云南中醫(yī)學(xué)院民族醫(yī)藥學(xué)院，云南 昆明 650500

傣醫(yī)驗(yàn)方“傣痛消”對(duì)急性高尿酸血癥小鼠UA、BUN、XOD的影響

陳清華陳普駱始華張超*

云南中醫(yī)學(xué)院民族醫(yī)藥學(xué)院，云南 昆明 650500

目的觀察傣醫(yī)驗(yàn)方“傣痛消”對(duì)急性高尿酸血癥小鼠UA、BUN、XOD的影響并探討其作用機(jī)理。方法通過(guò)酵母膏灌胃復(fù)制高尿酸血癥動(dòng)物模型，以“傣痛消”、別嘌呤醇、苯溴馬隆干預(yù)，檢測(cè)血清尿酸 (UA)、尿素氮(BUN)、黃嘌呤氧化酶(XOD)的水平。結(jié)果傣痛消高、中、低劑量、別嘌呤醇均能顯著降低小鼠血UA水平(P<0.01)；傣痛消高、中、低劑量、苯溴馬隆均能顯著降低高尿酸血癥小鼠BUN濃度(P<0.01)；傣痛消高、中、低劑量、別嘌醇均能抑制高尿酸血癥小鼠血X0D活性(P<0.01)。結(jié)論傣痛消高、中、低劑量均能降低小鼠血UA水平、BUN濃度以及抑制高尿酸血癥小鼠血XOD活性，對(duì)高尿酸血癥小鼠具有良好的保護(hù)作用,其作用機(jī)理可能與抑制黃嘌呤氧化酶活性有關(guān)。

傣痛消；高尿酸血癥；血尿酸；血尿素氮；黃嘌呤氧化酶

隨著人們飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，高尿酸血癥和痛風(fēng)的發(fā)病率日益增高己成為一種常見(jiàn)多發(fā)病,流行病學(xué)調(diào)查顯示痛風(fēng)在我國(guó)的的患病率已達(dá)1.14%[1]，其不僅可以侵犯骨和關(guān)節(jié)，而且還容易累及腎臟和心血管系統(tǒng)，還常伴發(fā)或合并肥胖癥、高脂血癥、高血壓病、糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化等疾患，可導(dǎo)致致死率、致殘率的升高，對(duì)健康產(chǎn)生較大的危害。

我國(guó)傳統(tǒng)傣醫(yī)學(xué)認(rèn)為“攏蒙沙喉”(痛風(fēng)及高尿酸血癥)是因患者平素喜食香燥性熱醇酒厚味之品，積熱于內(nèi)，郁久化熱，導(dǎo)致體內(nèi)四塔功能失調(diào)，塔攏(風(fēng))偏盛，塔拎(土)壅塞，加之感受外在的冷熱病邪，內(nèi)外相合，阻滯氣血運(yùn)行使氣血運(yùn)行不暢，導(dǎo)致水塔受傷，水不制火，風(fēng)火偏盛，風(fēng)夾病邪留滯肢體關(guān)節(jié)不通而致[2]。

“傣痛消”(DaiTongXiao,DTX)是在傣醫(yī)藥單驗(yàn)方調(diào)查收集及文獻(xiàn)整理基礎(chǔ)上發(fā)掘的治療“攏蒙沙喉”(痛風(fēng)及高尿酸血癥)的有效驗(yàn)方，是傣族人民習(xí)用驗(yàn)方，具有調(diào)節(jié)四塔、清火解毒、除風(fēng)止痛、行血利水的功效。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)酵母灌胃，建立小鼠急性高尿酸血癥動(dòng)物模型，考察DTX對(duì)急性高尿酸血癥小鼠降血尿酸、血尿素氮、黃嘌呤氧化酶的影響。

1 材料與方法

1.1 藥物與試劑 “傣痛消”由云南省高校民族藥現(xiàn)代研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。用水煎提取3次，提取液濃縮，得浸膏(1ml含生藥4g)。酵母(生產(chǎn)商：英國(guó)oxoid公司,批號(hào)1173143)；別嘌呤醇(生產(chǎn)商：重慶青陽(yáng)藥業(yè)有限公司，批號(hào)：110903)；苯溴馬隆(生產(chǎn)商：宜昌長(zhǎng)江藥業(yè)有限公司，批號(hào)：1108003)；UA檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程有限公司，批號(hào)：20120511)；X0D檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程有限公司，批號(hào)：20120512)；BUN檢測(cè)試劑盒(南京建成生物工程有限公司，批號(hào)：20120504)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)昆明種小鼠70只，雄性，體重20±2g ，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。合格證號(hào)：SCK(川)2008-24，批號(hào)：0003665。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 Infinite M200 PRO 酶標(biāo)儀：瑞士Tecan公司；LG10-2．4A高速離心機(jī)：北京醫(yī)用離心機(jī)廠；HW-80A旋渦混合器：上海精科實(shí)業(yè)有限公司；電子分析天平，PrecisaXS125A；LG10-2．4A高速離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；微量移液器 美國(guó) Thermo Electron 公司。

