魯煥云
【摘 要】目的:尋找實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性的方法。方法:對(duì)133例開放性創(chuàng)傷患者傷口膿液和分泌物,進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏分析。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明自動(dòng)化儀器不僅操作方便簡(jiǎn)單,而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠。結(jié)論:外傷術(shù)后發(fā)生感染,應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn),合理用藥,同時(shí)應(yīng)行感染病灶的清除,清除壞死組織與炎性肉芽組織異物,徹底引流或采用閉式?jīng)_洗療法,才能達(dá)到良好的效果。
【關(guān)鍵詞】感染;細(xì)菌;藥敏試驗(yàn)
隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,醫(yī)院應(yīng)多采用現(xiàn)代化的全自動(dòng)分析儀器,節(jié)約患者等待病情確診的時(shí)間,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。在臨床工作中,醫(yī)生應(yīng)重視感染細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定和藥敏試驗(yàn),從而合理地使用抗生素,而不能按照經(jīng)驗(yàn)亂用、濫用抗生素。細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果表明,開放性創(chuàng)傷感染性疾病的致病菌已發(fā)生變化,革蘭氏陰性桿菌感染率明顯上升,革蘭氏陽性球菌感染率下降,與劉尚才氏資料相符。
1 材料和方法
1.1 標(biāo)本采集 選取從2012年3月至2014年3月期間133例開放性創(chuàng)傷患者的傷口膿液和分泌物,送往我院檢驗(yàn)科細(xì)菌室?;颊呤軅课话ㄉ媳邸⑶氨?、手、股部、小腿和足。收集標(biāo)本時(shí)注意無菌操作,避免其他外來細(xì)菌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。
1.2 細(xì)菌培養(yǎng) 將標(biāo)本用生理鹽水稀釋為一定濃度的菌群,配制瓊脂培養(yǎng)基,然后置入BACTEC9120全自動(dòng)培養(yǎng)儀(BD,USA)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。
1.3 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn) 將培養(yǎng)分離得到的菌株用Micro Scan Walkaway96全自動(dòng)微生物分析儀(Siemens,German)及其配套的試劑(鑒定與藥敏復(fù)合板)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏分析。
1.4 質(zhì)量控制 用衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供的大腸埃希菌(ATCC 25922)和金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)作質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)參考菌株。
2 結(jié)果
從133例標(biāo)本中共分離出114株細(xì)菌,陽性率高,達(dá)85.7%;其中革蘭陽性菌65株(57%),革蘭陰性菌44株(38.6%),真菌5株(0.4%)。通過Micro Scan W/A96儀器軟件分析,我們發(fā)現(xiàn)分離率占前6位的細(xì)菌分別為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)、金黃色葡萄球菌(SA)、甲種溶血性鏈球菌、甲型副傷寒沙門菌和肺炎克雷伯菌,百分比分別為28.5%、19.3%、15.8%、10.5%、6.1%、4.8%。在凝固酶陰性葡萄球菌中,耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)占80.23%;而在金黃色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)占30.60%;除此之外,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別占其38.67%和46.21%。從藥敏分析結(jié)果可以看出,革蘭陽性球菌對(duì)青霉素耐藥率最高,可能與青霉素開發(fā)早,應(yīng)用多有關(guān),而其對(duì)萬古霉素耐藥率最低;革蘭陰性桿菌對(duì)氨芐西林耐藥率最高,而對(duì)亞胺培南和哌拉西林耐藥率最低。結(jié)果提示在臨床上選用抗生素時(shí),不應(yīng)隨意使用青毒素和氨芐西林這些廣譜抗生素,而應(yīng)針對(duì)具體感染選用特殊的抗生素。
3 討論
