黃龍珠，張席席，朱騰高，張興磊

(東華理工大學分析測試研究中心，江西 南昌 330013)

鄰苯二甲酸酯是一類環(huán)境內分泌干擾物，主要用作增塑劑，也用于農藥、涂料、印染、化妝品和香料等的生產[1]。有關專家表示，過多使用含鄰苯二甲酸酯的化妝品，會對人類生殖系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)造成危害[2]。例如，化妝品中的鄰苯二甲酸酯物質會通過女性的呼吸系統(tǒng)和皮膚進入體內，增加女性患乳腺癌的幾率，也會危害到她們未來生育的男嬰的生殖系統(tǒng)。美國環(huán)保局將6種鄰苯二甲酸酯類化合物(DMP、DEP、DBP、DOP、BBP、DEHP)列入129種重點控制的污染物名單中，我國環(huán)境優(yōu)先污染物黑名單中也包括3種鄰苯二甲酸酯類化合物(DMP，DBP，DOP)[3]。從2004年10月起，歐盟化妝品指令76/768/EEC禁止了一批鄰苯二甲酸酯類化學品在化妝品中的使用，今后對這一類屬化學品的禁令將繼續(xù)擴大。

目前，鄰苯二甲酸酯的檢測方法主要有高效液相色譜法[4]、氣相色譜-質譜法[5]、大氣壓化學電離-液相色譜-串聯(lián)質譜法[6]等，這些方法均需復雜的樣品前處理過程(如，用有機溶劑萃取，再通過固相萃取柱凈化)，存在操作繁瑣、費時費力等問題，且需大量有機溶劑。因此，建立一種簡便、高效、快速的化妝品中鄰苯二甲酸酯的檢測方法具有重要的現(xiàn)實意義。

電噴霧萃取電離質譜(EESI-MS)法具有以下特點：1)能夠承受復雜基質，無需任何樣品預處理即可用于復雜樣品的直接質譜分析；2) 穩(wěn)定性好、靈敏度高、分析速度快；3) 適用面廣；4) 不會受到化學污染或物理損傷；5) 可較方便地進行選擇性分子-離子或離子-離子反應研究；6) 可用于現(xiàn)場分析。

本實驗擬采用電噴霧萃取電離質譜法對5種不同品牌香水進行快速直接質譜分析，希望為香水中鄰苯二甲酸酯的分析提供方法參考。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

離子源：江西省質譜科學與儀器重點實驗室研制；LTQ-XL型線性離子阱質譜儀：美國Finnigan公司產品，配有Xcalibar數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；KQ3200B型超聲清洗儀：昆山舒美超聲儀器有限公司產品。

5種不同品牌香水：購于當?shù)卮笮蜕虉?，常溫密封保存；鄰苯二甲酸二乙?DEP)標準品(色譜純)：德國Dr. Ehrenstorfer公司產品；甲醇(色譜純)：美國ROE公司產品；乙酸(分析純)：西隴化工股份有限公司產品；實驗用水為二次蒸餾水。用甲醇溶液配制質量濃度為1.0 mg/L鄰苯二甲酸二乙酯標準儲備液，使用時再根據(jù)需要用甲醇溶液稀釋至適當濃度，配制成標準工作液。

1.2 EESI原理和裝置

EESI離子源[7-21]主要由相互獨立的電噴霧通道和樣品引入通道構成，工作原理示于圖1。電噴霧通道產生的初級帶電試劑(甲醇或水)液滴與由樣品引入通道噴出的中性樣品液滴在相對寬闊的三維空間內發(fā)生碰撞，發(fā)生在線液-液萃取反應，中性樣品中的待測物質被萃取到初級帶電試劑液滴中，形成的待測物離子通過質譜儀入口進入到質譜儀中進行質量分析。EESI離子源的電噴霧通道與質譜儀進樣口的角度(α)、樣品引入通道與質譜儀進樣口間的距離(l)、電噴霧通道與樣品引入通道間的角度(β)及距離(d)，均可根據(jù)需求進行調節(jié)，以達到最佳的實驗效果。本實驗過程中，l=10 mm，d=1 mm，α=150°，β=60°。

