李迎梅 孫曉紅 劉彤 鄧美榮 趙悅

隨著社會(huì)的發(fā)展, 食品安全問(wèn)題已成為全社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)。黃曲霉毒素作為一種致癌物, 已成為食品日常監(jiān)測(cè)工作中的重點(diǎn)。在黃曲霉檢測(cè)中, 多采用柱后衍生［1］, 而無(wú)需衍生的則采用超高效液相色譜［2］,本文采用高效液相色譜法測(cè)定食品中黃曲霉毒素的含量, 無(wú)需衍生, 操作更加簡(jiǎn)單。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Waters e2695高效液相色譜儀,2475熒光檢測(cè)器, J2 正壓固相萃取, AflaTest免疫親和柱。黃曲霉毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液：B1, G1：1.0 mg/L, B2, G2：0.3 mg/L。甲醇為色譜純。

1.2 黃曲霉毒素的檢測(cè)方法 色譜柱：Waters Xbridge C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流動(dòng)相：甲醇 -水(40+60)。流速 1ml/min, 柱溫 35℃ , 進(jìn)樣量 10 μl, 運(yùn)行時(shí)間30min。熒光檢測(cè)器：激發(fā)波長(zhǎng)：365 nm, 發(fā)射波長(zhǎng)：455 nm。

1.3 樣品前處理方法 稱取25 g樣品(精確至0.001 g)于250ml具塞錐形瓶中, 加入5 g氯化鈉及125ml甲醇-水(7+3)混勻, 超聲提取后進(jìn)行過(guò)濾。取15ml濾液加入30ml去離子水稀釋。準(zhǔn)確吸稀釋液15ml緩慢通過(guò)免疫親和柱后, 用10ml去離子水淋洗, 棄去全部淋洗液后用1ml甲醇洗脫, 經(jīng)0.22 μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)分析。

1.4 色譜分析 分別吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液及處理后的樣品進(jìn)行分析, 峰面積外標(biāo)法定量, 計(jì)算樣品中黃曲霉毒素的含量。

2 結(jié)果

2.1 黃曲霉毒素的色譜圖 見(jiàn)圖1。

2.2 方法的精密度和回收率 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示檢測(cè)限為 B1、G1在 1.5 ng/ml, B2、G2在 0.5 ng/ml。對(duì)樣品進(jìn)行高、中、低三個(gè)濃度的加標(biāo)實(shí)驗(yàn), 其加標(biāo)回收率在72.7%～98.7%之間, 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在5.52%～9.05%。

2.3 樣品測(cè)定 采用本方法共測(cè)定食品100份, 四種黃曲霉毒素均未檢出。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

3 討論

該方法建立了用HPLC檢測(cè)四種黃曲霉毒素的含量, 該方法操作簡(jiǎn)單, 測(cè)定結(jié)果可靠, 能夠完成對(duì)黃曲霉毒素的檢測(cè), 適用于食品中黃曲霉毒素的檢測(cè)。色譜柱后衍生熒光檢測(cè)花生中黃曲霉毒素B1, B2, G1,G2.色譜, 2004,22(6):658.

［1］于彥彬,萬(wàn)述偉.OASIS HLB固相萃取-高效液相

［2］蔡志斌,張英.無(wú)需衍生-超高效液相色譜法快速測(cè)定食品中黃曲霉毒素.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2012,23(2):312-315.