李君華

【摘要】 目的 分析檢測中藥飲片對多重抗生素耐藥細(xì)菌的抑菌作用。方法 選用稀釋法，分析檢測24種常用中藥飲片的水煎液對大腸桿菌的多重抗生素耐藥菌種和敏感菌種的抑菌效果。結(jié)果 大多數(shù)中藥對敏感菌和耐藥菌的抑菌效果沒有明顯差別，其中只有連翹、決明子和甘草表現(xiàn)出明顯的抑菌差別。并且，耐藥菌相對于敏感菌來說對中藥更為敏感。結(jié)論 只有少數(shù)中藥對敏感菌和耐藥菌的抑菌效果存在差別，同時(shí)耐藥菌比敏感菌對中藥的敏感度更高，提示中藥治療細(xì)菌感染疾病可能會(huì)更具優(yōu)越性。

【關(guān)鍵詞】 中藥飲片；抗生素耐藥細(xì)菌；抑菌效果；敏感菌種

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2014.05.014 文章編號：1004-7484（2014）-05-2418-02

The bacteriostasis of Chinese medicine in multiple antibiotic-resistant bacteria

【Abstract】Objective To analyze and detect the antibacterial effect of Chinese medicine on multiple antibiotic resistant bacteria.Methods Agar dilution method was used to analysis the antimicrobial effect of water decoction of 24 Chinese medicines on multiple antibiotic escherichia coli resistant bacteria and sensitive strain.Results To the most Chinese medicine，there was no significant difference in the inhibitory effect between sensitive strain and resistant bacteria，except forsythia，cassia seed and licorice.Conclusion Only a little of Chinese medicine was difference in the bacteriostasis as to the sensitive bacteria and drug resistance bacteria.While drug resistance bacteria was more sensitivity than the sensitive bacteria to the traditional Chinese medicine.The Chinese medicine treatment may have a more advantages in the treatment of bacterial infections.

【Key words】 Chinese medicine；Antibiotic-resistant bacteria；Antibacterial effect；Susceptible

多重抗生素耐藥細(xì)菌是指一種能對3類或3類以上抗生素產(chǎn)生耐藥的微生物[1]。近年來，隨著抗生素應(yīng)用的日益廣泛和頻繁，抗生素耐藥菌已成為醫(yī)療界感染普遍存在的一個(gè)重要問題。據(jù)報(bào)道，在美國每年約有30萬患者因感染金黃色葡萄球菌而入院，其中有超過40%的患者是由于受到耐甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株的感染[2]。目前多重抗生素耐藥細(xì)菌的產(chǎn)生和流行已經(jīng)對社會(huì)造成了巨大的危害，它們的出現(xiàn)會(huì)造成感染復(fù)發(fā)，引起臨床治療的失敗，嚴(yán)重威脅到人們生命安全。因此，尋找能對抗多重抗生素耐藥細(xì)菌、代替抗生素來抑制病菌感染的藥物是眾多研究者關(guān)注的課題之一。已有研究報(bào)道眾多傳統(tǒng)中藥材對微生物具有一定的抑制作用[3]，本文研究了24種常見的中藥飲片對多重抗生素耐藥細(xì)菌的抑菌作用，旨在為中藥材在多重耐藥菌引起疾病中的應(yīng)用提供參考和依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥材和藥品 左氧氟沙星（山東魯抗制藥），阿奇霉素（西安利君制藥），頭孢噻肟鈉（齊魯制藥），硫酸慶大霉素（山東魯抗制藥），所有中藥飲片均為我院藥劑科提供。

1.2 實(shí)驗(yàn)菌種 大腸桿菌ATCC25922（標(biāo)準(zhǔn)敏感菌種，實(shí)驗(yàn)室保存），大腸桿菌S（臨床分離的敏感菌種），大腸桿菌R（臨床分離的耐藥菌種，對慶大霉素、頭孢吡肟、氨曲南、丁胺卡那、頭孢噻肟鈉等多種抗生素有耐藥性）

1.3 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基為MH培養(yǎng)基或營養(yǎng)瓊脂，由南京一基生化科技有限公司提供。

1.4 中藥飲片水煎液的制備 采用傳統(tǒng)的方法對中藥飲片進(jìn)行煎煮，將適量飲片置于砂鍋中，加水至高出藥材4cm左右，浸泡30分鐘后，中火煎煮30分鐘，將藥液倒出，過濾，取濾液，于4℃冰箱中保存，備用。

