5g/mL，備用。

2.3 陽(yáng)性藥配制

取7片海王金樽(7g)，研成粉末，精密稱取6.75g，放入100mL的容量瓶中，加蒸餾水定容至100mL，即得，濃度為0.0675g/mL。

3 方法與結(jié)果

3.1 高良姜水提樣品液和醇提樣品液解酒效果比較

實(shí)驗(yàn)分組情況為:55只小鼠隨機(jī)分為5組各11只，分別為：空白組、模型組、海王金樽組、醇提高良姜組、水提高良姜組。實(shí)驗(yàn)前12h小鼠禁食。每只小鼠均用52℃紅星二鍋頭白酒0.14mL/10g體重灌胃，灌酒30min后，模型組給予蒸餾水，灌胃體積為0.2mL/10g體重；其余各組給予相應(yīng)的藥物，給藥劑量為1.35g/kg體重，給藥體積為0.2mL/10g體重，藥物濃度為0.067 5g/mL。

在給予藥物30min、90min、3h和4.5h后，將小鼠放在垂直懸掛的金屬網(wǎng)正中間。同時(shí)記錄小鼠在金屬網(wǎng)上的攀附時(shí)間(把小鼠放在金屬網(wǎng)上直至從金屬網(wǎng)上掉落的時(shí)間)，時(shí)間以秒(s)來(lái)記錄。對(duì)于在金屬網(wǎng)上的攀附時(shí)間超過(guò)10min 中的小鼠，其攀附時(shí)間一律記為10min(即600s)。

3.2 高良姜水提樣品液和醇提樣品液保肝效果比較

小鼠連續(xù)給酒造模6天，連續(xù)給藥6天。從第2天開(kāi)始，給酒造模3h后給藥。于連續(xù)給藥的第6天眼底靜脈叢取血。分離血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)方法測(cè)定血清中GPT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)的活力。

3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：海王金樽組、水提高良姜組與模型組比較，海王金樽組和水提高良姜組小鼠的攀附時(shí)間延長(zhǎng)(P<0.05)，說(shuō)明海王金樽和水提高良姜的解酒效果顯著。模型組與空白組比較，模型組的GPT值升高(P<0.05)，說(shuō)明小鼠的酒精性肝損傷模型成功；海王金樽組和水提高良姜組與模型組比較，海王金樽組和水提高良姜組小鼠的GPT值降低(P<0.05)，說(shuō)明海王金樽和水提高良姜具有保護(hù)肝損傷的作用。在給藥30min和4.5h時(shí)各給藥組小鼠的攀附時(shí)間與模型組比較,P>0.05。各組藥物的解酒效果和保肝作用見(jiàn)表1、表2。

表1 小鼠第1天的攀附時(shí)間

注：與模型組比較,*P<0.05;與模型組比較,△P<0.05。

表2 血清GPT的測(cè)定結(jié)果 ±s，卡門(mén)氏單位)

注：與空白組比較,△P<0.05；與模型組比較,*P<0.05。

4 討論

醉酒也稱乙醇中毒，是指一次飲酒過(guò)量而導(dǎo)致的中樞神經(jīng)等發(fā)生損傷的過(guò)程。乙醇攝入后，75%由十二指腸和空腸吸收，其余由胃吸收。95%以上乙醇在體內(nèi)經(jīng)過(guò)肝臟氧化、分解和代謝，其余乙醇未經(jīng)氧化直接經(jīng)腎從尿中排出、經(jīng)呼吸道呼出或經(jīng)皮膚汗腺隨汗排出[4]。乙醇及其代謝產(chǎn)物能促進(jìn)體內(nèi)氧自由基的生成和脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，誘發(fā)器官損傷，尤其是肝及神經(jīng)系統(tǒng)。

要使人快速醒酒，恢復(fù)清醒狀態(tài)，就要加速肝臟中乙醇的氧化分解代謝，減少其在體內(nèi)蓄積；同時(shí)要增強(qiáng)清除自由基的能力，防止自由基對(duì)機(jī)體尤其是肝臟的直接或間接損害[5]。

本實(shí)驗(yàn)以小鼠在金屬網(wǎng)上的攀附時(shí)間長(zhǎng)短來(lái)判斷小鼠的清醒狀態(tài)，結(jié)果表明水提和醇提高良姜液都可以使小鼠的攀附時(shí)間延長(zhǎng)，但是水提液效果更顯著。其作用機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。

目前認(rèn)為，過(guò)量的氧自由基在酒精性肝損傷發(fā)病過(guò)程中起了重要作用。機(jī)體大量攝入乙醇后，經(jīng)乙醇脫氫酶和微粒體乙醇氧化系統(tǒng)分解代謝，產(chǎn)生大量氧自由基，導(dǎo)致肝細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，引起細(xì)胞代謝及功能障礙，造成肝細(xì)胞氧化損傷[6]。本研究發(fā)現(xiàn)，高良姜能顯著降低急性酒精性肝損傷小鼠血清GPT水平，提示高良姜對(duì)酒精性肝損傷小鼠具有一定的保肝作用。但其作用機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

[1] 胡佳惠, 閆明. 高良姜的研究進(jìn)展[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2009,20(10)：2544-2546.

[2] 張明發(fā), 沈雅琴. 高良姜的溫里藥理研究[J]. 陜西中醫(yī), 1996,17(7)：324-326.

[3] 周園, 黎小妍, 熊天琴, 等. 高良姜對(duì)小鼠急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用[J]. 北方藥學(xué), 2012(7)：30-31.

[4] 郭金英. 中草藥解酒藥物研究進(jìn)展[J]. 釀酒科技, 2007(11)：86-91.

[5] 鐘曉凌, 王然. 醒酒機(jī)理的研究進(jìn)展[J]. 科教文匯, 2009(24)：271-272.

[6] 馮志強(qiáng), 沈志祥, 譚詩(shī)云. 酒精性脂肪肝的發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 世界華人消化雜志, 2002(3):346-348.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

Study on the Anti-alcoholism Effect of Alpinia officinarum Hance of Water Extraction and Alcohol Extraction

Zhou Li,Ge Fang, Yang Zhonglin*

(Key laboratory of Modern Chinese Medicines of Ministry of Education, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009,China)

Objective:To Study the Anti-alcoholism Effect and the protective effect of alcoholic liver injury of Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction. Methods:Alcoholic liver injury in mice model was established by alcohol gavage (52%U/U at 20mL/kg)per day for six days．Day 1 test in vertical metal clings time in mice. On the sixth day the determination of serum Glutamic Pyruvic Transaminase (GPT) activity. Results:Compared with model group, the clings time in the metal net was prolonged and the levels of GPT was significantly lowered by Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction. Conclusion:Alpinia officinarum Hance of water extraction and alcohol extraction has the Anti-alcoholism Effect and the protective effects on acute alcohol-induced liver injury in mice, but Alpinia officinarum Hance of water extraction was better than Alpinia officinarum Hance of alcohol extraction.

Alpinia Officinarum Hance; Anti-alcoholism Effect; Alcoholic Liver Injury

2014-03-07

周利 (1989-)，女，中國(guó)藥科大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)榻饩扑幩幚碜饔谩?/p>

楊中林(1950-)，女,滿族，中國(guó)藥科大學(xué)教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橹兴幮滤幯邪l(fā)。E-mail:yzl1950@126.com。

R285.5

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1673-2197(2014)13-0004-02