2 方法

2.1 分組及檢測(cè)指標(biāo) 將70只雄性清潔級(jí)昆明種小鼠，用隨機(jī)數(shù)字表法，隨機(jī)分成7組(每組10只)，分為正常對(duì)照組(等體積蒸餾水)、陽(yáng)性藥物別嘌醇組 (40mg/kg)、陽(yáng)性藥物苯溴馬隆組(20mg/kg)、模型組、DTX低劑量組(2.6g/kg)、DTX中劑量組(7.8g/kg)、DTX高劑量組(23.4g/kg)，除正常組外，其余各組參照文獻(xiàn)方法[4，5]，以酵母30g/kg每天灌胃，連續(xù)1周，陽(yáng)性藥物組從第6天開(kāi)始給予別嘌呤醇(40mg/kg)灌胃,傣痛消底、中、高組從第4天開(kāi)始予以灌胃給藥，連續(xù)4天，于最后一次給藥后1h 后，各組小鼠摘眼球取血，水浴(37℃)中靜置至分層后，3000r/min離心15min，取血清測(cè)定測(cè)血清UA、BUN、XOD值。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS17．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所涉及的統(tǒng)計(jì)資料為計(jì)量資料，數(shù)據(jù)均用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較用單因素方差分析。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1 “傣痛消”對(duì)高尿酸血癥小鼠血UA、BUN的影響

注：與正常組比較，*P<0.01；與模型組比較，##P<0.01。

表2 “傣痛消”對(duì)高尿酸血癥小鼠血XOD的影響

注：與正常組比較，**P<0.01；與模型組比較，##P<0.01。

4 討論

高尿酸血癥是一種由于嘌呤代謝紊亂或尿酸排泄減少所引起的常見(jiàn)疾病，起病多較隱匿，常無(wú)臨床癥狀，稱無(wú)癥狀高尿酸血癥。繼續(xù)發(fā)展可引起痛風(fēng)急性發(fā)作、尿酸性腎病等疾病，且與高血壓、高血脂、冠心病、糖尿病等的發(fā)生有相關(guān)性，是危害人類健康的一種嚴(yán)重代謝性疾病[3]。尿酸生成增多與尿酸排泄減少是引起高尿酸血癥的主要原因，目前能夠降低血尿酸的西藥主要有兩類:①抑制尿酸產(chǎn)生的黃嘌呤氧化酶抑制劑，主要有別嘌呤醇,它可以催化次黃嘌呤和黃嘌呤氧化為尿酸[4]；②促進(jìn)腎臟清除尿酸的藥物，主要有丙磺舒、苯溴馬龍等。這些藥物或價(jià)格昂貴(如苯溴馬龍)，或容易發(fā)生過(guò)敏等不良反應(yīng)(如別嘌呤醇、丙磺舒)，使高尿酸血癥的臨床治療受到一定程度的限制[5]。

近年已發(fā)現(xiàn)一些傳統(tǒng)醫(yī)藥對(duì)尿酸的代謝有明顯的作用，如紅花、澤蘭、虎杖等中藥藥能抑制尿酸的合成[6]，土茯苓、萆薢、車前子等中藥有促使尿酸排泄的作用[7]。當(dāng)歸拈痛丸、當(dāng)歸補(bǔ)血湯、加味四妙湯等傳統(tǒng)方劑，亦可通過(guò)抑制黃嘌呤氧化酶或促進(jìn)腎臟排泄尿酸而達(dá)治療高尿酸血癥的目的[8]。

“傣痛消”是根據(jù)傣醫(yī)理論對(duì)“攏蒙沙喉”(痛風(fēng))的病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)，結(jié)合多年的臨床,并經(jīng)過(guò)臨床反復(fù)驗(yàn)證治療痛風(fēng)的有效驗(yàn)方，是云南民族醫(yī)藥單方驗(yàn)方整理研究項(xiàng)目中，重點(diǎn)篩選的10首有開(kāi)發(fā)前景的驗(yàn)方之一。

