胡志成,孟薇薇,戴榮繼
(北京理工大學(xué),北京 100081)
電泳(Electrophoresis, EP)是指混懸于溶液中的樣品電荷顆粒,在電場(chǎng)影響下向著與自身帶相反電荷的電極移動(dòng)的現(xiàn)象。1937年,瑞典科學(xué)家Tiselius首先設(shè)計(jì)出第一臺(tái)電泳儀,在此基礎(chǔ)上建立研究蛋白質(zhì)分離的“自由界面電泳法(moving boundary electrophoresis)”,開(kāi)創(chuàng)電泳技術(shù)研究的新紀(jì)元。此后,電泳技術(shù)迅速發(fā)展,各種電泳技術(shù)及相關(guān)儀器相繼問(wèn)世。電泳已廣泛地應(yīng)用于分析化學(xué)、生物化學(xué)、藥理學(xué)、微生物學(xué)、食品化學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域,在生物化學(xué)研究中占有重要地位。
按照分離原理,電泳可分為移動(dòng)界面電泳、區(qū)帶電泳、等速電泳及等點(diǎn)聚焦電泳四大類(lèi)。
移動(dòng)界面電泳是不含支持物的電泳,溶質(zhì)在自由溶液中泳動(dòng),故也稱自由電泳(Free Electrophoresis)。1937年Tiselius成功地研制了界面電泳儀進(jìn)行血清蛋白電泳,它是在一U型管的自由溶液中進(jìn)行,電泳后用光學(xué)系統(tǒng)使各種蛋白所形成折光率差別成為曲線圖象,將血清蛋白分為白蛋白,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白和γ-球蛋白五種[1]。該法可以確定帶電物質(zhì)的遷移率,并且能用來(lái)研究混合物的組成成分,但是它不適用于研究低分子量的物質(zhì),主要用于蛋白質(zhì)系統(tǒng)等生物大分子的研究方面。雖然它曾取得過(guò)很大的發(fā)展,但是由于設(shè)備復(fù)雜,操作時(shí)間很長(zhǎng),不能完全地分離混合物的各個(gè)組成等一些不可克服的缺點(diǎn),已逐漸被其他電泳所代替。
區(qū)帶電泳(Zone Electrophoresis)是指有支持介質(zhì)的電泳,待分離物質(zhì)在支持介質(zhì)上電泳分離成若干區(qū)帶。又稱電色譜法,或區(qū)域離子電泳。支持介質(zhì)有多種,如濾紙、醋酸纖維膜、淀粉凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。通常在緩沖液潤(rùn)濕的介質(zhì)中產(chǎn)生電場(chǎng),使不同的帶電粒子以一定速率向一定方向移動(dòng),使樣品組分得到分離。分離后的各組分固定在支持介質(zhì)上,通過(guò)染色可顯示出不同的組分。
1.2.1 紙電泳
紙電泳法(Paper Electrophoresis)于20 世紀(jì)50 年代逐漸發(fā)展起來(lái),是以濾紙作為電泳的支持介質(zhì)的一種方法。紙電泳法采用的設(shè)備簡(jiǎn)單,應(yīng)用廣泛。最初用于蛋白質(zhì),后來(lái)也用于氨基酸、核苷酸一些低分子物質(zhì),其優(yōu)點(diǎn)在于采用濾紙與色素結(jié)合的直接電泳圖,或剪下濾紙的任何部分來(lái)抽提其中的物質(zhì)。在早期的生物化學(xué)研究中,紙電泳技術(shù)曾發(fā)揮重要作用。由于紙電泳消耗時(shí)間長(zhǎng),分辨率較差,近年來(lái)逐漸被其它更簡(jiǎn)便快速、分辨率高的電泳技術(shù)所代替。
1.2.2 醋酸纖維素薄膜電泳
