陳紅光，陳 曉，汪新亮

(1．湖北科技學(xué)院糖尿病心腦血管病變實(shí)驗(yàn)室，湖北 咸寧437100；2．湖北科技學(xué)院藥學(xué)院)

近年來研究發(fā)現(xiàn)大蒜具有抵抗多種疾病，增強(qiáng)體質(zhì)的作用，如可以降低血脂、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化、 防治冠心病，具有抗菌消炎、抑制腫瘤生長(zhǎng)、提高機(jī)體免疫力及延緩衰老等作用[1]。大蒜中含有多種有效成分，其中的主要成分大蒜多糖有較好的清除超氧陰離子自由基能力和配位能力[2]，并且對(duì)病毒性心肌炎、阿霉素所致的中毒性的心肌炎都有良好的防治作用。本研究通過小鼠皮下注射東莨菪堿制作學(xué)習(xí)記憶障礙模型，然后灌胃大蒜多糖進(jìn)行干預(yù)，探討大蒜多糖對(duì)學(xué)習(xí)記憶障礙的防治作用，為其用于臨床提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 動(dòng)物

小鼠，昆明種，體質(zhì)量20±5g，由湖北科技學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.1.2 藥品

大蒜多糖由湖北科技學(xué)院藥理教研室提取獲得；氫溴酸東莨菪堿注射液(上海禾豐制藥有限公司，批號(hào)：070902)。

1.1.3 儀器

ZH-200光電刺激跳臺(tái)(安微省淮北正華生物儀器有限公司)。

1.2 方法

健康小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、大蒜多糖低劑量組和高劑量組，每組15只，均按10ml/kg的灌胃體積進(jìn)行灌胃，空白對(duì)照組、模型組分別灌等體積的雙蒸水，大蒜多糖低劑量組、高劑量組分別按300mg/kg和600mg/kg的濃度灌胃，按以上劑量1次/d，連續(xù)21d。第14 d小鼠灌胃給藥后lh，模型組、大蒜多糖低劑量組和高劑量組按3mg/kg皮下注射東莨菪堿，空白對(duì)照組注射等體積的雙蒸水，10 min后進(jìn)行跳臺(tái)試驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)儀器為30cm×15cm×35cm的光電刺激反射箱，用黑色塑料分隔成兩部分，每部分右后角有一5cm×5cm×3cm的平臺(tái)作為小鼠躲避電擊的安全臺(tái)，底部有銅柵均勻分布，通36V交流電。造模10min后，將小鼠放入跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)箱中適應(yīng)3min，然后將其置于銅柵上通電。正常情況下，小鼠迅速跳到安全區(qū)以躲避電擊，然后會(huì)從安全臺(tái)再次跳下至銅柵上，受到電擊后再次跳回安全臺(tái)，可能會(huì)多次重復(fù)這一現(xiàn)象。記錄小鼠跳上平臺(tái)后3min內(nèi)從安全臺(tái)跳至銅柵上的次數(shù)(即錯(cuò)誤次數(shù))，作為小鼠的學(xué)習(xí)成績(jī)。24h后將小鼠放至安全臺(tái)，此時(shí)記下第1次跳下安全臺(tái)的時(shí)間即為觸電潛伏期和5min內(nèi)跳下安全臺(tái)至銅柵的次數(shù)作為小鼠的記憶成績(jī)。如果5min內(nèi)未跳下安全臺(tái)，錯(cuò)誤次數(shù)記錄為0次，潛伏期記錄為300s[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié) 果

2.1 大蒜多糖對(duì)東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)障礙學(xué)習(xí)成績(jī)的影響

學(xué)習(xí)成績(jī)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，第1d跳臺(tái)訓(xùn)練，東莨菪堿模型組跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)較正?？瞻讓?duì)照組顯著增加(P<0.01)，大蒜多糖低劑量組和高劑量組與模型組比較，3min內(nèi)跳臺(tái)錯(cuò)誤次數(shù)顯著少于模型組(P<0.05)，見表1。

表1 大蒜多糖對(duì)東莨菪堿所致小鼠學(xué)習(xí)、記憶形成障礙的作用

2.2 大蒜多糖對(duì)東莨菪堿致小鼠學(xué)習(xí)障礙記憶成績(jī)的影響

記憶成績(jī)?cè)囼?yàn)中，第2d跳臺(tái)檢測(cè)，東莨菪堿模型組觸電潛伏期較正常對(duì)照組明顯縮短(P<0.01)；大蒜多糖低劑量組和高劑量組觸電潛伏期明顯高于模型組(P<0.05，P<0.01)。東莨菪堿模型組與空白對(duì)照組相比，5min內(nèi)錯(cuò)誤次數(shù)有增加趨勢(shì)(P<0.05)，大蒜多糖低劑量組和高劑量組與模型組相比5min內(nèi)錯(cuò)誤次數(shù)相應(yīng)減少，其中大蒜多糖高劑量組與模型組相比較，有明顯差異性(P<0.05)。

3 討 論

學(xué)習(xí)、記憶分為兩個(gè)過程，包括新行為的獲得和發(fā)展以及新行為的保持和再現(xiàn)[4]。本研究發(fā)現(xiàn)，大蒜多糖可改善小鼠被動(dòng)回避反應(yīng)的記憶獲得作用，可以拮抗東莨菪堿引起的記憶減退作用。其中，高劑量組大蒜多糖記憶改善情況較好，表明大蒜多糖對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改善有劑量依賴性的關(guān)系。

多糖結(jié)構(gòu)的多樣化賦予其在生物學(xué)和病理學(xué)中發(fā)揮著重要、獨(dú)特的生物學(xué)功能。大量研究表明，氧化自由基損傷參與腦組織衰老的過程。隨著年齡的不斷增加，機(jī)體抗氧化能力逐漸遞減，氧化自由基產(chǎn)生漸漸增多。過多的自由基可導(dǎo)致整個(gè)機(jī)體細(xì)胞的損傷。海馬組織是機(jī)體重要的學(xué)習(xí)記憶器官，氧消耗量大，又含有易于氧化的物質(zhì)，如兒茶酚氨、抗壞血酸、髓磷脂等脂質(zhì)組分，因此腦海馬組織易受累[5,6]，大蒜多糖對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力改善作用可能與大蒜多糖的抗氧化活性，清除羥基自由基能力有關(guān)，具體機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

[1]Baumgartner S,Dax TG,Praznik W,et al.Characterisati of the high-molecular weight fructan isolated from garlic (Allium sativumL)[J].Carbohydrate Res,2000,328(2):177

[2]李朝陽(yáng)，李珊，劉魁，等.大蒜多糖的分離純化及抗氧化性的研究[J].河北科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，28(3)：243

[3]王幫華，陳紅光，趙驥，等.利脈膠囊對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響[J].咸寧學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2008,22(4):279

[4]韓太真，吳馥梅．學(xué)習(xí)與記憶的神經(jīng)生物學(xué)[M]．北京：北京醫(yī)科大學(xué)、協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998：316

[5]Leutner S，Eckert A，Muller WE.ROS generation，lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in the aging brain[J].J Neural Transm,2001,108:955

[6]Knight JA.Free radicals: their history and current status in aging and disease[J].Ann Clin Lab Sci,1998,28(6):331