葉遠飛 周潔莉 賴 鸚

白細胞介素2干預肺結核復治患者體內(nèi)Th因子改變與療效關系

葉遠飛 周潔莉 賴 鸚

目的 研究白細胞介素2干預肺結核復治患者體內(nèi)輔助T細胞因子改變與療效。方法 選自2012年3月～2012年12月就診于贛州市第五人民醫(yī)院結核科的復治肺結核患者60例患者進行研究。采用IL-2干預對患者進行治療。治療前后，分別取患者的靜脈外周血，采用流式細胞術對治療前后患者的Th1/Th2細胞的所占百分率進行檢測。并通過細菌學檢測分析患者的痰菌轉陰情況及患者的胸部X線片情況。結果 治療后，患者外周血的Th1/Th2細胞的所占百分率明顯降低，治療前后相比較，二者差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）?；颊咧委熐芭c治療后的的轉陰率分別為61.7%與96.7%，二者差異有統(tǒng)計學意義（χ2=22.2821，P=0.0000）。TB組患者的X線狀況明顯得到改善，治療前與治療后的改善比例為21.7%和48.3%，二者比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2=11.9879，P=0.0074）。結論 IL-2干預治療后，肺結核復治患者體內(nèi)Th因子發(fā)生明顯改變，療效顯著。

肺結核；Th因子；IL-2；療效

近年來，雖然卡介苗的普及水平及抗結核藥物使用的越來越廣泛，但是全球的結核發(fā)生率仍然呈現(xiàn)增漲的趨勢[1]。臨床中對于結核的治療措施不規(guī)范，控制的效果較差，患者治療后的復發(fā)率較高。多位學者在研究中發(fā)現(xiàn)活動性肺結核的發(fā)生是由于患者體內(nèi)未產(chǎn)生針對結核桿菌的相應的免疫應答所致[2-3]?；顒有苑谓Y核患者的痰液中常會表現(xiàn)為Th1類細胞因子水平的明顯升高，血清學檢查也顯示患者體內(nèi)的Thl應答活性出現(xiàn)明顯降低。IL-2是臨床中較為常用的一種對患者免疫功能進行調(diào)節(jié)的細胞因子，在傳染病的應用也得到證實[4]。本研究中采用IL-2對肺結核復治患者進行治療，取得了良好的效果?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年3月～2012年12月就診于贛州市第五人民醫(yī)院結核科的復治肺結核患者60例進行研究。其中男40例，女20例；年齡16～60歲。中位年齡為37.2歲?；颊呔现腥A醫(yī)學會關于結核病的《肺結核診斷和治療指南》的相關診斷標準?；颊叩奶低科Y果均顯示結核抗酸桿菌陽性。患者無糖尿病、艾滋病和其他的自身免疫性疾病，患者均未使用免疫或者免疫抑制劑等藥物，無藥物傳染病史，均無嚴重的心、肝、腎功能異常等嚴重疾病。

1.2 方法 具體的步驟為：(1)患者于入院后的第2天上午，囑咐患者處于安靜環(huán)境中，空腹下，取平臥位肘靜脈5mL血用于檢測。在患者入院24h內(nèi)則采用肝素鈉進行抗凝保存，之后采用流式細胞術檢測記錄Th1細胞和Th2細胞。(2)進行外周血單個核細胞進行分離。具體操作過程中，需取3mL的新鮮的外周血，采用加布雷桿氏菌素A的洗滌沖洗劑進行對比稀釋，測定人淋巴細胞液的配比為8∶6。采用PBMC進行連續(xù)兩次的洗滌后，懸浮于1mL的RPMI 1640培養(yǎng)液。將PBMC的濃度設定為1.00×106/mL。(3)進行常規(guī)的PBMC的培養(yǎng)刺激。1mL的PBMC培養(yǎng)液中加入50μg/mL的氟波酯以及0.75μg/ mL離子霉素，之后在此反應體系中加入1mL的BFA蛋白轉運抑制劑進行刺激。最后在5%的CO2進行4h的孵育。(4)采用RPMI 1640懸浮液進行洗滌后，之后進行常規(guī)染色完成細胞表面的染色和細胞內(nèi)染色。采用流式細胞術對治療前后患者的Th1/Th2細胞的所占百分率進行檢測。并通過細菌學檢測分析患者的痰菌轉陰情況及患者的胸部X線片情況。

1.3 觀察指標 患者胸部X線片狀況的療效評價標準為：顯著吸收表示X線顯示患者的病灶吸收的范圍在1/2以上；吸收表示患者的X線顯示病灶吸收的范圍在1/2以下；不變表示患者的病灶部位無變化；惡化表示患者的病灶部位未出現(xiàn)明顯改善，甚至有加重的趨勢。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS16.0進行統(tǒng)計分析。正態(tài)計量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 治療前后外周血Th1/Th2細胞的所占百分率 治療后，患者外周血Th1細胞及Th2細胞百分率較治療前患者外周血Th1細胞及Th2細胞百分率下降（P＜0.01，見表1）。