本實(shí)驗(yàn)采用自動(dòng)化儀器完成了對(duì)創(chuàng)傷感染細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定及藥敏分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果和大部分研究報(bào)道結(jié)果相同[ 1 ],證明自動(dòng)化儀器不僅操作方便簡(jiǎn)單,而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠。大腸埃希菌是人腸道中的正常棲居菌,其致病物質(zhì)之一是血漿凝固酶,因此其在大多數(shù)感染中都是最主要的病原菌,如尿路感染、血液感染等。凝固酶陰性葡萄球菌是在大量頭孢菌素和免抑制劑的廣泛使用后才成為醫(yī)源性感染的常見病原菌,特別是MRCNS,其檢出率和多重耐藥性呈逐年上升趨勢(shì),且感染后癥狀不典型,給臨床診斷和治療帶來困難。通過Micro Scan W/A96全自動(dòng)微生物分析儀,可準(zhǔn)確鑒定MRCNS,合理使用抗生素。金黃色葡萄球菌是革蘭陽性球菌的代表,是一種常見的病原菌,最早用青霉素治療SA感染,但由于MRSA逐漸增多,現(xiàn)臨床上不使用青霉素,而用紅霉素、慶大霉素或萬古霉素代替;這和我們的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致,我們的研究發(fā)現(xiàn)SA對(duì)青霉素的耐藥率為100%,而對(duì)萬古霉素的耐藥性最低,只有13.2%。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)主要由大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌產(chǎn)生,這類菌株對(duì)青霉素、第三代頭孢菌素(頭孢噻肟、頭胞他啶、頭孢哌酮、頭孢曲松等)以及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素(氨曲南)耐藥,并且ESBLs由質(zhì)粒介導(dǎo),容易在細(xì)菌中傳播,因此快速地篩選出ESBLs菌對(duì)治療感染有重要作用。Micro Scan W/A96全自動(dòng)微生物分析儀可以快速準(zhǔn)確的鑒定并檢出ESBLs菌,幫助抑制創(chuàng)傷感染,使患者創(chuàng)傷得以早日恢復(fù)。
近年來由于抗生素的廣泛使用及細(xì)菌變異的頻發(fā),使細(xì)菌對(duì)廣譜抗生素的耐藥性越來越高,引起人們的重視。在本研究中,我們將對(duì)開放性創(chuàng)傷感染傷口的膿液和分泌物進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定和藥敏試驗(yàn),以明確創(chuàng)傷感染中細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性和耐藥性,為臨床合理使用抗生素提供依據(jù)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不同的菌株其耐藥性有明顯的不同,常用的抗生素已不能滿足抗感染治療的需求,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,醫(yī)院應(yīng)多采用現(xiàn)代化的全自動(dòng)分析儀器,節(jié)約患者等待病情確診的時(shí)間,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。在臨床工作中,醫(yī)生應(yīng)重視感染細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定和藥敏試驗(yàn),從而合理地使用抗生素,而不能按照經(jīng)驗(yàn)亂用、濫用抗生素。對(duì)于外傷后感染的處理,僅強(qiáng)調(diào)合理使用抗生素是不夠的,更要強(qiáng)調(diào)清創(chuàng)術(shù)中操作的無菌觀念,充分清洗消毒,切除失活組織,合并骨折時(shí)要合理使用固定物,盡量選用外固定器固定骨折,創(chuàng)面要充分引流,對(duì)于污染嚴(yán)重、受傷時(shí)間超過8h、難以徹底清創(chuàng)的病例創(chuàng)口應(yīng)延遲閉合。如外傷術(shù)后發(fā)生感染,應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn),合理用藥,同時(shí)應(yīng)行感染病灶的清除,清除壞死組織與炎性肉芽組織異物,徹底引流或采用閉式?jīng)_洗療法,才能達(dá)到良好的效果[2]。
參考文獻(xiàn)
[1] 徐修禮,劉家云.細(xì)菌對(duì)抗生素耐藥機(jī)制研究的某些進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué) (臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè)),2002,23(2):83-85.
[2] 李萍,王懷斌,周玉寬.四肢外傷后感染細(xì)菌培養(yǎng)與藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析[J].淮海醫(yī)藥,1999,4(4):46.