醋酸纖維薄膜電泳(Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis)是以醋酸纖維薄膜為支持物,于20世紀(jì)50年代發(fā)展起來(lái)的電泳技術(shù)。該方法具有以下優(yōu)點(diǎn):①對(duì)蛋白質(zhì)樣品吸附少,無(wú)“拖尾”現(xiàn)象;②分離速度快,電泳時(shí)間短;③靈敏度高,樣品用量少;④醋酸纖維薄膜染色后背景能完全脫色,各蛋白質(zhì)染色帶分離清晰,從而提高測(cè)定的精確性。但由于醋酸纖維素薄膜吸水量較低,必須在密閉的容器中進(jìn)行電泳,并使用較低壓電流避免蒸發(fā)。目前醋酸纖維素薄膜電泳已經(jīng)廣泛用于血清蛋白,血紅蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋白,甲胎蛋白,類(lèi)固醇激素及同工酶等的分離分析中,盡管它的分辨率比聚丙酰胺凝膠電泳低,但它具有簡(jiǎn)單,快速等優(yōu)點(diǎn)[2]。
1.2.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳
20世紀(jì)60年代,聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamide Gel Electrophoresis,PAGE)得到發(fā)展。聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱Acr)單體和少量交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱Bis)通過(guò)化學(xué)催化劑(過(guò)硫酸銨),四甲基乙二胺(TEMED)作為加速劑或光催化聚合作用形成的三維空間的高聚物。聚合后的聚丙烯酰胺凝膠形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),具有濃縮效應(yīng)、電荷效應(yīng)、分子篩效應(yīng)。聚丙烯酰胺凝膠電泳是目前能根據(jù)分子大小和凈電荷多少這兩種物理性質(zhì)差別來(lái)分離分子的較好方法。它有兩種形式:非變性聚丙烯酰胺凝膠及SDS-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE);非變性聚丙烯酰胺凝膠,在電泳的過(guò)程中,蛋白質(zhì)能夠保持完整狀態(tài),并依據(jù)蛋白質(zhì)的分子量大小、蛋白質(zhì)的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開(kāi)。而SDS-PAGE僅根據(jù)蛋白質(zhì)亞基分子量的不同就可以分開(kāi)蛋白質(zhì)。該技術(shù)最初由Shapiro于1967年建立,他們發(fā)現(xiàn)在樣品介質(zhì)和丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強(qiáng)還原劑后,蛋白質(zhì)亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分子量的大小(可以忽略電荷因素)。由于凝膠的孔徑大小可根據(jù)待分離樣品物質(zhì)分子的大小來(lái)確定,故有較高的分辨率。它除了能作定性、定量分析外,還可以用來(lái)測(cè)定分子量。
等電點(diǎn)聚焦(Isoelectric FocusingElectrophoresis,IEF)是于20世紀(jì)60年代中期出現(xiàn)的技術(shù)。該方法利用一種特殊的緩沖液(兩性電解質(zhì))在凝膠(常用聚丙烯酰胺凝膠)內(nèi)制造一個(gè)pH梯度,電泳時(shí)每種蛋白質(zhì)就將遷移到等于其等電點(diǎn)(pI)的pH處(此時(shí)此蛋白質(zhì)不再帶有凈的正或負(fù)電荷),形成一個(gè)很窄的區(qū)帶。將等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)混合物加入有pH梯度的凝膠介質(zhì)中,在電場(chǎng)內(nèi)經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后,各組分將分別聚焦在各自等電點(diǎn)相應(yīng)的pH位置上,形成分離的蛋白質(zhì)區(qū)帶。
