李雪芹，李美位，陳麗萍

(貴陽市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，貴州 貴陽 550081)

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益心舒膠囊中人參皂苷Rg1、Re不同提取方法及總量測定

李雪芹，李美位*，陳麗萍

(貴陽市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，貴州 貴陽 550081)

目的：比較兩種不同提取方法對益心舒膠囊中人參皂苷Rg1和Re含量及總量的影響。方法：對照組按《中國藥典》2010版提取方法；實(shí)驗(yàn)組采用三氯甲烷回流，藥渣加入水飽和正丁醇液，密塞，放置過夜，超聲處理并過濾，續(xù)濾液采用正丁醇飽和氨試液提取3次，正丁醇層液置于蒸發(fā)皿加熱蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至容量瓶。其中人參皂苷Rg1和Re采用《中國藥典》2010版含量測定方法測定。結(jié)果：經(jīng)檢測，對照組人參皂苷Rg1含量為0.71mg/g，Re含量為4.29mg/g，Rg1和Re總含量為5.00mg/g；觀察組人參皂苷 Rg1含量為0.34mg/g，Re含量為2.33mg/g，Rg1和Re總總量為2.67mg/g。結(jié)論：研究表明，與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組提取過程簡單，周期較短，但人參皂苷 Rg1、Re含量及總量均較低，改進(jìn)提取方法、縮短周期、簡化過程、提高提取含量測定結(jié)果將是下一步實(shí)驗(yàn)研究的方向。

人參皂苷 Rg1；人參皂苷Re；提取方法；含量測定

益心舒膠囊是由人參、麥冬、五味子、黃芪、丹參等多味中藥制成的復(fù)方制劑，已收載于《中國藥典》2010版第一增補(bǔ)本[1]。該藥方以人參為君藥，人參主要活性成分為人參皂苷 Rg1、Re，具有益氣復(fù)脈、活血化瘀、養(yǎng)陰生津的功效，可用于治療氣陰兩虛、心悸脈結(jié)代、胸悶不舒、胸痛及心絞痛等疾病。本文分別按《中國藥典》2010版第一增補(bǔ)本規(guī)定和文獻(xiàn)報(bào)道方法，制成供試液，再采用《中國藥典》2010版人參含量測定方法，比較人參皂苷Rg1和Re含量及總量，探究不同提取方法對Rg1和Re的影響。

1 試劑與方法

1.1 儀器

安捷倫Agilent-1260型高效液相色譜儀；KQ5200DE型超聲波清洗器； CP225D型電子分析天平(Sartorius，德國)；HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋 (常州譜天儀器有限公司)。

1.2 試劑

人參皂苷Rg1對照品(批號：110703-201128，中國食品藥品檢定研究院)；人參皂苷Re對照品(批號：110754-201324，中國食品藥品檢定研究院)；益心舒膠囊 (貴州信邦制藥股份有限公司，批號：20131009，規(guī)格0.4 g/粒)；乙腈(色譜純)；水為超純水；其它試劑均為分析純。

1.3 方法

1.3.1 對照品溶液制備 精密稱取人參皂苷Rg1和Re對照品，分別加甲醇制成0.482 9mg/mL的人參皂苷 Rg1和0.387 5mg /mL的人參皂苷Re對照品溶液。

1.3.2 供試品溶液制備 對照組按《中國藥典》2010版提取方法[1]：取30粒益心舒膠囊粉末研細(xì)，混勻，精密稱取4.0g，置于索氏提取器，加三氯甲烷和乙醚各75 mL，加熱回流3h，藥渣揮去溶劑，將藥渣移入具塞錐形瓶，加2%氫氧化鉀甲醇溶液50mL，加熱回流1h，放冷濾過，加少量甲醇液洗滌藥渣及容器，合并洗液和濾液，蒸干，殘?jiān)?0mL水溶解；選用水飽和正丁醇液提取4次(20mL、20mL、10mL、10mL)，合并正丁醇液，先后分別用氨試液、1%磷酸二氫鉀溶液、正丁醇飽和水溶液各40mL洗滌，棄去洗滌液，加正丁醇液蒸干，殘?jiān)x用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶，加甲醇定容，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液即得。

