楊 春，歐 超，李 瑗，蘇建家，駱成飄，盧曉旭，朱伶群，曹 驥

(廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院實驗研究部，南寧 530021)

樹鼩(Tupaiabelangeri) 是一種形似松鼠的小型哺乳動物，分類上屬哺乳綱有胎盤類，介于食蟲目和靈長目之間的一個獨立階元——攀鼩目，因其特殊分類地位和生物學特性受到了醫(yī)學生物學工作者的矚目[1]。在我國云南、貴州、廣西、廣東、海南等地均有分布。由于樹鼩具有體型小、易飼養(yǎng)、管理方便、價廉及新陳代謝和大體解剖遠比嚙齒類動物更接近人類等優(yōu)點，利用樹鼩進行人類疾病動物模型的實驗研究的多個領域，如各種類型的病毒性肝炎模型、耐藥細菌感染和敗血癥等感染性疾病模型，精神和神經(jīng)疾病模型，糖尿病、膽結(jié)石等代謝性疾病模型以及癌癥模型[2-3]。近年來，樹鼩在醫(yī)學動物實驗研究中的作用越來越受到重視。樹鼩是一種晚熟型的哺乳動物，出生至斷奶整個哺乳期是其生長發(fā)育最快和最關鍵的時期[4]，本文主要對樹鼩乳的基本組成進行分析，并與嬰幼兒配方奶和牛乳的主要成分進行比較，揭示它們之間的異同，為今后樹鼩人工育幼和飼養(yǎng)工作的開展提供經(jīng)驗。

1 材料和方法

1.1 實驗動物及實驗環(huán)境

樹鼩種群購自中國科學院昆明動物研究所【SCXK(桂)2009-2002】，選取野生成年樹鼩雌雄10對；樹鼩體重雄性(140～160)g；雌性(120～140)g。動物室的溫度控制在(25～28)℃，相對濕度(60%～80%)，每日光照12 h，室內(nèi)保持清潔、安靜、通風良好?；\具大小為(70× 50 × 50)cm，籠內(nèi)架放樹枝供樹鼩攀爬，籠后側(cè)放置1個相通的(20 × 20 × 50)cm的巢箱，供母樹鼩產(chǎn)仔躲藏使用，定時清洗和消毒籠具。樹鼩按雌:雄=2:1配對，雌雄樹鼩合籠后，每周稱體重，注意觀察懷孕、分娩情況。

1.2 方法

1.2.1 母樹鼩奶的采集：選取10只分娩后(1～21)d期間的哺乳期母樹鼩，用特制的棉質(zhì)捕捉袋子將哺乳期母樹鼩固定，并暴露乳頭，消毒乳頭皮膚，用人工被動母乳喂養(yǎng)方法讓仔樹鼩自由吮吸母乳，立即按照無菌操作的方法用注射器直接采取仔樹鼩胃內(nèi)的乳汁，1次/2d，連續(xù)3-5次，每只母樹鼩采取乳汁總量約18 mL，每次采樣完畢立即凍存于-40℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 飼料：基礎日糧為大米粉、豆粉、魚粉、玉米粉、麥麩、花生油、雞蛋、維生素添加劑等組成的混合飼料，母樹鼩懷孕及哺乳期間適當增加蛋白質(zhì)的黃粉蟲，飼料和飲水任其自由食用，每日喂乳母樹鼩牛奶和水果各1次。

1.2.3 檢測方法：將所凍存樹鼩乳汁樣品低溫運送至廣西分析測試研究中心[廣西分析測試研究中心是經(jīng)中國實驗室國家認可委員會評定，獲CANCL實驗室認可證書(№：0706號)是獨立于生產(chǎn)和消費部門，具有第三方公正地位的檢驗實驗室]，由該中心按照國家標準的方法進行檢測；所用的國家標準為，灰分：參照GB/T5413.7-1997；總固形物：參照GB/T5413.8-1997；蛋白質(zhì)：參照GB/T5413.1-1997；脂肪：參照GB/T5413.3-1997；乳糖：參照GB/T5413.5-1997；鈣、鐵、鋅、鈉、鉀、鎂、銅、錳：參照GB/T5413.21-1997；磷：參照GB/T5413.22-1997。嬰幼兒配方奶粉的基本成分參照國家標準[5](China National Standardization Management Committee 2004)GB10765—1997)嬰兒配方乳粉I的規(guī)定摘錄，牛乳成分參照Malacame M[6]。主要成份有總固形物(乳中除去水和氣體之外的物質(zhì))、水、脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖等。