等電點(diǎn)聚焦克服了一般電泳易擴(kuò)散的缺點(diǎn)。近年來(lái),等電點(diǎn)聚焦電泳又有了新的進(jìn)展,可以分辨等電點(diǎn)只差0.001pH單位的生物分子。由于它的操作簡(jiǎn)便迅速、分辨力高、重復(fù)性好、樣品容量大,在生物化學(xué)、分類(lèi)學(xué)、分子生物學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)研究等諸方面,都得到廣泛應(yīng)用。
等速電泳(Isotachophoresis)是20世紀(jì)70年代初在普通自由界面電泳的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新新的高效電泳技術(shù),是一種用于分離具有不同凈電荷數(shù)的分子的方法。等速電泳是在樣品中加入一種高遷移率離子(其遷移率比被分離離子大)和一種低遷移率離子(其遷移率比被分離的離子?。?,樣品加在高遷移率離子和低遷移率離子之間,在外電場(chǎng)作用下,使不同離子進(jìn)行移動(dòng)。經(jīng)過(guò)電泳后,達(dá)到完全分離。被分離的不同離子的區(qū)帶按遷移率大小依次排列在高遷移率離子與低遷移率離子的區(qū)帶之間。它可以在一個(gè)水平的或垂直的平面上進(jìn)行(取決于所用儀器)。進(jìn)行分離的溶液一般是含水的介質(zhì)。在具體的操作方法上,等速電泳可分為制備型和毛細(xì)管型。前者可用于毫克量范圍內(nèi)樣品的分離分析;后者則可用于微克量范圍內(nèi)樣品的定量分析[3]。等速電泳具有高靈敏度、高分辨率、重現(xiàn)性好及消耗時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。
隨著電泳技術(shù)的相繼出現(xiàn),各種電泳分析儀被引入臨床實(shí)驗(yàn)室,并在臨床疾病的診斷中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用,為各種蛋白質(zhì)的檢測(cè)及其對(duì)各種疾病的反應(yīng)提供新的手段和依據(jù)。
人血漿中含有許多中蛋白質(zhì),這些蛋白質(zhì)在正常成人體內(nèi)分布均勻程度極高,而當(dāng)人處在疾病狀態(tài)時(shí),血漿中蛋白組分含量會(huì)發(fā)生較大的變化[4]。根據(jù)不同血清蛋白具有不同的表面電荷,根據(jù)電泳能夠?qū)Φ鞍走M(jìn)行有效的分離,并分析蛋白含量的變化,從而反映患者的身體狀態(tài)。
1937年,Tiselius提出血清蛋白的電泳分離方法,成功將血清蛋白分離得到五種蛋白。但是由于其分離效果不顯著,靈敏度較低,且耗費(fèi)大,在臨床應(yīng)用上受到較大的限制。隨著科技的發(fā)展,電泳技術(shù)愈加成熟,出現(xiàn)了靈敏度高,操作簡(jiǎn)單的電泳技術(shù),并被應(yīng)用于臨床檢測(cè)上。醋酸纖維薄膜電泳在臨床上常用于分析血、尿等樣品中的蛋白質(zhì),供臨床上診斷肝、腎等疾病參考。新鮮血清經(jīng)電泳分析后,可以準(zhǔn)確地描繪出病患蛋白質(zhì)的全貌。一般是白蛋白含量的降低,某個(gè)球蛋白區(qū)域發(fā)生升高或降低,從而反映患者的身體狀態(tài)。
血清含有各種蛋白質(zhì),其等電點(diǎn)均在pH7.5以下,若置于pH8以上的緩沖液電泳時(shí)均游離成負(fù)離子,向正極移動(dòng)。由于其等電點(diǎn),分子量和分子形狀各不相同,其電泳速度不同。按其游動(dòng)速度順序把血清蛋白粗略分為清蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白。臨床上血清白蛋白的減少與γ球蛋白增高為肝病患者血清蛋白電泳所共有的現(xiàn)象,其減少與增加的程度和肝炎的損傷的范圍相并行。急性炎癥時(shí),可見(jiàn)α1、α2區(qū)百分率升高;腎病綜合征、慢性腎小球腎炎時(shí)呈現(xiàn)白蛋白下降,α2球蛋白升高,β球蛋白也升高;缺鐵性貧血時(shí)可由于轉(zhuǎn)鐵蛋白的升高而呈現(xiàn)β區(qū)帶增高[5]。