實(shí)驗(yàn)組按文獻(xiàn)報(bào)道方法提取[2]：取30粒益心舒膠囊粉末研細(xì)，混勻，取約2.0g，置于索氏提取器，加三氯甲烷150mL，85℃加熱回流3h，藥渣揮去三氯甲烷，將藥渣移入具塞錐形瓶，精密加入水飽和正丁醇液50 mL，密塞，靜置過夜；超聲(功率250W，頻率50kHz)處理30 min，濾過，棄初濾液，精密量取續(xù)濾液25mL，置于分液漏斗，采用正丁醇飽和氨試液提取3次，每次10mL，棄氨試液，正丁醇液置于蒸發(fā)皿加熱蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5mL容量瓶，加甲醇至刻度搖勻，過濾，取續(xù)濾液即得。

1.3.3 色譜條件 安捷倫 C18色譜柱(100mm×4.6mm，3.5μm)；流動相：0.1%磷酸溶液-乙腈(82∶18)；體積流量：1.0mL/min；檢測波長：203nm，柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 對照品與樣品HLPC色譜

對照品與實(shí)驗(yàn)樣品的色譜見圖1。

圖1 對照品與樣品HLPC

注：1.人參皂苷Rg1；2.人參皂苷Re。

2.2 樣品測定

按《中國藥典》2010版第一增補(bǔ)版含量測定方法[1]進(jìn)行人參皂苷Rg1、Re含量測定，結(jié)果見表1和表2。

表1 對照組測定結(jié)果 (n=3)

表2 實(shí)驗(yàn)組測定結(jié)果 (n=3)

經(jīng)檢測，對照組測得Rg1含量為0.71mg/g，RSD含量為0.32%；Re含量為4.29mg/g，RSD為0.41%，Rg1和Re的總量為5.00mg/g。實(shí)驗(yàn)組測得人參皂苷 Rg1含量為0.34mg/g，RSD為0.95%；Re含量為2.33mg/g，RSD為1.51%，Rg1和Re的總量為2.67 mg/g。研究表明，對照組Rg1、Re測定含量及總量明顯高于實(shí)驗(yàn)組。

3 討論

3.1 流動相選擇

預(yù)實(shí)驗(yàn)選取配制1%磷酸二氫鉀-乙腈(80∶20)和1%磷酸二氫鉀-乙腈(82∶18)兩種流動相，后者條件下可較好分離人參皂苷Rg1和Re峰，峰型對稱，且與其它雜質(zhì)峰完全分離，效果較好。因此，該實(shí)驗(yàn)采用1%磷酸二氫鉀-乙腈(82∶18)作為流動相。

3.2 不同提取方法比較

對照組采用藥典規(guī)定方法，有兩次回流、七次萃取環(huán)節(jié)，耗時長，過程多，較為復(fù)雜，在萃取過程中常萃取不完全，而且容易乳化，尤其是用氨試液如果不是新鮮配制時，乳化現(xiàn)象更加嚴(yán)重；實(shí)驗(yàn)組文獻(xiàn)報(bào)道的方法，有一次回流、一次超聲和三次萃取，耗時相對較短，操作步驟相對簡單,取樣量小。

4 結(jié)論

對照組采用藥典方法提取較完全，測得含量值明顯高于試驗(yàn)組，但該方法較繁瑣，過程多，周期長。實(shí)驗(yàn)組采用文獻(xiàn)報(bào)道方法相對簡單，過程較少，周期較短；由于復(fù)方制劑益心舒膠囊處方組成大，成分復(fù)雜，提取不完全，故含量結(jié)果偏低。因此，改進(jìn)提取方法、縮短周期、簡化過程、提高提取含量測定結(jié)果將是下一步實(shí)驗(yàn)研究方向。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：220.

[2] 肖飛 ,李衛(wèi)民,李其鳳.益心舒膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2011,17(20):87.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

2014-07-14

李雪芹(1976-)，女，貴州省貴陽市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心助理工程師，研究方向?yàn)槭称?、藥品檢驗(yàn)。

李美位(1988-)，男，研究方向?yàn)槭称?、藥品檢驗(yàn)。

R286

A

1673-2197(2014)22-0012-02