圖1 EESI離子源原理圖Fig.1 Schematic diagram of EESI source

1.3 質譜條件

設定LTQ-MS正離子檢測模式，掃描范圍m/z60～400；ESI電壓3.0 kV；離子傳輸管溫度100 ℃；溶劑流速3 μL/min；樣品溶液流速6 μL/min；霧化氣(N2，純度99.999%)壓力1.0 MPa。在進行串聯(lián)質譜分析時，母離子的隔離寬度為1.0 u，碰撞時間為30 ms，碰撞能量20%～25%。由于本實驗所用的EESI源是基于ESI溶劑電噴霧萃取電離中性樣品液滴中的待測物的原理，因此，依據(jù)相似相溶原理，選擇甲醇-水-2酸溶液(40∶40∶20，V/V/V)為ESI溶劑，其他參數(shù)由LTQ-MS軟件系統(tǒng)自動優(yōu)化。

2 結果與討論

2.1 鄰苯二甲酸二乙酯標準品EESI-MS譜圖

首先采用電噴霧萃取電離-串聯(lián)質譜(EESI-MS/MS)技術分析鄰苯二甲酸二乙酯標準溶液(100 μg/L)，以確定EESI離子源的工作參數(shù)。在分析鄰苯二甲酸二乙酯標準溶液一級質譜過程中，DEP會形成[M+H]+(m/z223)的準分子離子。m/z223為DEP質子化后的分子離子峰，示于圖2。進一步對DEP標準溶液進行EESI-MS/MS定性分析，二級碎片離子信號m/z177為DEP質子化分子離子[M+H]+(m/z223)丟失中性C2H5OH分子獲得，示于圖3。該實驗結果與文獻[11]報道一致。

圖2 100 μg/L DEP的EESI-MS一級譜圖Fig.2 EESI-MS spectrum of 100 μg/L DEP

圖3 100 μg/L DEP的EESI-MS二級譜圖Fig.3 MS2 spectrum of 100 μg/L DEP

2.2 鄰苯二甲酸二乙酯標準溶液的定量分析

2.2.1 線性關系 分別取質量濃度為20、50、100、500、1 000 μg/L的5個鄰苯二甲酸二乙酯標準溶液，在優(yōu)化好的工作條件下進行直接質譜分析，以m/z177作為定量碎片離子，DEP標準溶液的質量濃度作為橫坐標，所得的質譜信號強度作為縱坐標，繪制定量曲線，回歸方程為y=1 362.7x-44 061。結果表明，鄰苯二甲酸二乙酯在20～1 000 μg/L范圍內呈現(xiàn)良好的線性關系，線性相關系數(shù)R2為0.988 9，標準曲線示于圖4。當信噪比S/N=3時，根據(jù)LOD=3cσ/S(c為標準品濃度，σ為標準偏差，S為相應信號強度平均值)，計算檢測限為0.39 μg/L；當信噪比S/N=10時，定量限為5.47 μg/L。

圖4 DEP標準曲線Fig.4 The standard curve of DEP

2.2.2 回收率與精密度 分別取1.5 mL稀釋1 000倍后的1～5號樣品溶液，在1～4號樣品溶液中分別加入濃度為20 μg/L的10、80、20、15 μL DEP標準溶液，向5號樣品溶液中加入56 μL 1 000 μg/L的DEP標準溶液，配制成加標溶液，根據(jù)優(yōu)化后的工作條件進行測定，結果列于表1。結果表明，所檢測的5種不同品牌香水的方法回收率為94.8%～103.4 %，相對標準偏差(RSD)為1.5%～4.1%。

2.2.3 香水樣品中鄰苯二甲酸二乙酯含量的檢測 采用EESI-MS法分別對5種不同品牌的香水樣品進行分析，其中1、3、4號香水樣品未經(jīng)稀釋，直接進行EESI-MS分析；2號香水樣品稀釋10倍后，再進行EESI-MS分析；5號香水樣品稀釋100倍后，直接進行EESI-MS分析。換算后，香水樣品中實際DEP含量列于表2。結果表明，該方法適用于香水樣品中鄰苯二甲酸二乙酯含量的快速檢測，RSD為0.06%～3.4%。

表1 實際樣品加標分析結果

表2 實際樣品中DEP含量分析結果

3 結論

采用電噴霧萃取電離質譜法對5種不同品牌香水中DEP進行了快速定性定量分析。該方法具有靈敏度高、操作簡便、無需復雜的樣品預處理等優(yōu)點，并且單個樣品的測定時間小于30 s，適合于大批量樣品的快速半定量分析。如果結合小型質譜儀，該方法在香水中鄰苯二甲酸酯的現(xiàn)場快速直接質譜分析領域將有良好的應用前景。

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