此外,血清蛋白電泳檢測(cè)在非霍奇金淋巴瘤(nonhodgkin’s lymphoma,NHL)的臨床診斷上也具有一定意義。非霍奇金淋巴瘤是一組常見(jiàn)的血液系統(tǒng)惡性腫瘤,大部分為B細(xì)胞。NHL已發(fā)生早期遠(yuǎn)處擴(kuò)散,有的病例在臨床確診時(shí)已播散至全身。溫冠輝等[6]使用毛細(xì)管電泳,分離出的正常血清蛋白電泳可以分為6條區(qū)帶即:清蛋白帶、α1區(qū)帶、α2區(qū)帶、β1區(qū)帶、β2區(qū)帶及γ區(qū)帶。NHL患者血清蛋白電泳結(jié)果顯示,α1區(qū)結(jié)果顯著升高,α2區(qū)及格過(guò)明顯升高,β1區(qū)結(jié)果顯著降低,而清蛋白、β2、γ區(qū)帶蛋白結(jié)果變化不明顯。通過(guò)血清蛋白電泳,觀察各蛋白區(qū)帶結(jié)果變化,可能對(duì)NHL的診斷提供一定參考。
因此,通過(guò)電泳技術(shù)分析血清蛋白的變化,對(duì)疾病診斷和預(yù)后的評(píng)估具有重要的臨床意義。
腎小球疾病是引起腎功能衰竭的主要原因。在正常生理情況下,由于孔徑屏障、電荷屏障及球內(nèi)系膜組成的腎小球?yàn)V過(guò)屏障的作用,尿液中蛋白含量甚微。當(dāng)腎小球通透性增高或?yàn)V膜受損,腎小管重吸收能力減弱,腎或其他組織分泌增加時(shí),即產(chǎn)生蛋白尿。蛋白尿的選擇性指數(shù)可以描述腎小球?qū)Υ蠓肿油ㄍ感缘母淖儭Mㄟ^(guò)電泳分析尿蛋白的蛋白質(zhì)組成,可幫助分析蛋白尿性質(zhì)來(lái)源,從而有助于病因診斷和預(yù)后判斷[7~9]。
尿蛋白電泳的主要目的是在無(wú)損傷情況下,協(xié)助臨床分析判斷腎臟病變的程度。尿蛋白電泳取材方便,無(wú)創(chuàng)傷性,且敏感度高,這樣可以避免進(jìn)行腎活檢,從而減輕病人痛苦。目前主要采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)及用十二磺基磺酸鈉-瓊脂糖凝膠(SDSAGE)進(jìn)行非濃縮尿蛋白電泳檢測(cè)。
尿蛋白與SDS反應(yīng),形成帶有大量負(fù)電荷的復(fù)合物,帶上的大量負(fù)電荷,大大超過(guò)了蛋白質(zhì)原有的電荷,從而掩蓋各種蛋白質(zhì)原有的電荷差異,使得蛋白質(zhì)的遷移率僅僅反映蛋白質(zhì)壓機(jī)相對(duì)分子量的差別。通過(guò)電泳,將蛋白質(zhì)按照相對(duì)分子量大小順序,分離出蛋白質(zhì)區(qū)帶,從而對(duì)蛋白尿進(jìn)行分型[10]。尿蛋白電泳呈現(xiàn)出的中、高分子蛋白區(qū)帶主要是反映腎小球病變,而呈現(xiàn)出低分子蛋白區(qū)帶是反映腎小管病變或溢出性蛋白尿;混合型蛋白尿經(jīng)過(guò)電泳可見(jiàn)到各種區(qū)帶。尿蛋白對(duì)臨床癥狀不明顯及輕度蛋白尿患者的病情診斷及腎臟疾病在治療過(guò)程中病情的動(dòng)態(tài)分析也具有很大價(jià)值。
此外,尿蛋白電泳在糖尿病腎病的檢測(cè)應(yīng)用具有重要的臨床意義。糖尿病腎病是糖尿病的重要并發(fā)癥之一,是糖尿病人死亡的重要原因。糖尿病腎病發(fā)病隱匿,逐漸引起全身的小動(dòng)脈硬化病變,腎臟為最常受累的靶器官之一,并可累及腎小球和腎小管,在沒(méi)有治療干預(yù)情況下,微量清蛋白尿患者在七年內(nèi)有50%進(jìn)入尿毒癥期[11]。而通過(guò)非濃縮尿蛋白電泳,可以較直觀地了解尿蛋白的組分及腎臟受損部位和程度,對(duì)腎損害的早期定位、鑒別診斷、指導(dǎo)治療及預(yù)后判斷具有臨床價(jià)值[12]。
