王紹燕

【摘 要】目的：動態(tài)觀察高膽紅素癥新生兒同步換血前中后，T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的變化，為高膽紅素血癥新生兒換療法提供細(xì)胞免疫學(xué)基礎(chǔ)理論。方法：采用間接熒光法和SP法，檢測高膽紅素血癥新生兒換血前、換血中、換血后3個時段中T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞的表達(dá)水平。結(jié)果：高膽紅素血癥新生兒換血前與換血中、換血后比較，除了換血中CD8外，其它均P＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：高膽紅素血癥新生兒換血治療后各種免疫細(xì)胞的變化，證實了高膽紅素血癥新生兒換血治療是迅速的、科學(xué)的、臨床行之有效的一種治療方法，為高膽紅素血癥新生兒早期換血療法充實了免疫學(xué)基礎(chǔ)理論。

【關(guān)鍵詞】T細(xì)胞亞群；NK細(xì)胞；高膽紅素血癥；新生兒；同步

【中圖分類號】R722 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004-7484（2014）03-01103-01

新生兒高膽紅素血癥是由各種原因引起的新生兒期最常見疾病之一，嚴(yán)格威脅新生兒生命健康，約有50%~75%患兒死于急性期，幸存者約有75%~90%留有聽力、視覺、智能發(fā)育等嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥【1】。換血治療是高膽紅素血癥最迅速的方法，目前多采用同步換血治療（即同時、同步由外周靜脈注血，撓動脈或肱動脈抽血）【2、3】。本文筆者自2009年1月至2012年12月間在我院新生兒科診斷為病理性高膽紅素血癥新生兒70例進(jìn)行了外周動靜脈同步換血療法，同時在換血治療的前、中、后3個時段，分別檢測血清膽紅素變化及血液中免疫細(xì)胞水平的變化，皆在探討換血療法對高膽紅素血癥新生兒細(xì)胞免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為2009年1月至2012年1月間在我院兒科診斷為病理性高膽紅素血癥的新生兒70例，其中男性50例，女性20例。胎齡（36+5）W，出生體重（2.886+0.709）kg； 早產(chǎn)118例，足月兒62例。黃疸原因：ABO血型不含溶血病40例，G-6-PD缺乏癥18例，β-地中海盆血1例，感染性黃疸3例，早產(chǎn)兒8例。20例為高膽紅素血癥腦病警告期新生兒。所有患兒均行同步控血治療，住院時間為5-8d，平均7.2d。高膽紅素血癥新生兒血清均超過342μmol/L，且主要為結(jié)合膽紅素。

所有病例均符合中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)會新生兒學(xué)制定的換血標(biāo)準(zhǔn)【4】：（1）產(chǎn)前診斷基本明確而新生兒出生時，臍帶血紅蛋白低于120g/L，伴水腫、肝脾腫大，心力衰竭者；（2）血清膽紅素超過342μmol/L，且主要為結(jié)合膽紅素者；（3）凡有早期核黃疸癥狀者，不論血清膽紅素濃度高低，都要考慮換血因為核黃的發(fā)生與否，除與血清膽紅素有關(guān)外，尚需考慮其他因素；（4）早產(chǎn)兒及前一胎病情嚴(yán)重者，尚需適當(dāng)放寬換血指征。因為早產(chǎn)兒有較多促進(jìn)核黃疸發(fā)生的因素。前一胎有死胎，全身水腫、嚴(yán)重貧血等病史者，此胎也往往也嚴(yán)重。生后數(shù)天也可考慮換血。