1.5 中藥平板的制作以及最低抑菌濃度（MIC）的測定 分別制作含中藥400、200、100、50、25、12.5、6.25、3.125mg/mL的MH培養(yǎng)基，在高溫下進(jìn)行濕熱滅菌半個(gè)小時(shí)，傾入平板，制備成含有中藥梯度的平板。吸取新鮮的菌懸液10μL（約100CFU/mL）點(diǎn)種于各中藥平板上，37℃下培養(yǎng)24小時(shí)，觀察各菌種的生長趨勢，計(jì)算其MIC?？股氐腗IC參考《微生物學(xué)試驗(yàn)指導(dǎo)》中的稀釋法進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 菌種對抗生素敏感性驗(yàn)證 首先，就臨床分離的菌種對抗生素的敏感性進(jìn)行驗(yàn)證。以藥敏紙片法對抗生素的耐受性進(jìn)行測定，結(jié)果表明臨床分離的耐藥性大腸桿菌為多重耐藥菌種。其次，比較大腸桿菌的標(biāo)準(zhǔn)敏感菌種和臨床分離的大腸桿菌敏感菌種對抗生素的敏感度。結(jié)果表明，見表1。臨床分離的和標(biāo)準(zhǔn)的敏感菌種對抗生素敏感度一致，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。提示臨床分離的耐藥菌和敏感菌均可用于后續(xù)的中藥試驗(yàn)。

2.2 中藥對耐藥菌和敏感菌的MIC 24種常見中藥材對臨床分離的耐藥菌和敏感菌的MIC，見表2。

3 討論

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，中藥對臨床分離的敏感菌和標(biāo)準(zhǔn)敏感菌的MIC存在一定的差異。因此，本研究以分離的敏感菌及耐藥菌同時(shí)用于試驗(yàn)，更有說服力。同時(shí)，本研究試驗(yàn)前先后對實(shí)驗(yàn)菌種的耐藥性和敏感性進(jìn)行了檢測，結(jié)果表明，試驗(yàn)菌種均符合要求，提示這些菌種可用于中藥的抑菌試驗(yàn)中，這樣所測得結(jié)果的可信度高。

中藥在臨床的治療時(shí)，其本身即存在著不明確的“量效關(guān)系”，表現(xiàn)出的療效的不穩(wěn)定，重復(fù)性差。所以在采用稀釋法就中藥的試驗(yàn)菌株MIC進(jìn)行測定時(shí)，從表3中結(jié)果可以看出，重復(fù)的2次試驗(yàn)中會(huì)出現(xiàn)較大的差別，因此2次結(jié)果不便作簡單的平均處理?？紤]到結(jié)果的偏差值較大，在數(shù)據(jù)處理時(shí)，本研究將數(shù)據(jù)相差4倍甚至更多的數(shù)據(jù)結(jié)果視為“存在有明顯差異”。結(jié)果提示，大多數(shù)的中藥飲片對敏感菌種和耐藥菌種的抑菌效果沒有明顯差別，而只有連翹、決明子和甘草表現(xiàn)出明顯的抑菌效果差別。另外，從表3中結(jié)果還可以看出，防風(fēng)、大黃、連翹、黃柏、蒲公英等多種中藥對大腸桿菌耐藥菌種的MIC較臨床分離的敏感菌種來說稍低，表明抗生素的耐藥性菌種對中藥的敏感性不變甚至是敏感性增加，這個(gè)結(jié)果同時(shí)提示，中藥在治療臨床細(xì)菌性感染疾病時(shí)存在著獨(dú)特的優(yōu)越性，特別是在抗生素治療失敗的時(shí)候，中藥治療的意義重大。

參考文獻(xiàn)

[1] 張景皓，肖明霞，季萍.黃芩、黃連、五味子對5種多重耐藥菌抑菌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].新疆醫(yī)學(xué)，2012，42（2）：4-7.

[2] 黃暨生，馬嫚，鄺棗園.自擬中藥復(fù)方對耐藥性金黃色葡萄球菌的抑菌作用研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，29（1）：53-55.

[3] 邱慶連，潘清清，張友平.五倍子、烏梅等45種中草藥提取物對鋸緣青蟹致病弧菌的抑菌作用研究[J].浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2010，29（1）：34-38.