中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)炎癥與一些中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),CNS具有免疫活性,并且與外周免疫系統(tǒng)相互作用。腦脊液(Cerebro-Spinal Fluid,CSF)檢查對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多種疾病的鑒別診斷、病情觀察、指導(dǎo)應(yīng)用等方面能提供重要依據(jù)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥性疾病,顱內(nèi)和椎管的疾病變化急劇,需要正確的診斷和積極的治療,而對(duì)血腦屏障的完整性評(píng)價(jià)以及對(duì)椎管內(nèi)和顱內(nèi)炎性病變的診斷,需要依賴于CSF內(nèi)相關(guān)特征性指標(biāo)的檢驗(yàn)。當(dāng)疾病發(fā)生時(shí)一些血清蛋白質(zhì)成分可以在CSF中出現(xiàn),在CSF中含量最豐富、檢測(cè)最容易的蛋白質(zhì)是白蛋白,其次則是IgG?,F(xiàn)階段臨床上診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變主要依靠影像學(xué)結(jié)合臨床分析,但對(duì)某些中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變,如多發(fā)性硬化、格林巴氏綜合癥,早期診斷非常困難,病變?cè)缙谟跋駥W(xué)及常規(guī)檢查無(wú)法診斷,而患者腦脊液中免疫球蛋白IgG增加發(fā)生早,腦脊液蛋白電泳IgG形成典型寡克隆區(qū)帶,是早期診斷重要的、不可少的依據(jù)[13~15]。
腦脊液中的寡克隆區(qū)帶、IgG鞘內(nèi)合成率的變化也可為診斷神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病提供依據(jù),二者的聯(lián)合檢測(cè)可提高神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病的診斷陽(yáng)性率。由于該方法特異性較高,敏感性強(qiáng),國(guó)外學(xué)者也將腦脊液寡克隆區(qū)帶區(qū)及IgG鞘內(nèi)合成率聯(lián)合檢測(cè)作為早期診斷多發(fā)性硬化的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)[16]。
此外,腦脊液寡克隆區(qū)帶在神經(jīng)精神性狼瘡早期診斷中具有臨床意義。神經(jīng)精神性狼瘡臨床診斷困難,有研究顯示當(dāng)系統(tǒng)性紅斑狼瘡合并神經(jīng)系統(tǒng)病變時(shí)可有腦脊液壓力、蛋白、細(xì)胞數(shù)的增高,還有免疫球蛋白、抗核抗體等改變。而患者腦脊液免疫球蛋白IgG增加發(fā)生早,且更具有特異性,腦脊液蛋白電泳IgG形成典型寡克隆區(qū)帶。腦脊液寡克隆區(qū)帶是經(jīng)過(guò)免疫固定電泳后在腦脊液泳道中出現(xiàn)的異常條帶,可以明確判斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)源性合成免疫球蛋白的存在。且檢測(cè)結(jié)果表明神經(jīng)精神性狼瘡患者較對(duì)照組,腦脊液的寡克隆區(qū)帶陽(yáng)性率明顯升高,從而間接反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫反應(yīng)過(guò)程的強(qiáng)烈程度,對(duì)神經(jīng)精神性狼瘡的早期發(fā)現(xiàn)提供臨床依據(jù)[17]。
目前腦脊液蛋白質(zhì)電泳通常用瓊脂糖凝膠或醋酸纖維薄膜作為載體,若采用等電聚焦電泳可提高電泳圖譜的分辨率。由于腦脊液中蛋白質(zhì)含量少,因此在電泳前須將腦脊液標(biāo)本在高分子聚乙二醇或右旋糖苷透析液中濃縮。近年來(lái)應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳法進(jìn)行腦脊液蛋白質(zhì)電泳分析可進(jìn)一步提高分辨率且腦脊液標(biāo)本無(wú)需濃縮。