標(biāo)本采集：每一位高膽紅素血癥新生兒在換血前、中、后均抽脂動脈肝素抗凝血2ml，以備檢測用。

1.2 方法

①常規(guī)檢查血清膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素在換血前、換血中、換血后3個時段變化值；②T細(xì)胞亞群（CD3、CD4、CD8）的測定采用間接免疫熒光技術(shù)，分別檢測CD3、CD4、CD8細(xì)胞百分率。試劑由美國RD有限公司提供，嚴(yán)格按說明操作；③自然殺傷細(xì)胞（NK16、NK57）的測定采用SP法（Biotin-Strdptarin-Peroxdase)，試劑由美國RD有限公司提高，嚴(yán)格按照說明操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

檢驗數(shù)據(jù)均以SPSS10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 換血前、中后膽紅素變化

70例患兒換血前、中后血清總膽紅素、間接膽紅素顯著下降，換血后總膽紅素、間接膽紅素?fù)Q出率分別為52.66%、52.25%，直接膽紅素?fù)Q血前、中、后無顯著差異，見表1。

2.2 換血前、換血中、換血后3個時段T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞表達(dá)水平變化

70例高膽紅素血癥新生兒換血前、中、后T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞比較，P均＜0.01游離膽紅素對腦細(xì)胞有毒性作用，血與腦游離膽紅素梯度越高，則進(jìn)入腦的量越多，膽紅素腦病的發(fā)生率越高【5】。換血療法可以換出85%~90%的致敏紅細(xì)胞及降低循環(huán)中60%的膽紅素抗體，因此，雙倍量換血能迅速有效地防止膽紅素腦病的發(fā)生【6】本組病人膽紅素的換出率為52.66%，與文獻(xiàn)報道的50%-60%的膽紅素?fù)Q出率相符合【2.7】。。本組病例中有1例出現(xiàn)膽紅素腦病的癥狀，經(jīng)換血后膽紅素腦病的癥狀消失，但腦干聽覺誘發(fā)電位檢查異常，提示換血能阻止病情的進(jìn)一步發(fā)展，但對已發(fā)生的腦損傷無逆轉(zhuǎn)作用。因此，必須掌握換血的適應(yīng)癥，對存在高危因素的患兒應(yīng)盡早行換血術(shù)。同步換血可有效降低血中膽紅素，換出致敏的紅細(xì)胞，減輕溶血，從而避免膽紅素腦病的發(fā)生。

T細(xì)胞是不均一的群體，可根據(jù)表面分子及免疫功能分成不同的亞群。CD3細(xì)胞表達(dá)αβTCR占100%，而CD4、CD8細(xì)胞表達(dá)αβTCR占60%-65%。T細(xì)胞亞群具有識別抗原、細(xì)胞毒性作用，抑制T細(xì)胞作用。既有免疫調(diào)節(jié)作用，又有效應(yīng)細(xì)胞作用【8】。而自然殺傷細(xì)胞NKCD16、NKCD57也是重要的免疫細(xì)胞，不僅參與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生【9】。這些免疫細(xì)胞在高膽紅素血癥新生兒換血治療前、中、后期3個時段的表達(dá)水平，我們進(jìn)行了檢測和相關(guān)性研究。

本資料顯示，高膽紅素血癥新生兒換血前與換血中、換血后各種免疫細(xì)胞比較，P均＜0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。值得注意的是，高膽紅素血癥新生兒血中高濃度膽紅素可降低人體網(wǎng)關(guān)內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能，并抑制細(xì)胞免疫功能【10】。具有毒性作用的間接膽紅素抑制了患兒整體免疫功能。同時，膽紅素具有細(xì)胞毒性作用，它通過啟動活化Fas基因表達(dá)，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞凋亡，使患兒免疫功能降低【11】。高膽紅素血癥新生兒血中膽紅素濃度越高，其毒性對患兒T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞產(chǎn)生了免疫耐受，表達(dá)水平受到抑制，因此，臨床表現(xiàn)為T細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞數(shù)量減少【12】本文證實了以上相關(guān)理論，同時也證實了膽紅素不僅可損害新生兒的顱腦屏障及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，還可致患兒整體的細(xì)胞免疫功能低下，這也是高膽紅素血癥新生兒易并發(fā)感染的理論基礎(chǔ)。