本研究中表明，“傣痛消”高中低劑量組、苯溴馬隆組、別嘌呤醇組小鼠血UA均顯著低于模型組(P<0．01)，提示“傣痛消”、苯溴馬隆、別嘌醇均能明顯降低血UA含量，同時(shí)“傣痛消”能明顯抑制高尿酸血癥小鼠血XOD活性(P<0.01)，也能明顯降低高尿酸血癥小鼠血BUN濃度(P<0.01)。

總之，本實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)了“傣痛消”具有降尿酸的作用，“傣痛消”通過(guò)抑制黃嘌呤氧化酶的活性及促進(jìn)腎臟排泄尿酸可能是治療高尿酸血癥的機(jī)制之一，同時(shí)“傣痛消”也能明顯降低高尿酸血癥小鼠血BUN濃度，具有一定的保護(hù)腎臟損傷的作用，為今后進(jìn)一步開(kāi)展作用靶點(diǎn)與作用環(huán)節(jié)奠定了前期基礎(chǔ)。

[1]苗治敏.痛風(fēng)病學(xué)[M].人民衛(wèi)生出版社,2006:10-14,63-67, 33-34.

[2]林艷芳,張超,葉建州.傣醫(yī)臨床學(xué)[M]，中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2007：108-110.

[3]趙明成,谷慧敏,陳偉,等.濁瘀清湯治療高尿酸血癥64例[J].中醫(yī)研究,2012,04：21-23.

[4]Ramallo I A，Zacchino S A，F(xiàn)urlan R L.A rapid TLC autographic method for the detection of xanthine oxidase inhibitors and super-oxide scavengers[J].Phytochem Anal，2006，17(1)：15-9.

[5]劉紹龑，苗明三.痛風(fēng)動(dòng)物模型研究現(xiàn)狀及其中醫(yī)藥治療特點(diǎn)[J].中醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，1：152.

[6]于書(shū)儀，王晶，張沙莎.機(jī)體尿酸抑制及排泄的中醫(yī)藥研究進(jìn)展[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2012，18(9)：1136-1337.

[7]陳光亮，徐叔云.高尿酸血癥動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2004，20(4)：369-373.

[8]李新強(qiáng)，王麗英.中醫(yī)藥治療高尿酸血癥的研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011,17(3)：226-227.

EffectofDaitongxiaoonBloodUricAcid,BloodUreaNitrogenandXanthineOxidaseofMicewithAcuteHyperuricemia

CHEN Qing-hua,CHEN Pu,LUO Shi-hua,ZHANG Chao*

School of Ethnic Medicine, Yunnan University of TCM, Kunming650500, China

ObjectiveTo investigate the effect of Daitongxiao on blood uric acid and blood urea nitrogen of mice with acute hyperuricemia.MethodsThe mice were divided into normal, model, allopurinol(positive control, 40 mg/kg),Benzbromarone(positive control, 20 mg/kg)，low-, mid-, and high-dose (260,780,and 2340mg/kg) DTX groups.Except the model group, mice in other groups were administered yeast (3000mg/kg) once daily for 7d．Positive control were administered allopurinol(40mg/kg) once daily for 4d since the 7thday．Other low-, mid-, and high-dose(260,780,and 2340mg/kg) DTX groups were administered since the 4thday for 4days.The blood uric acid and blood urea nitrogen were determined after the last administration.ResultCompared with the model group, DTX at mid-and high-dose could obviously decreased the blood uric acid level in mice(P<0.01), so did allopurinol (P<0.01)． DTX at low- and mid-dose could obviously decrease the blood urea nitrogen level in mice(P<0.01)ConclusionDTX could inhibit the increase of blood uric acid and blood urea nitrogen in mice with acute hyperuricemia and Its mechanism may be related to inhibit xanthine oxidase activity.

Daitongxiao; hyperuricemia; blood uric acid; blood urea nitrogen;xanthine oxidase

該研究受國(guó)家中醫(yī)藥管理局傣醫(yī)學(xué)重點(diǎn)建設(shè)學(xué)科資助。

陳清華(1978-)，男，獨(dú)龍族，云南省貢山獨(dú)龍族怒族自治縣人，講師，博士，研究方向：民族醫(yī)藥研究、基礎(chǔ)研究。

張超(1959-)，男，漢族，云南省騰沖縣人，教授，研究方向：民族醫(yī)藥臨床。E-mail：zhangc19@21cn．com

R29

A

1007-8517(2014)11-0001-02

2014.04.15)