在動(dòng)、植物中,一種酶的同工酶在各組織、器官中的分布和含量不同,形成各組織特異的同工酶譜,叫做組織的多態(tài)性,體現(xiàn)各組織的特異功能。同工酶電泳在臨床上被用于同工酶或同工酶亞型的分析。
用瓊脂糖凝膠電泳法(Agarose Gel Electrophoresis,AGE)將乳酸脫氫酶同工酶分離,得到5種同工酶區(qū)帶(LDH1~LDH5)。可用于診斷為急性心肌梗塞(當(dāng)LDH1>LDH2)及骨骼肌疾?。↙DH5升高)的診斷鑒別。而當(dāng)惡性腫瘤及肝硬化時(shí),可發(fā)現(xiàn)LDH5明顯升高,或者在胸腹水電泳中出現(xiàn)一條異常的LDH6區(qū)帶。
采用瓊脂糖凝膠電泳法可分離出三種肌酸激酶(CreatineKinase, CK)同工酶。心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)是肌酸激酶同工酶中的一種,主要分布于心肌中,可作為心肌梗死的早期血清酶學(xué)診斷指標(biāo)。凝膠電泳分析是鑒定心肌型肌酸激酶同工酶最常用的方法。當(dāng)在臨床中遇到患者血清 CK-MB活性高于正常,且占總心肌型肌酸激酶活性超過(guò) 30%時(shí),一般不是心肌損傷所致,可進(jìn)行同工酶電泳分析,以確定病因和明確診斷[18]。
堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP)主要用于肝、膽及骨骼疾病的診斷和鑒別診斷。通過(guò)測(cè)定ALP總活性及其同工酶對(duì)引起ALP活性增高的疾病具有診斷和鑒別診斷的意義[19]。采用瓊脂糖凝膠電泳法可對(duì)ALP同工酶進(jìn)行常規(guī)快速分析,對(duì)疾病的診斷提供依據(jù)。
脂蛋白電泳主要用于高脂蛋白血癥分型,也有助于了解冠心病的血脂狀態(tài),更好地指導(dǎo)臨床診療工作。利用脂蛋白中所含載脂蛋白電荷的不同、顆粒大小不同以及分子量、等電點(diǎn)的不同,通過(guò)電泳法將各種脂蛋白分成4大類(lèi):乳糜微粒(CM)、前-β脂蛋白、β-脂蛋白和α-脂蛋白,分別相當(dāng)于超速離心法分離的乳糜微粒、極低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)[20]。
脂質(zhì)代謝紊亂與冠心病的發(fā)生關(guān)系密切。低密度脂蛋白和高密度脂蛋白是膽固醇(C)主要的轉(zhuǎn)運(yùn)體,LDL是冠心病的重要危險(xiǎn)因素,HDL冠心病的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)。LDL-C/HDL-C比值是冠心病重要危險(xiǎn)因子之一,隨著比值的增大,冠心病的危險(xiǎn)性相應(yīng)增大。通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳結(jié)合酶顯色法,將膽固醇脂蛋白分離,分析LDL-C及HDL-C水平,有利于臨床做出準(zhǔn)確判斷,做好冠心病的預(yù)防工作,從而降低死亡率[21]。
隨著時(shí)代的進(jìn)步,電泳技術(shù)也不斷發(fā)展,在各方面的應(yīng)用也愈加廣泛。電泳技術(shù)在醫(yī)學(xué)臨床上的應(yīng)用,為各種疾病的診斷及患者病情的動(dòng)態(tài)分析等提供了更為便捷、直觀的方法。隨著電泳技術(shù)的不斷改進(jìn)及發(fā)展,電泳技術(shù)在臨床研究應(yīng)用與疾病的診斷、鑒別診斷等方面提供更準(zhǔn)確、更快捷的分析方法,電泳技術(shù)也必將越來(lái)越受到臨床醫(yī)學(xué)的青睞。
[1] Tiselius A. Electrophoresis of serum globulin: Electrophoretic analysis of normal and immune sera. Biochemical Journal, 1937,31(9): 1464.