1.3 統(tǒng)計學方法

所有數(shù)據(jù)經(jīng)過國際標準單位換算，計數(shù)10只乳母樹鼩乳汁的檢測值的均數(shù)及標準差表示。采用SPSS 10.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計。

2 結(jié)果

樹鼩乳汁由主要成份及礦物質(zhì)成分兩大部分組成，各主要成分含量用均數(shù)及標準差表示(表1)，其中主要成份有總固形物(乳中除去水和氣體之外的物質(zhì))、水、脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖等，樹鼩乳汁的礦物質(zhì)成分主要有鈣、磷、鉀、鈉、鎂、鐵、鋅、銅、錳等組成(表2)?？傮w來說，樹鼩乳和牛乳、嬰幼兒配方乳三者的主要營養(yǎng)成分十分相似，都是由水、脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖、鈣、磷、鉀、鈉、鎂、鐵、鋅、銅、錳等組成；樹鼩乳總固形物為43.63%、脂肪為26.01%、蛋白質(zhì)為10.41%、乳糖為0.45%、灰分為0.99%(表1)。與牛乳及嬰幼兒配方乳主要營養(yǎng)成份含量相比，樹鼩乳的總固形物、灰分、蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖含量分別為牛乳的3.36、1.24、2.74、6.67、0.09倍；樹鼩乳的總固形物、灰分、蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖含量分別為嬰幼兒配方乳的1.44、0.20、0.58、1.53、0.06倍(表1，圖1)；與牛乳及嬰幼兒配方乳礦物質(zhì)成分含量相比，樹鼩乳的礦物質(zhì)成分鈣、磷、鉀、鈉、鎂、鐵、鋅含量均大于牛乳，分別為1.83、2.73、1.25、1.93、1.28、1.48倍，而均小于嬰幼兒配方乳，分別為0.66、0.85、0.34、0.26、0.85、0.24、0.49倍(圖1、2)。

表1 樹鼩乳的主要營養(yǎng)成份及含量

圖2 樹鼩乳、嬰幼兒配方乳和牛乳礦物質(zhì)成分含量比較

3 討論

隨著樹鼩在醫(yī)學動物實驗研究中的作用越來越受到重視，樹鼩的實驗動物化是目前的研究熱點。近年來，中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所獲得了樹鼩規(guī)模性繁殖的成功。中國醫(yī)學科學院醫(yī)學生物學研究所獲得樹鼩規(guī)?；敝车闹饕?jīng)驗在于：用保障營養(yǎng)均衡穩(wěn)定全價顆粒飼料喂養(yǎng)樹鼩，初產(chǎn)子代母樹鼩由具有經(jīng)產(chǎn)史的母樹鼩誘導哺乳，有效提高了子代樹鼩的繁殖率和存活率[7]。本實驗室嘗試用產(chǎn)后的母樹鼩作為乳母被動哺乳使得仔樹鼩能健康成活[8]。但在建立樹鼩疾病模型的探索中，由于要進行各種藥物、病毒干預，也應考慮人工哺乳育幼的可能。在本課題組多年的乙型肝炎樹鼩模型的研究中發(fā)現(xiàn)，利用免疫力低下的新生樹鼩(出生1～3 d)皮下注射乙型肝炎感染血清可誘導出慢性乙肝模型[9]。

母乳是雌性哺乳動物分娩后的乳腺分泌物，主要含有脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖、無機鹽類及維生素等各種成分，其主要功能是為了滿足新生動物的營養(yǎng)需要。對在自然環(huán)境中哺乳動物培育新生子代的成活率起到非常關鍵的作用，乳中各種主要成份的含量與哺乳動物的種類有關，不同種類之間，其成分和含量有較大的差別。傳統(tǒng)的嬰幼兒配方奶粉多以牛奶或者羊奶為原材料，在此基礎上通過工藝添加完善營養(yǎng)結(jié)構(gòu)以適合嬰幼兒的生長發(fā)育(參照GB10765-1997嬰兒配方奶粉Ⅰ)，其成分和含量較為全面。了解樹鼩乳的基本組成，對探討樹鼩的育幼以及馴養(yǎng)過程中飼料營養(yǎng)成分的調(diào)配研究有一定的意義。