表1 治療前后患者外周血Th1/Th2細胞的所占百分率的檢測結果（%）

2.2 患者治療前后痰菌陰轉情況 治療后，患者的轉陰率明顯高于治療前，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=22.2821，P=0.0000，見表2）。

表2 治療前后痰菌陰轉情況

2.3 治療前后患者胸部X線片表現(xiàn)的變化情況 治療后，TB組患者的X線狀況明顯得到改善，治療前后比較差異有統(tǒng)計學意義（χ2=11.9879，P=0.0074，見表3）。

表3 患者治療前后的胸部X線片的變化情況[n(%)]

3 討論

臨床研究發(fā)現(xiàn)活動性肺結核的發(fā)生是由于患者體內(nèi)未產(chǎn)生針對結核桿菌的相應的免疫應答所致[5]。臨床研究顯示，在對結核病治療過程中，調(diào)節(jié)患者的免疫功能成為治療的最有治療前景的方案，成為用于肺結核治療的二線用藥[6]。IL-2主要通過誘導和促進患者體內(nèi)的細胞毒性的T細胞、LAK細胞以及NK細胞的增殖，進而使得B細胞分化成熟，促進患者自身抗體的形成[7]。從而在免疫調(diào)節(jié)過程中，起到雙向調(diào)節(jié)的作用。此外，臨床研究也證實，IL-2可與常規(guī)的抗結核治療相結合，從而進一步提高治療的效果，加速患者痰菌轉陰，促進患者病灶部位的吸收[8]。

本研究結果顯示，采用IL-2對肺結核復治的患者進行治療，患者外周血中的Th1細胞及Th2細胞所占百分率出現(xiàn)明顯的下降，表示患者體內(nèi)的體液免疫的功能出現(xiàn)明顯的下降，提示在對肺結核復治的患者的治療過程中，體液免疫的下降時結核分枝桿菌產(chǎn)生耐藥，進而影響療效的關鍵原因?；颊咧委熐芭c治療后的的轉陰率分別為61.7%與96.7%，表明患者在經(jīng)過治療后的痰菌轉陰率明顯升高，治療取得了較好效果。X線的顯影在治療前與治療后的改善比例為21.7%和48.3%，說明患者的病灶吸收的范圍明顯增大，表示患者的病情狀況出現(xiàn)明顯的好轉，治療取得了良好效果。

綜上所述，采用適當劑量的IL-2對患者進行治療，可顯著增強體內(nèi)抗結核桿菌的細胞免疫能力，提高機體的免疫力，效果顯著。

[1] 胡良安，李岱容，羅永艾，等.肺結核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+調(diào)節(jié)T細胞增多并抑制抗結核免疫[J].第三軍醫(yī)大學學報，2011，33(20)：2124-2127.

[2] 劉朝暉，陳穎峰，覃杰，等.免疫損害與免疫正?；颊呓櫺苑谓Y核CT表現(xiàn)的對比研究[J].影像診斷與介入放射學，2011，20(5)：334-337.

[3] 陳廷，聶尚丹，趙建磊，等.肺結核患者免疫功能狀態(tài)的研究[J].中華疾病控制雜志，2011，15(5)：381-383.

[4] 高智，蔣之，萬軻，等.初治肺結核患者強化治療前后檢測IL-2、SIL-2R及IL-4的臨床意義[J].安徽醫(yī)藥，2012，16(2)：215-216.

[5] 薛欣，邱奕.重組人白細胞介素-2輔助治療初治涂陽肺結核臨床觀察[J].臨床肺科雜志，2012，17(2)：279-281.

[6] 王心靜，曹志紅，劉金鑫，等.難治性肺結核患者PBMCs結核分枝桿菌特異性Th1細胞因子反應低下[J].中國醫(yī)師雜志，2012，14(10)：1300-1302.

[7] 孫巍，楊永輝，李登瑞，等.NKT細胞、NK細胞和T細胞亞群在活動性肺結核患者外周血的表達及意義[J].中國免疫學雜志，2011，27(11)：1030-1034.

[8] 李冰雪，段新亞，李明武，等.流式微球陣列法檢測肺結核患者血清部分細胞因子的臨床意義[J].細胞與分子免疫學雜志，2012，28(3)：297-300.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.27.010

2012年贛州市指導性科技計劃項目（276）

江西 341000 江西省贛州市第五人民醫(yī)院 （葉遠飛 周潔莉）贛南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院（賴鸚）