[2] 陶俊鈺. 電泳技術(shù)在藥物分析中的應(yīng)用. 安徽醫(yī)藥, 2004, 9(2):125-6.
[3] 陳振江, 蘇明武. 高效電泳技術(shù)及其在藥劑學(xué)中的應(yīng)用. 中成藥,1994, 16(9): 52-52.
[4] WALL R L. The use of serum protein electrophoresis in clinical medicine. AMA archives of internal medicine, 1958, 102(4): 618-658.
[5] 沈霞. 電泳技術(shù)的現(xiàn)狀和發(fā)展. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2001, 24(5):263-265.
[6] 溫冠輝, 王淼, 金欣, 等. 非霍奇金淋巴瘤患者血清蛋白電泳結(jié)果的變化及臨床意義探討. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 34(21): 2885-2886.
[7] 栗群英, 徐萬(wàn)清, 龔陽(yáng)彬, 等. 非濃縮尿蛋白電泳在腎臟疾病診斷中的臨床應(yīng)用. 西南軍醫(yī), 2007, 9(6): 59-59.
[8] Tencer J, Bakoush O, Torffvit O. Diagnostic and prognostic signi fi cance of proteinuria selectivity index in glomerular diseases.Clinicachimicaacta, 2000, 297(1): 73-83.
[9] Corso A, Serricchio G, Zappasodi P, et al. Assessment of renal function in patients with multiple myeloma: the role of urinary proteins. Annals of hematology, 1999, 78(8): 371-375.
[10] 趙惠臨. 尿蛋白電泳對(duì)腎損傷診斷的價(jià)值. 山西醫(yī)藥雜志: 下半月, 2013 (8): 951-952.
[11] Kostapanos M S, Milionis H J, Elisaf M S. An overview of the extralipid effects of rosuvastatin. Journal of cardiovascular pharmacology and therapeutics, 2008, 13(3):157-174.
[12] 劉旭. 尿蛋白電泳對(duì)腎臟疾病的臨床應(yīng)用進(jìn)展. 中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊,2009, 11(9): 1471-1473.
[13] 邱奧望, 劉展, 郭軍. 神經(jīng)炎癥與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系. 生理科學(xué)進(jìn)展, 2001.42(5): 353-358.
[14] 徐杰偉, 曾桄?zhèn)? 蛋白電泳檢測(cè)腦脊液免疫球蛋白IgG的臨床意義探討. 實(shí)用醫(yī)技雜志, 2006, 13(22): 4006-4007.
[15] 楊洪芬, 田軍, 付蓉等. 高分辨蛋白電泳檢測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥性疾病腦脊液中免疫球蛋白(IgG)寡克隆條帶的診斷研究. 貴州醫(yī)藥, 2012, 36(10): 877-879
[16] 江麗霞, 劉春棋, 劉南海, 等. 腦脊液寡克隆區(qū)帶及IgG鞘內(nèi)合成率檢測(cè)在神經(jīng)系統(tǒng)炎性疾病診斷中的應(yīng)用. 山東醫(yī)藥, 2009,49(31): 48-49.
[17] 李明靜, 李英楠. 神經(jīng)精神性狼瘡的腦脊液寡克隆區(qū)帶的臨床分析和相關(guān)性研究. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 44(5): 536-538.
[18] 王彩云, 田亞平. 肌酸激酶—MB 假性升高原因及與疾病的關(guān)系研究. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊, 2002, 26(2): 119-120.
[19] 孫淑艷, 梁娜, 艾清. 電泳法測(cè)定堿性磷酸酶同工酶的臨床意義.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué), 2003, 7(6): 487-489.
[20] 鄢盛愷, 陳保生. 脂蛋白電泳術(shù)的研究進(jìn)展. 中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志,2000,8(4): 365-367
[21] 汪萍, 楊敏, 沈霞, 等. LDL-C/HDL-C 的比值對(duì)冠脈疾病診斷的意義. 上海交通大學(xué)學(xué)報(bào): 醫(yī)學(xué)版, 2006, 26(3): 300-303.