本文對樹鼩乳汁的基本組成進行檢測，分析發(fā)現(xiàn)：樹鼩乳和牛乳、嬰幼兒配方乳三者的主要營養(yǎng)成分十分相似，都是由水、脂肪、蛋白質(zhì)、乳糖、鈣、磷、鉀、鈉、鎂、鐵、鋅、銅、錳等組成，這可能與樹鼩在生物分類上屬于親緣關系接近人類程度僅次于猴子的低等靈長類哺乳動物有關；與牛乳及嬰幼兒配方乳主要營養(yǎng)成份含量相比，樹鼩乳的主要營養(yǎng)成份含量大于牛乳及嬰幼兒配方乳的有總固形物、脂肪，分別為3.36、6.67倍及1.44、1.53倍；可能與乳母樹鼩隔天喂養(yǎng)子代樹鼩生物習性有關，為本課題組多年繁育子樹鼩的觀察發(fā)現(xiàn)乳母樹鼩隔天喂養(yǎng)子代樹鼩生物習性提供有力的依據(jù)，本課題組在多年繁育樹鼩過程中亦發(fā)現(xiàn)成年樹鼩喜歡進食面包蟲、蜂蛹等高蛋白高脂肪的食物，給孕期和哺乳期的母樹鼩補充高蛋白高脂肪的食物有利于乳汁的產(chǎn)生和仔樹鼩的生長發(fā)育。與牛乳主要成份含量相比，樹鼩乳的主要營養(yǎng)成份含量大于牛乳的有總固形物、灰分、蛋白質(zhì)、脂肪，分別為3.36、1.27、2.74、6.67倍，同時與嬰幼兒配方乳相比，樹鼩乳的主要營養(yǎng)成份含量大于嬰幼兒配方乳的有總固形物、脂肪，分別為3.36、6.67倍，與牛乳及嬰幼兒配方乳礦物質(zhì)成分含量相比，樹鼩乳的礦物質(zhì)成分鈣、磷、鉀、鈉、鎂、鐵、鋅含量均大于牛乳，分別為1.83、2.73、1.25、1.93、1.28、1.48倍，而均小于嬰幼兒配方乳，分別為0.66、0.85、0.34、0.26、0.85、0.24、0.49倍。由于牛乳及嬰幼兒配方乳的主要成分存在如此大的區(qū)別，提示人工被動喂養(yǎng)初生子樹鼩時，簡單的使用牛乳或嬰幼兒配方乳代替母乳喂養(yǎng)不易成活的原因之一。提示高脂肪低乳糖含量的乳制品是仔樹鼩人工配方乳喂養(yǎng)的特點，可以一定程度上指導人工配方乳汁成分，提高人工繁育子樹鼩的成功率，為加快樹鼩作為實驗動物化的進程提供科學依據(jù)。

本研究進一步分析發(fā)現(xiàn)，樹鼩乳中乳糖含量僅為0.47%，相比牛乳及嬰幼兒配方乳，樹鼩乳的乳糖含量遠低于牛乳和嬰幼兒配方奶粉，其機理有待進一步探討，有可能與樹鼩缺乏乳糖酶，存在乳糖不耐受有關。樹鼩乳中蛋白質(zhì)、脂肪含量高于牛乳的特點，解釋了本課題組在多年繁育樹鼩過程中亦發(fā)現(xiàn)成年樹鼩喜歡進食面包蟲、蜂蛹等高蛋白高脂肪的食物的特性，這可能與給孕期和哺乳期的母樹鼩補充高蛋白高脂肪的食物有利于乳汁的產(chǎn)生和仔樹鼩的生長發(fā)育有關。

總之，本研究提示樹鼩乳的主要營養(yǎng)成分呈現(xiàn)高脂高蛋白低糖，可為開展樹鼩人工育幼工作和搭配喂養(yǎng)飼料的營養(yǎng)成分提供一定的依據(jù)。

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