同時，本資料也進(jìn)一步證實了同步換血療法是治療高膽紅素血癥新生兒迅速的、科學(xué)的、臨床行之有效的一種方法。從表1、表2 中可以看出，高膽紅素水平由換血前、換血中、換血后、血清膽紅素、間接膽紅素水平由換血前的高濃度水平迅速降低乃至恢復(fù)正常；各種細(xì)胞是由換血前低水平慢慢增高，乃至恢復(fù)正常。這是因為換血可及時有效地移去抗體和致敏紅細(xì)胞，減輕溶血，降低患兒血中膽紅素血清濃度、防止核黃疸，及時糾正貧血，防止新生兒心力衰竭。

由此可見，同步換血療法可有效降低血中膽紅素，換出致敏紅細(xì)胞，從而避免膽紅素腦病的發(fā)生。換血后血氣、電解質(zhì)的內(nèi)環(huán)境的變化均在正常范圍，同時換血療法可提高高膽紅素血癥新生兒的細(xì)胞免疫功能，并可縮短療程。筆者通過動態(tài)觀察高膽紅素血癥新生兒換血治療的各種免疫細(xì)胞的變化，證實了高膽紅素癥新生兒換血治療是迅速的、科學(xué)的、行之有效的一種方法。本研究為高膽紅素血癥新生兒換血療法充實了免疫學(xué)基礎(chǔ)理論。

參考文獻(xiàn)：

[1] 黃費祥，王君霞，戴永利，等.改良同步換血療法治療新生兒間接膽紅素血癥中的應(yīng)用[J].中國綜合臨床，2003，19（4）：372-373.

[2] 盧錫胤.同步換血療法治療新生兒高膽紅素血癥的臨床分析[J].醫(yī)學(xué)創(chuàng)新研究，2007，4（15）：56-57.

[3] 江凡，祝愛霞，蔡葉琴，等.高膽紅素血癥新生兒換血前后細(xì)胞免疫功能的研究[J].醫(yī)學(xué)創(chuàng)新研究，2008，5（8）：19-20.

[4] 中華醫(yī)學(xué)會兒科分會新生兒學(xué)組.全國新生兒黃疸與感染學(xué)術(shù)研討會紀(jì)要（附新生兒黃疸干預(yù)推薦方案）[J].中華兒科雜志，2001年第39期，184-187.

[5] 許積德.小兒內(nèi)科學(xué)[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1995,274.

[6] 楊橫，黃尤國，余加林.雙管同步換血治療新生兒高膽紅素血癥40例臨床分析[J].四川醫(yī)學(xué)，2004，12（25）：1338-1339.

[7] 高建慧，李德庚，黃東明，等.新生兒高膽紅素癥換血前后血液內(nèi)環(huán)境變化的研究[J].實用兒科臨床雜志，2002，17（3）：208-209.

[8] 吳希如，李萬鎮(zhèn)，主編。臨床兒科學(xué)[M].第1版.北京：科學(xué)出版社，2005,401-456.

[9] 諸福棠，胡亞美，江戴芳，主編.實用兒科學(xué)[M].第8版.北京：人民軍醫(yī)出版社，2005，559-569.

[10] Kimmings AN.Inflammafory and immunolopic effects of obstrcuctive jaundice:pathogenesis and treatment[J].Jam-coll-surg,1995,181(6):567-568.

[11] 石曉枝，嵇黎嬰.黃疸嬰兒淋巴細(xì)胞凋亡及免疫功能變化的臨床研究[J].中國誤診雜志，2002，2（6）：820-822.

[12] 鄒建話，祝愛霞，江凡，等.高膽紅素血癥新生兒T細(xì)胞亞群，NK細(xì)胞表達(dá)的研究[J]，醫(yī)學(xué)創(chuàng)新研究雜志，2007，4（14）：5-6.